肺组织中胆囊收缩素mRNA的RT-PCR方法检测

肺组织中胆囊收缩素ｍＲＮＡ的ＲＴＰＣＲ方法检测丛斌凌亦凌左敏基础医学院病理生理学教研室（０５００１７）姚玉霞王俊霞郭晓青分子生物学研究室关键词收缩蛋白类／分离和提纯；核糖核酸，信使／分析；肺；大鼠中图号Ｒ３３２．３为探讨胆囊收缩素（ＣＣＫ）的肺保...     

河北汉族人群四个Y短串联重复序列基因座遗传多态性

目的调查Y染色体特异基因座DYS438、DYS439、GATAA7.1、GATAA7.2的遗传多态性在河北汉族人群中的分布。方法应用聚合酶链反应及8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物结合银染显带技术,对DYS438、DYS439、GATAA7.1、GATAA7.2基因座进行调查。结果DYS438、DYS439、GATAA7.1、GATAA7.2基因座分别检出4、5、5、4种等位基因,基因频率分布分别为0.0359～0.6587、0.0179～0.4107、0.0122～0.4146、0.0476～0.5238,个人识别率分别为0.5121、0.6811、0.6679和0.6327;上述4个基因座组成的单倍型在164名无关男性中共观察到70种,其中有36种仅出现一次,单倍型的个人识别机率达0.9480,家系调查符合单倍型父系遗传方式。结论DYS438、DYS439、GATAA7.1、GATAA7.2基因座个人识别机率高,属较高鉴别能力的遗传标记系统,且具有明显的人群分布差异,在法医学及人类遗传学研究中具有重要的应用价值。     

河北汉族人群D7S21位点DNA多态性研究

目的探讨D7S2 1位点在河北汉族人群分布的多态性 ,为DNA指纹数据库的构建及其法医学应用提供基础资料。方法应用MVR PCR方法和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对 12 4名河北汉族人群无关个体D7S2 1位点进行了快速检测 ,并进行数字编码。结果每一个体平均得到 3 6个数字编码 ,未发现任何两个无关个体所有编码相同 ,两无关个体 3 6个编码相同的机率为 3 .4 8× 10 -18。三种重复单位a 型、t 型和o 型出现的机率分别为 4 8.5 %、4 9.5 %和 2 .1%。该位点杂合度为 0 .9876,非父排除率为 0 .974 6,多态性信息含量为 0 .9872。结论D7S2 1位点在河北汉族人群中具有高度的多态性 ,聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法简便、快速 ,具有一定的实用价值     

褪黑素对吗啡戒断大鼠脑内cAMP和cGMP含量的影响

目的 :观察褪黑素 (MT)对吗啡戒断大鼠不同脑区cAMP和cGMP含量的影响。方法 :以剂量递增法连续皮下注射吗啡建立吗啡依赖模型 ,采用放射免疫学方法测定脑内cAMP和cGMP的含量。结果 :(1)MT对大鼠吗啡戒断症状具有明显的抑制作用 ;(2 )与对照组比较 ,吗啡依赖大鼠的纹状体、间脑、中脑、脑桥和海马内cAMP含量显著增高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,cGMP含量显著下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。与吗啡依赖组比较 ,催促戒断大鼠海马和纹状体内cAMP的含量显著升高 (P <0 0 5 ) ,而cGMP含量显著下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,其他部位则无明显变化 ;(3)褪黑素急性治疗可使吗啡戒断大鼠纹状体、间脑、中脑、脑桥和海马内cAMP含量明显下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,cGMP含量明显增高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :MT可显著抑制大鼠吗啡戒断反应 ,并与调节中枢cAMP和cGMP含量有关。     

东北红豆杉中紫杉烷类化合物抑制人肺癌细胞增殖活性的研究

目的:通过研究东北红豆杉(Taxus cuspidata)中12种紫杉烷类化合物对人肺癌细胞增殖的影响,探讨这12种紫杉烷类化合物体外抑制人肺癌细胞增殖的作用以及这些化合物结构与活性之间的构效关系.方法:利用MTT法检测具有不同骨架结构的12种紫杉烷类化合物对5种人肺癌细胞株细胞增殖的抑制作用.结果:Taxinine和2α,10β-diacetyl-5-cinnamoyl-phototaxicin Ⅱ对5种实验用人肺癌细胞的增殖均有明显的抑制作用,其他10种化合物对5种实验用人肺癌细胞的增殖不显示抑制作用.结论:紫杉烷类化合物对人肺癌细胞的增殖抑制作用不仅与其骨架结构有密切关系,而且该类化合物对肿瘤细胞的抑制作用可能还与C-5位具有的肉桂酰基侧链有一定的相关性.     

