药物肠道吸收研究方法概述

口服药物肠道吸收的研究方法主要包括体外法、体内法和在体法，对这3种研究方法进行简要介绍。鉴于在体肠灌流法操作简便、技术成熟、可控性强，同时又保证了神经内分泌调节与淋巴液血液供应的完整性等特点，更能反映药物吸收的真实情况，因此重点介绍了在体肠灌流法，并对在体肠灌流法中使用的循环灌流法和单向灌流法常用的几种灌流液体积校正方法等进行综述，为研究口服药物肠道吸收试验设计提供借鉴和参考。为保证试验的可操作性和实验结果的准确性，认为应根据所研究药品的性质、实验要求、试验条件等多方面因素综合考虑，选择适宜的试验方法，进而为药物剂型的开发和临床合理用药提供依据。     

2-脱氧葡萄糖联合二甲双胍抗人肝癌HepG2细胞作用及与AMPK、mTOR相关性研究

目的 考察2-脱氧葡萄糖（2-DG）联合二甲双胍（Met）协同抗人肝癌HepG2细胞作用并探索其机制。方法 刃天青法测定2-DG及Met单独及联合应用对HepG2细胞的生长抑制作用,利用金氏公式计算联合用药Q值;利用高内涵细胞成像系统考察单独及联合用药对细胞线粒体膜电位及活性氧产生的影响;Western blotting检测Cleave-Caspase 3、p-AMPK及p-mTOR的蛋白变化;考察AMPK及mTOR抑制剂对联合用药后细胞生长抑制作用的影响。结果 2-DG、Met单独应用的IC₅₀值分别为2.45及16.35 mmol/L,联合用药对细胞生长抑制具有协同作用,Q值均大于1.15;联合用药能显著降低细胞内线粒体膜电位及p-mTOR蛋白表达,显著增加细胞内活性氧产生及Cleave-Caspase3、p-AMPK蛋白表达;抑制AMPK或mTOR能显著增加联合用药对细胞的生长抑制作用（P<0.05、0.01）。结论 2-DG联合Met具有协同抑制HepG2细胞增殖作用,其机制与降低细胞线粒体膜电位,促进活性氧产生、细胞凋亡,以及非AMPK依赖性的抑制mTOR活化有关。     

知母总皂苷抗实验性抑郁作用及其机制的初探

目的探讨知母总皂苷(total timesaponin,TT)抗实验性抑郁作用并分析其可能的作用机制。方法以小鼠强迫游泳实验及悬尾实验为动物模型,考察TT抗实验性抑郁作用;以皮质酮诱导PC12细胞损伤为细胞模型,采用细胞形态学方法、MTT法、LDH法观察TT对PC12细胞损伤的保护作用。结果TT(25、50 mg.kg-1)能显著缩短小鼠不动时间,且对自主活动无明显影响。TT(0.05、0.50、5.00 mg.L-1)能明显改善皮质酮诱导的PC12细胞形态的改变,显著提高细胞存活率(P<0.01),并减少LDH的外漏(P<0.01)。结论TT具有一定的抗实验性抑郁作用,其机制部分可能是对抗皮质酮诱导的细胞损伤。     

阿哌沙班在大鼠体内药动学/药效学研究

目的 考察阿哌沙班大鼠体内药动学并评价其与药效学的相关性。方法 采用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定不同时间阿哌沙班血药浓度并绘制血药浓度-时间曲线,同时测定各时间点凝血酶原时间（PT）延长倍数并绘制药效-时间曲线,对药动及药效进行相关性分析。结果 阿哌沙班以2 mg/kg剂量iv给予大鼠,血药浓度时间曲线下面积（AUC_0-∞）、半衰期（t_1/2z）分别为（4 016.07±1 160.46）μg·h/L、（2.95±1.59）h;以10 mg/kg剂量ig给药,AUC_0-∞、t_1/2z、峰浓度（C_max）、达峰时间（t_max）、生物利用度（F）分别为（17 973.48±3 145.30）μg·h/L、（1.52±0.36）h、（4 949.12±615.38）μg/L、（1.00±0.71）h、89.5%。阿哌沙班以10 mg/kg剂量ig给药后0.5~2.0 h可显著延长PT,以各时间点PT延长倍数对血药浓度作图呈良好的线性关系。结论 阿哌沙班大鼠ig给药F高,吸收迅速,延长PT的效应与血药浓度呈现良好的相关性。     

