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目的:探讨STAT3基因小发夹RNA(shRNA)表达质粒对胃癌MKN-45细胞STAT3基因的干扰作用。方法:根据STAT3 mRNA 编码序列,设计RNA干扰靶点,构建STAT3基因的特异性小RNA干扰质粒(psiRNA-H1/STAT3),使用脂质体转染人胃癌细胞系(MKN-45细胞)。实验分为对照(A)组,psiRNA-H1转染(B)组和psiRNA-H1/STAT3转染(C)组。通过RT-PCR和Western Blot检测STAT3特异性小RNA干扰基因对胃癌细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达的影响。结果:psiRNA-H1/STAT3经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确,并经测序证实。将其成功转染MKN-45细胞后,该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05)。 结论:将成功构建的针对STAT3基因的shRNA表达载体转染MKN-45细胞,能有效抑制该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达,为STAT3基因靶向治疗提供一定的实验依据。 相似文献
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医患关系日益紧张的今天,医学人文教育的缺乏是造成该现象的主要因素,加强人文教育是医学教育面临的一个严峻问题。目前医学教育中的人文教育存在比如师资薄弱、教育形式简单等各种问题,因此,医学院校和教师必须采取有效措施来提高人文教育的质量,才能提高医学生的综合素质。本文主要分析医学教育中人文教育的必要性,并尝试提出相应的解决途径。 相似文献
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腹腔镜辅助下全结直肠切除术治疗结直肠多发性疾病 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨腹腔镜辅助下全结直肠切除术治疗结直肠多发疾病的可行性与安全性。方法:回顾性分析11例在腹腔镜辅助下进行的全结肠切除术患者的临床资料,其中家族性腺瘤性息肉病(FAP)2例,息肉癌变2例,结直肠多发癌3例,慢性溃疡性结直肠炎2例,慢性顽固性便秘2例。结果:11例腹腔镜辅助下全结肠切除术均成功,手术时间约(348±47)m in,术中出血量约(187±68)m l,术后胃肠功能恢复时间(65±18)h,辅助切口3~5 cm,术后无腹腔出血、感染、吻合口瘘等并发症;随访6~24月,大便5~12次/d;无肿瘤复发、转移。结论:在熟练掌握腹腔镜操作技术和开腹大肠切除技巧的前提下,完成腹腔镜辅助下全结直肠切除术是安全可行的。 相似文献
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目的 探讨小干扰RNA(siRNA)载体介导抑制RhoC表达对人结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 将人结肠癌细胞HT-29接种于裸鼠背部皮下,成功建立裸鼠移植瘤模型;成瘤后将RhoC-siRNA注射入裸鼠移植瘤瘤体,观察RhoC-siRNA对裸鼠移植瘤生长的影响,Western blot检测瘤体中RhoC、基质金属蛋白(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达.结果 RhoC-siRNA对结肠癌裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用,瘤体体积重量明显减轻; RhoC-siRNA治疗后瘤体内VEGF和MMP-2蛋白表达明显下降.结论 通过抑制裸鼠结肠癌移植瘤中RhoC的表达,可以抑制肿瘤的生长并下调VEGF和MMP-2的表达水平. 相似文献
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目的 观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的体外抑制作用.方法 噻唑蓝(MTT)法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用;DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响,电子显微镜法观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化;流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率.结果 胃癌细胞的增殖抑制率随SEB-scFv融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大,且对不表达MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应.1.0、10 mg/L高浓度融合蛋白组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状条带.被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化.融合蛋白0.1、1.0、10 mg/L组细胞G0/G1期前有明显的凋亡峰出现,三者凋亡率分别达到51.62%、54.21%和61.55%.而生理盐水组凋亡率仅为1.44%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SEB-scFv融合蛋白在效应细胞介导下,能对表达MG7相关抗原的胃癌细胞显示出有效的体外生长抑制作用,且在此过程中伴随有胃癌细胞的凋亡. 相似文献
