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灯盏花MYB基因克隆及其荧光表达载体的构建   总被引:1,自引:0,他引:1  
应宇翔  何凤明  张云峰  张培书  严胜柒 《中草药》2017,48(20):4306-4315
目的克隆灯盏花MYB基因的全长序列,为解析灯盏花MYB基因的功能奠定基础。方法根据灯盏花转录组的相关信息,利用RACE方法从灯盏花中克隆到一个可能参与灯盏花乙素合成的MYB基因,在对其cDNA序列、核苷酸序列的相似性、理化性质、疏水性、跨膜结构、二级结构及三级结构进行分析预测的基础上,对其进行多序列比对并构建系统树。同时,还构建了该基因与绿色荧光蛋白的融合表达载体,并进行了初步转化研究。结果克隆获得灯盏花MYB基因,命名为ebMYB06,其开放阅读框为783 bp,编码260个氨基酸残基,相对分子质量为63 800,理论等电点(p I)为5.18,属稳定蛋白。其蛋白二级结构主要由无规卷曲、α-螺旋和β-折叠构成。根据灯盏花MYB与拟南芥MYB(AtMYB)的系统树比对分析结果,发现ebMYB基因与拟南芥中的AtMYB4、7、32、6、8和AtMYB11、12、111 2亚群的基因聚类,推测所克隆基因在结构或功能上,可能与这两组具有共同性。实验还表明所构建的表达可用于灯盏花的高效转化。结论首次从灯盏花中克隆到可能参与其苯丙烷代谢或环境响应调控的MYB基因。  相似文献   
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目的 设计合成(E)-N′-芳基亚甲基-4-(4-苯基嘧啶-2-基氨基)苯甲酰肼衍生物,并对其抗HIV-1的活性进行研究。方法 4-氨基苯甲酸乙酯为起始原料,通过5步反应合成了目标化合物,采用荧光素酶(luciferase)报告基因检测了合成化合物对于HIV-1转录抑制活性。结果 目标化合物对于HIV-1的转录具有一定的抑制活性。其中化合物7p活性最优,在2 μmol·L-1浓度下HIV-1转录抑制率为(73±0.05)%,在20 μmol·L-1浓度下HIV-1转录活性为(90±0.01)%。进一步研究表明,化合物7p以浓度依赖性在NH1和NH2细胞中抑制HIV-1的转录活性以及下调RNA聚合酶Ⅱ CTD二号位丝氨酸磷酸化。最后,分子对接表明化合物7p与CDK9有很强的结合作用。结论 该系列化合物具有较好的抗HIV-1的活性,具有进一步研究的意义。  相似文献   
3.
目的对我院近年来用药不良反应(ADR)情况的发生特点进行分析,提出合理用药建议,保障用药安全。方法回顾性分析我院自2009年1月至2012年5月报告的药物不良反应情况,对患者临床资料及药物类型等内容进行分类统计分析,针对ADR发生特点提出相关安全用药建议,加强合理用药管理。结果本组145例患者男女性别比无明显差异(P〉0.05);〉60岁患者ADR所占比例最大,为41.4%,其次为51-60岁,占22.1%,21-30岁患者所占比例最小,占4.1%;涉及8类药物共计64种,其中以抗菌药物、呼吸系统药物、中药注射剂最为常见,分别占43.8%、18.8%、15.6%,患者例数分别占50.3%、15.9%、12.4%;给药途径以静脉滴注给药最为常见,其次为肌内注射、静脉注射、皮下注射,口服给药所占比例最少;累及器官例数最多的为皮肤及其附属器官、消化系统和神经系统,分别占31.7%、24.1%、15.2%。结论抗菌药物及中药注射剂的不合理使用在ADR中占有重要比例,加强此类药物使用管理和监测可减少ADR的发生率。  相似文献   
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