垂盆草水煎液对不同小鼠急性肝损伤模型的疗效作用

目的复制四氯化碳(CCl4)、D-氨基半乳糖胺联合内毒素(D-Gal N/LPS)、D-氨基半乳糖胺联合肿瘤坏死因子-α(D-Gal N/TNF-α)及刀豆蛋白A(Con A)诱导小鼠急性肝损伤模型,筛选针对垂盆草(Sedum Sarmentosum,SS)水煎液有效的急性肝损伤小鼠模型。方法采用152只雄性6~8周龄C57BL/6小鼠,其中80只小鼠随机分为CCl4+H2O组、CCl4+SS组、D-Gal N/LPS+H2O组、D-Gal N/LPS+SS组、D-Gal N/TNF-α+H2O组、D-Gal N/TNF-α+SS组、Con A+H2O组及Con A+SS组共8组,每组10只,观察各组生存率。其余72只小鼠随机分为Normal组、CCl4+H2O肝功能组、CCl4+SS肝功能组、D-Gal N/LPS+H2O肝功能组、D-Gal N/LPS+SS肝功能组、D-Gal N/TNF-α+H2O肝功能组、D-Gal N/TNF-α+SS肝功能组、Con A+H2O肝功能组及Con A+SS肝功能组共9组,每组8只,检测血浆ALT、AST和乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果垂盆草水煎液将CCl4小鼠急性肝损伤模型的生存率由55%提高到90%(P=0.0128)。造模24小时后,CCl4+SS组ALT为(5500.00±426.20)U/L,AST为(4383.00±358.00)U/L,LDH为(6764.00±691.30)U/L,分别低于CCl4+H2O组ALT[(10521.00±1374.00)U/L]、AST[(7328.00±947.80)U/L]、LDH[(13589.00±1542.00)U/L],差异均有统计学意义(P均0.05)。结论垂盆草水煎液对CCl4诱导小鼠急性肝损伤模型有保护作用。     

四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型的建立和优化

目的通过单次腹腔注射不同剂量的四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤,检测小鼠血浆转氨酶水平的变化,建立适合本研究的小鼠模型。方法采用6~8周龄雄性C57BL/6小鼠单次腹腔注射CCl4诱导急性肝损伤。比较不同剂量的CCl4诱导急性肝损伤小鼠的血浆转氨酶水平。将182只小鼠随机分出32只。32只小鼠随机分为3组CCl4实验组(每组8只)和正常对照组(8只),分别腹腔注射0.1%、0.2%、0.3%的CCl4橄榄油溶液(10 ml/kg)或等体积橄榄油。注射12小时后取血,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平。比较0.1%和0.2%剂量组小鼠不同时间点血浆转氨酶水平的变化。将剩余150只小鼠随机分为正常对照组(10只)、实验Ⅰ组(0.1%剂量,70只)、实验Ⅱ组(0.2%剂量,70只),实验组小鼠在造模6、12、16、20、24、48、72小时后取血,检测血浆ALT、AST的水平。结果与正常对照组相比,分别用0.1%、0.2%、0.3%CCl4处理后12小时小鼠血浆ALT、AST均明显升高(P0.05),并呈剂量依赖性。与正常对照组相比,0.1%和0.2%剂量组小鼠血浆ALT、AST的水平在早期均呈上升趋势,并分别在16小时和20小时达到高峰,随后逐渐下降,在72小时接近至正常水平。结论单次腹腔注射CCl4诱导小鼠急性肝损伤呈剂量依赖性。0.1%剂量的CCl4以及该剂量处理后16小时是建立C57BL/6小鼠急性轻度肝损伤的合适剂量与检测转氨酶水平的合适时间点。     