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In order to investigate the origin of neointimal smooth muscle cells in transplant arterio- sclerosis in rat aortic allograft, sex-mismatched bone marrow transplantation was performed from male Wistar rats to female Wistar rats. Four weeks after transplantation, the aortic transplant model was established by means of micro-surgery in rats. The recipients were divided into 4 groups: female Wistar-female Wistar aortic isografts, female SD-female Wistar aortic allografts, male SD-male Wis- tar aortic allografts, female SD-chimera Wistar aortic allografts. Eight weeks after transplantation, aortic grafts were removed at autopsy and processed for histological evaluation and immunohisto- chemistry. The results indicated that excessive accumulation of α-SMA-positive smooth muscle cells resulted in significant neointima formation and vascular lumen stricture in rat aortic allografts. Neointima assay revealed that the neointimal area and NIA/MA ratio of transplanted artery were sig- nificantly increased in all of aortic allograft groups as compared with those in aortic isograft group (P<0.01). Neointimal smooth muscle cells were harvested from cryostat sections of aortic allograft by microdissection method. The Sry gene-specific PCR was performed, and the result showed that a dis- tinct DNA band of 225 bp emerged in the male-male aortic allograft group and chimera aortic al- lograft group respectively, but not in the female-female aortic allograft group. It was suggested that recipient bone-marrow cells, as the origin of neointimal smooth muscle cells, contributed to the pathological neointimal hyperplasia of aortic allograft and transplant arteriosclerosis. 相似文献
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目的 研究SEB-scFv融合蛋白对胃癌的抑制作用.方法 在体外通过MTT法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用;DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响;在电子显微镜下观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化;流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率.采用胃癌动物模型观察治疗后肿瘤重量和存活时间.结果 胃癌细胞的增殖抑制率随SEB-scFv融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大,且对不表达MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应;1.0μg/ml和10μg/ml高浓度融合蛋白组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状条带;在电子显微镜下可观察到被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化;融合蛋白0.1μg/ml、1.0μg/ml、10μg/ml组细胞G0/G1期前有明显的凋亡峰出现,三者的凋亡率分别达到51.62%、54.21%和61.55%,而生理盐水组凋亡率仅为1.44%,差异具有统计学意义(P<0.05).融合蛋白治疗组大鼠移植瘤的瘤重明显低于其他各组(P<0.05),抑瘤率高达61.3%,其生存时间为(31.7±2.1)d,存活时间延长达54.6%.结论 SEB-scFv融合蛋白作为一种新的抗肿瘤生物制剂有明显的抑癌效应. 相似文献
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目的 克隆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因,构建含有GDNF基因的重组腺病毒载体,为转染神经干细胞和基因治疗奠定基础。方法 从大鼠脑组织中提取总RNA,用逆转录聚合酶链反应方法扩增出约660bp的片段,并将该片段克隆到载体pAdTrack-CMV中,进行酶切鉴定和序列分析。结果 证实成功构建了含有GDNF基因的重组腺病毒质粒。结论 克隆到正确的大鼠GDNF基因,并构建出重组质粒pad—GDNF,为下一步重组腺病毒颗粒和基因治疗打下基础。 相似文献
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胃癌卵巢转移生物学特征及其意义的研究 总被引:5,自引:1,他引:4
目的探讨胃癌细胞卵巢远处转移的生物学特征及其临床意义.方法应用免疫组化方法,分别检测19例胃癌卵巢转移标本雌激素受体CD44V 6,并以10例胃癌肝脏转移病例作为对照组进行分析比较.结果肝脏转移组胃癌组织和肝脏组织的ER阳性率分别为10%和20%,卵巢转移组胃癌组织和卵巢转移组织ER阳性率分别为47.4%和73.8%,两组差异有显著性(P<0.01);肝脏转移组胃癌组织和肝脏组织的CD44V6阳性率分别为70%和60%,卵巢转移组胃癌组织和卵巢转移组织C D 44V 6阳性率分别为63.2%和42.1%,两组差异无显著性(P>0.05).结论 CD44V 6在胃癌的卵巢转移中作用无明显相关性.胃癌雌激素受体阳性率的卵巢转移癌受体阳性率呈正相关,具有ER活性的胃癌细胞,通过E2-ER的结合,导致胃癌细胞向卵巢转移. 相似文献