槲皮素对脂多糖刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响

目的 观察槲皮素对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法测定不同浓度槲皮素对RAW264.7细胞活性的影响.将细胞分为五组:A组(对照组)、B组(LPS干预组)、C组(LPS+槲皮素50 μmol/L)、D组(LPS+槲皮素150 μmol/L)和E组(LPS+槲皮素250μmol/L).real-time测定各组细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(Myd88)、NF-κB (p65) mRNA的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组细胞上清液白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平.结果 槲皮素在0～250 μmol/L浓度范围内对RAW264.7细胞活性没有影响.同对照组相比,槲皮素可有效降低LPS引起的TLR4、MyD88、NF-κB (p65)的mRNA表达和细胞上清液中IL-6、TNF-α分泌水平,并呈剂量依赖性(P＜0.01).结论 槲皮素可能通过抑制TLR-Myd88-NF-κB传导通路的活化,减少巨噬细胞炎症因子的分泌.     

开胸术后重症肺炎的危险因素及预防

开胸术后肺炎是胸外科术后最常见的并发症,重症肺炎是引起死亡的主要原因,治疗棘手.2004年1月至2010年6月,我们施行各类开胸手术4508例,其中58例发生重症肺炎,现总结治疗经验,以寻找危险因素和预防措施.资料和方法依据2007年美国感染病协会/美国胸科协会制订的“成人社区获得性肺炎诊断治疗指南”中关于重症肺炎的诊断标准[1],确诊2004年1月至2010年6月期间我们监护室共发生开胸术后重症肺炎58例(1.29％,58/4508例),均有多次下呼吸道分泌物半定量培养同一微生物证据支持诊断.本组男51例,女7例;平均年龄(66.88±12.57)岁.包括肺部恶性肿瘤28例、食管恶性肿瘤24例、支气管扩张症、肺大疱各1例、纵隔肿瘤1例、心脏疾病3例.下呼吸道分泌物培养共检出致病菌89株,22例检出多重致病菌,其中革兰阴性菌73.03％,革兰阳性菌13.48％,真菌13.48％.在同期患者中,按年份分布随机抽取58例可明确诊断为普通肺炎患者的资料作统计对照.统计学处理采用SPSS11.0软件分析处理,通过单因素分析和logistic回归分析调查数据.     

坎地沙坦抑制内毒素诱导的 VSM Cs 炎症因子释放的作用研究

目的：研究坎地沙坦对内毒素（LPS）诱导血管平滑肌细胞（VSMCs）炎症因子释放的影响,探讨 Toll 样受体4（TLR4）介导的信号通路在这一过程中的作用。方法原代培养大鼠 VSMCs ,四甲基偶氮唑蓝（M TT ）法测定不同浓度坎地沙坦对 VSMCs 活性的影响。将细胞分为5组：A 组（对照组）、B 组（LPS 干预组）、C 组（LPS ＋10－7 mol／L 坎地沙坦）、D 组（LPS ＋10－6 mol／L 坎地沙坦）和 E 组（LPS ＋10－5 mol／L 坎地沙坦）。实时定量 PCR 和 Western blot 测定各组细胞 TLR4、髓样分化因子88（Myd88） mRNA 和蛋白的表达、NF‐κB（p65）的核转位水平;ELISA 测定各组细胞上清液白细胞介素‐1β（IL‐1β）和肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）分泌水平;DCFH‐DA 氧化法测定细胞内活性氧（iROS）含量。使用 TLR4阻滞剂 TLR4抗体、NADPH 氧化酶阻滞剂二联苯基碘（DPI）、NF‐κB 阻滞剂 PDTC 或坎地沙坦与阻滞剂联用预处理细胞,ELISA 法测定 IL‐1β和 TNF‐α分泌水平。结果坎地沙坦在10－8～10－3 mol／L 浓度范围内对 VSMCs 活性没有显著影响。同对照组相比,坎地沙坦可以有效抑制 LPS 诱导VSMCs IL‐1β和 TNF‐α的释放,减少 TLR4、Myd88 mRNA 和蛋白的表达以及 iROS 的生成,抑制 NF‐κB（p65）的核转位,并具有剂量依赖性。 TLR4抗体、DPI 、PDTC 均能有效地抑制 LPS 诱导的炎症因子释放,坎地沙坦与阻滞剂联用显示出更强的抗炎作用。结论坎地沙坦能够减少 LPS 诱导的 VSMCs 炎症因子 IL‐1β和 TNF‐α的分泌,这一作用可能是通过抑制 TLR4／Myd88‐iROS‐NF‐κB 信号通路而实现的。