东北红豆杉中三种紫杉烷类化合物体外抗癌活性研究

目的：通过观察东北红豆杉中三种紫杉烷二萜类化合物2，9-diacetyl-5-cinnamoyl-phototaxicinⅡ（1）、5-acetyhaxuspineW（2）及10-acetyhaxuspineB（3）对人乳腺癌细胞生长的影响，探讨这三种紫杉烷类化合物的抗癌作用及各化合物结构与活性之间的构效关系。方法：以人乳腺癌细胞为研究对象，采用MTT法检测3种紫杉烷类化合物对乳腺癌细胞生长的抑制率。结果：上述三个化合物对乳腺癌细胞均有不同程度的抑制作用，其中2，9-diacetyl-5-cinnamoyl-phototaxicinⅡ（1）及10-acetyltaxuspineB（3）的作用优于5-acetyhaxuspineW（2）；前两者有效浓度范围是20μmol／L-100μmol/L，后者的有效浓度为60μmol／L-100μmol／L。结论：从东北红豆杉中得到的三种紫杉烷类化合物2，9-diacetyl-5-cinnamoyl-phototaxicinⅡ（1）、5-acetyhaxuspineW（2）及10-acetyhaxuspineB（3）对人乳腺癌细胞具有较强的体外抗肿瘤活性，侧链肉桂酰基可能是有效基团之一。     

八肽胆囊收缩素对TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364 IL-6的作用及其可能的分子机制(英文)

目的: 观察硫酸化八肽胆囊收缩素（sCCK-8）对TNF-α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364 IL-6 mRNA 表达及核因子NF-κB的影响及其可能的受体机制。方法: 大鼠滑膜细胞株RSC-364经TNF-α(10　μg/L)、sCCK-8(10^-8-10^-6 mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺（2 mg/L）及溶剂单独或联合孵育3 h，用RT-PCR检测细胞IL-6、CCK-AR及CCK-BR mRNA的表达，孵育1 h，用电泳迁移率检测NF-κB活性，孵育30 min，用Western blotting检测胞浆IκB蛋白表达。结果: RSC-364细胞固有表达CCK-A/B受体，sCCK-8（10^-8-10^-6 mol/L）使IL-6、CCK-AR和CCK-BR mRNA表达进一步增高，明显增加TNF-α诱导的NF-κB活性，降低胞浆中IκB蛋白水平，并可被丙谷胺所拮抗。结论: sCCK-8通过NF-κB途径上调TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞IL-6 mRNA表达，此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现，提示CCK-8在类风湿性关节炎（RA）发病过程中可能具有调控作用。     

孤儿核受体NGFIB—β在大鼠视网膜发育过程中的表达及意义

目的观察孤儿核受体NGFIB-β在大鼠视网膜发育过程中蛋白表达的动态变化及其与增殖细胞核抗原（PCNA）的相关关系,探讨NGFIB—β在视网膜神经细胞分化中的调控作用。方法采用免疫组织化学双重染色法检测NGFIB—β、PCNA及无长突细胞特异性标记物Syntaxin-1（HPC-1）。结果NGFIB-β在视网膜发育过程中的表达出现了显著的动态变化,NGFIB-β从胚胎18d开始在大鼠视网膜组织内核层内缘出现少量表达,随着发育的进行,阳性细胞数目明显增多,生后3～7d达到高峰,之后随着细胞的成熟阳性表达又逐渐减少,与PCNA的对比观察发现,两者表达在不同的部位和不同细胞中,NGFIB-β主要表达在已分化的细胞中,在增殖细胞中不表达。HPC-1的免疫组织化学双重染色显示NGFIB-β阳性细胞为无长突细胞。结论NGFIB-β在大鼠视网膜无长突神经细胞的分化成熟中有重要调控作用。