苗药八爪金龙转录组测序与次生代谢产物合成相关基因的挖掘

目的对八爪金龙根进行转录组测序,挖掘次生代谢合成相关基因,探索八爪金龙次生代谢产物生物合成的分子基础。方法采用IlluminaHi Seq4000高通量测序技术,对八爪金龙根进行转录组测序。使用Trinity软件对获得的Unigenes数据进行过滤组装,运用KEGG数据库对Unigenes进行注释。结果共获得52249条Unigenes,其中31391条被公共数据库成功注释,1507条Unigenes被注释到次生代谢产物合成。通过对转录组数据深入挖掘发现,参与八爪金龙苯丙素生物合成的Unigenes共有126条,参与萜类化合物骨架生物合成的Unigenes数量为73条,参与黄酮类化合物生物合成Unigenes有58条,参与次生代谢后修饰的Unigenes共有253条。筛选出9条Unigenes编码4个与八爪金龙香豆素生物合成的关键酶,23条Unigenes编码8个与黄酮生物合成的关键酶,39条Unigenes编码19个与萜类生物合成的关键酶,140条CYP450基因和113条UGT基因可能参与次生代谢物的修饰。微卫星识别软件(microsatellite identification tool,MISA)分析发现八爪金龙转录组包含17 400个简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)。结论通过高通量转录组测序,初步揭示了参与八爪金龙次生代谢产物合成相关的基因,为进一步研究八爪金龙次生代谢产物合成途径关键酶的功能及其调控机制奠定了基础。     

基于UPLC-QE-HF-MS/MS技术分析红凉伞化学成分及入血成分

目的 分析红凉伞提取物化学成分及入血成分,初步阐明其可能的药效物质基础。方法 采用配对比较法将12只大鼠随机分为空白组和红凉伞给药组,每组6只。每天上、下午各给药1次,连续3 d;第4天再次给药后,取血后制备血清样品。采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术对红凉伞提取物和血清样品中化学成分进行分析鉴定。使用Compound Discoverer 3.0软件进行保留时间矫正、峰识别、峰提取等工作,根据二级质谱信息,利用Thermo mzCloud在线数据库、Thermo mzVault本地数据库,并参照有关文献和对照品质谱信息,初步鉴定红凉伞化学成分及入血成分。结果 从红凉伞提取物中共鉴定出34个化合物,主要为香豆素类、黄酮类、有机酸类、氨基酸类等成分,包括岩白菜素、槲皮素、没食子酸、L-焦谷氨酸等化合物;从血清样本中共鉴定出5个入血成分,分别为L-焦谷氨酸、丁香酸、岩白菜素、朱砂根皂苷A、麦考酚酸。结论 本研究初步推测L-焦谷氨酸、丁香酸、岩白菜素、朱砂根皂苷A、麦考酚酸是红凉伞的药效物质基础。     

不同基原八爪金龙药材中黄酮、香豆素类化学成分分析

目的:鉴定并分析不同基原八爪金龙药材中黄酮及香豆素类成分.方法:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-QE-HF-MS/MS).色谱柱为Zorbax Eclipse-C18,流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液(梯度洗脱),柱温为30℃,流速为0.3 mL/min,自动进样器温度为4℃,进样量为2...     

肉苁蓉雌激素作用有效部位化学成分及裂解规律研究

目的 以肉苁蓉总苷为研究对象进行全成分表征分析和裂解规律研究,为后续揭示肉苁蓉总苷体内作用过程和雌激素作用质量标志物奠定基础.方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术分析肉苁蓉总苷,数据经Agilent Masshunt-er Qualitative Analysis B.7软件处理,将各色谱峰在不同模式下的分...     

菟丝子拟雌激素活性的谱效相关性研究

 目的 探求不同产地菟丝子指纹图谱的雌激素样作用,为建立“指纹图谱与药效关系”的中药质量标准控制提供依据。方法 HPLC建立菟丝子不同产地的指纹图谱,子宫增重法和MTT实验筛选出菟丝子雌激素样作用的有效成分,采用双变量相关分析谱效关系。结果 建立了菟丝子药材的指纹图谱,确立26个色谱峰为共有峰。与空白组和阳性对照组比较,20号产地对小鼠子宫增重和MCF-7细胞增殖作用显著。其雌激素作用为多种化学成分共同作用的结果。结论 菟丝子不同产地的指纹图谱与其雌激素作用有一定的对应关系。     

金匮肾气总苷中马钱苷吸收及代谢动力学过程

目的：研究金匮肾气总苷中马钱苷的在体肠吸收机制和药代动力学规律。方法：采用大鼠在体肠 循环灌流法,考察药物质量浓度、肠道的pH值、不同肠段及P-gp对总苷中马钱苷肠吸收的影响;给大鼠灌胃不 同浓度的总苷,于不同时间点眼眶静脉丛采血,HPLC法测定马钱苷的质量浓度,通过3P97软件进行数据处 理。结果：在0.01-0.11 mg·mL-1范围内,总苷中马钱苷的吸收与浓度呈线性关系,不受肠道pH的影响,在十二 指肠的吸收明显优于空肠及回肠,利福平和维拉帕米分别呈现出对马钱苷吸收的抑制和促进作用。各剂量组 马钱苷的药动学行为呈线性关系,吸收、消除均较快,以一室开放模型在体内分布,与维拉帕米合用后,可显著 促进马钱苷的吸收。结论：金匮肾气总苷中马钱苷的吸收呈一级动力学过程,推测为被动扩散,其吸收受到Pgp 外排作用的影响,从药动学的角度得以验证。     

苯乙醇苷类化合物对化学性肝损伤作用的研究进展

苯乙醇苷类化合物广泛分布于双子叶植物中,在近年,苯乙醇苷类化合物成为了学界研究的目标与对象.目的:本论文在前人研究的基础之上,对苯乙醇苷类化合物进行研究.方法:阐释其苯乙醇苷类化合物化学性质、抗炎作用、抗氧化作用等一系列药理活性.结果和结论:探究经四氯化碳、酒精等致化学性肝损伤后,苯乙醇苷类化合物对肝损伤的作用机理与修复的研究.     

基于UPLC-Q-TOF-MS结合网络药理学的黄褐毛忍冬保肝活性成分及其潜在靶点研究

目的:系统研究黄褐毛忍冬的主要化学成分,基于网络药理学探讨其保肝活性成分,为其药效物质研究提供一定的参考依据.方法:利用超高效液相色谱飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对黄褐毛忍冬的主要化学成分进行分析,根据化合物的一级、二级质谱信息,并与标准品或参考文献进行比对,对黄褐毛忍冬的化学信息进行快速识别,利...