芥子咳喘贴早期安全性评价实验研究

目的：评价芥子咳喘贴早期安全性,为新药临床试验提供可靠依据。方法:以日本大耳白兔和Hartley豚鼠为研究对象,采用皮肤用药急性毒性试验观察空白对照组、芥子咳喘贴常规剂量组、芥子咳喘贴高剂量组日本大耳白兔用药后的一般状况及血生化等;单次及多次给药完整皮肤刺激试验观察日本大耳白兔皮肤有无红斑、水肿,以及上述变化恢复情况和时间;通过过敏试验观察Hartley豚鼠皮肤过敏情况。结果：芥子咳喘贴常规剂量组、芥子咳喘贴高剂量组对日本大耳白兔一般状况无显著影响,其死亡率为0%,肉眼观察皮肤、脊神经及各脏器未见显著异常改变;与空白对照组比较,芥子咳喘贴高剂量组肝脏、肾脏质量及脏器系数显著降低（P<0.05）,芥子咳喘贴常规剂量组与空白对照组差异无统计学意义（P>0.05）;各组日本大耳白兔血脂、肝功、肾功比较差异无统计学意义（P>0.05）;芥子咳喘贴单次给药后,各观察时间点日本大耳白兔给药部位皮肤刺激评分均为0分,多次给药改后,其刺激强度平均分值1.5分,为轻度刺激;未引起Hartley豚鼠皮肤出现红斑、水肿等过敏反应。结论：芥子咳喘贴经急性毒性试验、单次及多次给药完整皮肤刺激试验、皮肤过敏试验均未出现毒性反应,具备无毒、低刺激、无致敏性特点,经皮肤给药安全。     

气管滴注法与雾化吸入法建立小鼠急性肺损伤模型及其效果比较

目的：比较脂多糖（LPS）气管滴注法与雾化吸入法建立的小鼠急性肺损伤（ALI）模型,确立更为有效的小鼠肺损伤建模方法。方法20只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水（NS）气管滴注组、NS雾化吸入组、LPS气管滴注组和LPS雾化吸入组。分别采用气管滴注法和雾化吸入法建立肺损伤模型,5 h后进行小鼠肺湿重/干重（W/D）比值测定、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量测定、细胞分类计数及炎性细胞因子检测。结果与对照组相比,LPS气管滴注组和LPS雾化吸入组小鼠肺W/D比值,BALF中总蛋白浓度,TNF-α、IL-6、MCP-1和IL-1β等多项炎性细胞因子以及中性粒细胞数目均显著升高（P均＜0.05）;NS气管滴注组较NS雾化吸入组炎症背景高;LPS气管滴注组较LPS雾化吸入组各项肺部炎症指标组内差异大。结论雾化吸入方法对于建立小鼠ALI模型更有效。     

芥子咳喘贴对支气管炎模型小鼠药效学作用观察

目的观察芥子咳喘贴对支气管炎模型小鼠的镇咳、祛痰、抗炎的药效学作用。方法将80 只C57BL/6 小鼠随机分为空白对照组、平喘止咳贴组、芥子咳喘贴常规剂量组、芥子咳喘贴高剂量组,每组20 只。采用 氨水引咳法制备小鼠咳嗽模型、呼吸道酚红排泌实验观察排痰情况、脂多糖（LPS）鼻饲诱导法观察小鼠支气管 炎性反应。药物干预后,测定5 min 内模型小鼠咳嗽次数和潜伏时间、分光光度计检测肺泡灌洗液中酚红浓 度、微量样本多指标流式蛋白定量技术（CBA 法）检测小鼠外周血与灌洗液中白细胞介素（IL）-6、IL-10、IL-12、 干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）水平。结果与空白对照组比较, 芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组及平喘止咳贴组咳嗽次数明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;与平喘 止咳贴组比较,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组咳嗽次数明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）;而常规 剂量组、高剂量组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白对照组比较,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组 明显延长咳嗽潜伏时间,差异有统计学意义（P＜0.05）,但二者之间比较无明显差异（P＞0.05）。与空白对照组 比较,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组肺泡灌洗液酚红浓度明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）;高剂 量组肺泡灌洗液酚红浓度明显高于常规剂量组,差异有统计学意义（P＜0.05）。与空白对照组比较,常规剂量 组血浆炎性因子MCP-1、IL-6 水平明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;肺泡灌洗液中炎症因子水平比 较,各组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论芥子咳喘贴具有良好的镇咳、祛痰作用,可降低外周血炎症因 子MCP-1、IL-6 水平,芥子咳喘贴常规剂量组、高剂量组药效学作用总体相当。