知母总皂苷抗实验性抑郁作用的研究

目的研究知母总皂苷(total timosaponin,TT)的抗抑郁作用及其机制。方法采用小鼠强迫游泳实验,获得性无助实验,慢性温和应激模型,育亨宾毒性增强实验以及5-羟色胺酸诱导甩头实验等多种动物模型考察TT的抗实验性抑郁作用及其可能的机制。结果在小鼠强迫游泳实验中,TT(25,50mg·kg-1,qd×14d)可明显缩短小鼠的不动时间,且对自主活动无明显影响;TT(12.5,25,50mg·kg-1,qd×14d)可显著减少获得性无助小鼠的逃避错误次数;TT(25,50mg·kg-1,qd×21d)可显著增加慢性温和应激模型动物的活动次数以及蔗糖水消耗量;TT(50mg·kg-1,qd×14d)可提高育亨宾给药后4h的小鼠死亡率;并且显著增加5-羟色胺酸诱导小鼠的甩头次数。结论TT在多种抑郁模型上具有一定的抗抑郁作用,可能与增强去甲肾上腺素能及5-羟色胺能神经系统有关。     

中药辅助抗菌药治疗小儿肠系膜淋巴结炎的Meta分析

目的 系统评价中药辅助抗菌药治疗小儿肠系膜淋巴结炎的疗效。方法 检索1980-2016年中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数字化期刊全文库、中文科技期刊全文数据库（VIP）、PubMed、Medline数据库中关于中药辅助抗菌药治疗小儿肠系膜淋巴结炎的随机对照研究（RCT）,依据纳入和排除标准筛选文献,采用Jadad评分进行评价,运用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果 共纳入34篇临床RCT,3 504例患者。Meta分析结果显示试验组在有效率、治愈率、主要症状和体征缓解时间、肠系膜淋巴结恢复、复发率方面均优于对照组,两者差异具有统计学意义。结论 中药辅助抗菌药物治疗小儿肠系膜淋巴结炎疗效优于单独使用抗菌药。     

地卓西平全身和局部给药对小鼠前皮层多巴胺及其代谢产物和行为学的影响

目的研究地卓西平(MK 801)全身和局部给药对小鼠前皮层(PFC)中多巴胺(DA)及其代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的影响及行为学改变。方法通过微透析结合高效液相色谱电化学法(HPLC ECD)检测DA及其代谢产物,同时监测小鼠的自主活动。结果腹腔注射MK 801(0.6 mg.kg-1)能明显增加小鼠PFC中DA、DOPAC和HVA的水平,并明显增加小鼠自主活动次数;向小鼠PFC中局部灌注MK-801(10、50和250μmol.L-1)可以剂量依赖性地增加PFC中DA的水平和小鼠的自主活动次数,但对DOPAC和HVA没有明显的影响;无论全身给药还是局部灌注给药,小鼠PFC中DA的水平与自主活动呈明显的正性相关。结论MK 801至少部分上是直接作用于PFC的DA能神经元促进DA的释放,DA参与MK 801诱导的行为反应。     

应用蒙特卡洛模拟法优化艾沙康唑给药方案

目的根据药代动力学/药效学(PK/PD)理论,应用蒙特卡洛模拟评价艾沙康唑给药方案,为临床给药方案优化提供依据。方法结合艾沙康唑药动学及真菌药敏文献资料,采用水晶球软件,对50、100 mg 1次/d口服(po)给药及50、100、200、400 mg静脉给药(iv)共6种给药方案分别进行10 000次蒙特卡洛模拟,以达标概率(PTA)和累计反应分数(CFR)作为评价指标。结果 6种给药方案(50 mg po、100 mg po、50 mg ivgtt、100mg ivgtt、200 mg ivgtt、400 mg ivgtt)对白色念珠菌的CFR值分别为38.94%、72.42%、22.51%、59.19%、88.26%和99.49%,对烟曲霉菌的CFR值分别为30.62%、75.88%、15.49%、67.07%、86.16%和96.68%。结论艾沙康唑单日给药剂量达到200 mg及以上时,基本可以满足对大部分白色念珠菌和烟曲霉菌感染的治疗需要。     

培养板悬滴法三维细胞培养模型建立及细胞活力检测方法比较

目的 采用普通48孔平底培养板结合悬滴培养法建立人结肠癌HT29细胞的三维培养模型,并通过比较选择适合三维培养的细胞活力检测方法。方法 以237.5、316.4、421.8、562.5、750.0、1 000.0/μL、每孔10 μL的接种量接种HT29细胞于48孔平底培养板底面形成液滴,倒置培养2 d形成细胞球,补充培养液后常规培养3 d,通过倒置显微镜测量细胞球体积;采用酸性磷酸酶法（APH）、MTT法及CCK-8法（直接测定及消化后测定）测定细胞活力,比较不同检测方法的优劣。结果 HT29细胞以237.5~1 000.0/μL、每孔10 μL悬滴培养能形成较为规则的细胞球,237.5~750.0/μL细胞球体积与接种量呈良好的线性关系;APH法A值随细胞接种量增加而增大;MTT及CCK-8未经消化直接测定组A值随细胞接种量增大增加缓慢,消化后测定的A值-细胞接种量曲线与APH法相似,但细胞球消化操作复杂,且对细胞活力造成损伤。结论 采用48孔培养板悬滴法建立三维细胞培养模型,并结合APH法进行细胞活力检测,经济、准确、便于操作。