溶酶体膜蛋白-2抗体诱导中性粒细胞胞外捕网形成的实验研究

目的研究溶酶体膜蛋白-2抗体(LAMP-2-antibody)诱导中性粒细胞胞外捕网形成(NETosis)的作用,为进一步探讨这种新型细胞死亡模式在系统性小血管炎中的作用及机制奠定基础。方法采用PolymorphprepTM进行密度梯度离心法分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞,抗LAMP-2抗体刺激中性粒细胞,以及通过NADPH氧化酶抑制剂二甲苯基碘(DPI)阻断活性氧簇的产生,电镜、免疫荧光观测胞外捕网的形成,激光共聚焦检测自身抗原LAMP-2、PR3、MPO的表达。结果 LAMP-2抗体促进中性粒细胞胞外捕网NETs形成,自身抗原MPO、PR3及LAMP-2包含在NETs内,抑制NADPH氧化酶的活性可以阻断NETs形成。结论 LAMP-2抗体可能通过诱导中性粒细胞异常死亡,释放内源性危险信号,激活自身免疫反应等来维持血管炎的恶性持续状态。     

分子伴侣性自噬参与LAMP-2抗体诱导中性粒细胞胞外捕网形成

目的探讨分子伴侣性自噬在LAMP-2抗体诱导中性粒细胞胞外捕网(NETs)形成的作用及机制。方法采用PolymorphprepTM方法分离健康志愿者和抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎(AAV)患者外周静脉血中的中性粒细胞,直接离体或LAMP-2抗体刺激健康人外周血中性粒细胞,通过自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和放线菌酮(CHX)进行干预,免疫荧光观测NETs的形成,免疫荧光法和免疫印迹法检测分子伴侣自噬相关蛋白LAMP-2A、Hsc70的表达。结果与正常中性粒细胞组相比,AAV患者中性粒细胞LAMP-2A表达增加(P=0.002 3);LAMP-2抗体可诱导中性粒细胞LAMP-2A、Hsc70蛋白表达明显上调(P<0.01),CHX能明显降低LAMP-2抗体引起的LAMP-2A、Hsc70蛋白表达(P<0.000 1);与3-MA组相比,CHX组能明显减少LAMP-2抗体诱导的NETs形成(P<0.000 1)。结论 LAMP-2抗体可诱导人中性粒细胞分子伴侣性自噬增强及NETs形成,放线菌酮可抑制此过程,提示分子伴侣性自噬可能参与了NETs的形成。     

ANCA诱导中性粒细胞释放正五聚素蛋白3*

 目的：研究正五聚素蛋白3（PTX3）在中性粒细胞的表达及释放情况,为进一步探讨PTX3在抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）相关性小血管炎（AAV）中的作用及机制奠定基础。方法：采用PolymorphprepTM进行密度梯度离心分离健康志愿者和AAV患者外周静脉血中性粒细胞,通过健康人血清、AAV患者血清、TNF-α和溶酶体膜蛋白2（LAMP-2）抗体分别刺激健康人外周血中性粒细胞,ELISA检测培养上清PTX3水平,免疫荧光观察中性粒细胞胞外捕网(NETs)的形成,激光共聚焦显微镜检测可溶性识别受体PTX3 的表达。结果：LAMP-2抗体及AAV患者血清均能促进中性粒细胞PTX3的释放。与正常中性粒细胞对照组相比,LAMP-2抗体刺激组中性粒细胞上清PTX3水平明显升高（P＜0.01）; AAV患者血清刺激组中性粒细胞中PTX3表达的荧光强度显著高于用健康人血清刺激的对照组（P＜0.01）,进一步通过激光共聚焦显微镜进行形态学观察,发现PTX3由中性粒细胞通过NETs形成释放。结论：PTX3可由ANCA诱导的NETs释放至胞外,参与血管炎的病理生理过程。     

TBL+PBL+CBL教学法在血管通路进修教学中的应用

目的探讨小组教学法（team-based learning,TBL）+基于问题的教学法（problem-based learning,PBL）+案例教学法（case-based learning,CBL）在血管通路进修教学中的应用效果。方法 选取2021年9月—2022年3月于重庆医科大学附属第一医院肾脏内科进修血管通路的34名进修学员为研究对象,随机分为试验组（n=17）和对照组（n=17）。在进修教学过程中,试验组采用TBL+PBL+CBL教学法,对照组采用传统教学法。教学进行至3个月时采用闭卷理论考试+实践技能考试+教学满意度调查3种方式共同评估教学效果。结果 试验组的理论考试和实践技能考试成绩均高于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。在教学满意度调查方面,试验组在对教学内容感兴趣程度、对授课形式满意程度、对学习效果满意程度方面均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 TBL+PBL+CBL教学法在血管通路进修教学中整体效果良好,学生整体满意度较高,该教学法更贴合临床进修学习中着重增强自主学习、独立思考、团队沟通与协作、理论与实践相结合等方面能力的...     

贝那普利联合硝苯地平对血液透析患者心脏功能及血清TGF-β、内皮素-1的影响

目的探讨贝那普利联合硝苯地平对血液透析患者心功能及血清转化生长因子-β(TGF-β)、内皮素-1(ET-1)的影响。方法选取2016年3月至2017年3月该院接受治疗的维持性血液透析患者88例作为研究对象,采用随机数字表法将研究对象分为观察组和对照组,每组各44例。对照组患者给予硝苯地平进行治疗,观察组患者在对照组患者治疗的基础上联合贝那普利进行治疗,观察两组治疗前后心功能、血清TGF-β和ET-1水平,以及不良反应发生率变化情况。结果两组治疗前各心功能指标比较差异无统计学意义(P0.05);对照组治疗后各心功能指标差异无统计学意义(P0.05);观察组治疗后各心功能指标明显优于治疗前和对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组治疗前血清TGF-β、ET-1水平比较差异无统计学意义(P0.05);观察组治疗后血清TGF-β、ET-1水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后头晕、腹泻、低血压、咳嗽和高钾血症等不良反应发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论贝那普利联合硝苯地平联合治疗血液透析患者高血压能够有效改善患者心脏功能和血管功能,抑制微炎症状态,值得临床推广运用。