百里醌类似物ATQTHB对肺癌细胞株A549增殖与凋亡的影响

目的 研究人工合成百里醌类似物ATQTHB对肺癌细胞A549的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 将细胞分为5组：空白对照组、A549细胞组、A549细胞+ATQTHB干预(400μg/mL)组、人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)组、BEAS-2B细胞+ATQTHB干预组。采用CCK-8法分析细胞增殖抑制情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,采用Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达水平。结果 与A549细胞组相比,400μg/mL ATQTHB干预对A549细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05);ATQTHB干预后,人正常肺上皮细胞BEAS-2B增殖与未干预细胞间差异无统计学意义(P>0.05);与A549细胞组相比,A549细胞+ATQTHB干预组的细胞凋亡率显著增加(P<0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.05),促凋亡蛋白Bax表达增加(P<0.05);与BEAS-2B细胞组相比,BEAS-2B细胞+ATQTHB干预组的细胞凋亡率无显著改变(P>0.05),Bcl-2和Bax的蛋白表达水平差异无统计学意义(...     

同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的机制研究

目的通过观察不同浓度同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)干预对人脐静脉血管内皮细胞(HumanUmbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)和氧化应激的影响,探讨其在动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)中的作用。方法体外培养HUVEC,将其分为正常对照组(Hcy 0μmol·L-1)、Hcy干预组(浓度分别为50、100、200、500μmol·L-1)、100μM Hcy+叶酸+VitB12治疗组,每个浓度组再分为24、48、72h三个时间组。MTT法检测各组细胞增殖抑制率,测定各浓度Hcy干预HUVEC 72h的氧化应激损伤指标。结果各浓度Hcy干预组随着Hcy浓度增高及干预时间延长HUVEC的细胞增殖抑制率增加,500μM Hcy 72h干预组最明显(P<0.05)。HUVEC内H2O2和MDA含量随Hcy浓度的增加而增加,Hcy100～500μM组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);Hcy100～500μM组HUVEC内SOD活性和T-AOC活性均较对照组降低(P<0.01),并且Hcy的浓度越高降低程度越明显。100μM Hcy+叶酸+VitB12治疗组与对照组比较上述各指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Hcy抑制HUVEC增殖的作用呈剂量依赖关系,病理水平Hcy可以增强氧化应激损伤反应,而叶酸和VitB12对Hcy所致氧化应激损伤有一定的拮抗作用。     

浸润性乳腺癌中EphA2基因启动子区DNA低甲基化及与细胞焦亡的相关性

目的 ：探讨浸润性乳腺癌中肝配蛋白A型受体2(ephrin A receptor 2,EphA2)表达及其启动子区DNA低甲基化与细胞焦亡发生的相关性。方法 ：应用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测42例乳腺癌患者正常乳腺组织、癌旁组织和癌组织中EphA2的表达情况;采用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检验细胞焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 1和炎性细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平;应用巢氏甲基化特异性PCR(nested methylation-specific PCR,nMS-PCR)检验EphA2基因启动子区DNA甲基化水平;采用蛋白质印迹法测验DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferase3a,DNMT3a)蛋白表达水平;应用P...     

地方院级生物样本库建设思考

临床生物样本库的主要职责是收集、储存、管理和应用人类生物样本,同时配备相关生物样本信息管理数据库,为基础研究者提供疾病发病原因、发生发展机制的实验材料,或为临床医师进行肿瘤分期、药物筛选、靶向治疗、疗效评估、预后随访等提供相应的支持[1-2].生物样本库作为医学研究的重要资源,是连接基础研究和临床研究的重要桥梁,是转化...     

乳腺癌组织中BRCA1、ALDH1及nm23的表达及临床意义

【摘要】 目的 探讨乳腺癌组织中BRCA1、ALDH1及nm23的表达及临床意义。方法 纳入2002～2008年在宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤外科手术治疗的乳腺癌患者836例为研究对象,随访确定术后5年内因乳腺癌死亡患者为死亡组（n=49）,无瘤生存乳腺癌患者作为对照组（n=49）。应用免疫组织化学染色法检测BRCA1、ALDH1、nm23在乳腺癌组织中的表达,采用Spearman’s等级相关分析BRCA1、ALDH1、nm23的相关性。结果 死亡组BRCA1和nm23表达低于对照组(P＜005),ALDH1表达高于对照组(P＜005);乳腺癌组织中ALDH1与BRCA1、nm23呈负相关（P＜005）,BRCA1与nm23呈正相关（P＜005）。结论 BRCA1、ALDH1、nm23在乳腺癌组织中存在差异表达,其共同检测有望成为预测乳腺癌预后及指导治疗的生物学指标。     

Orbscan-Ⅱ评估LASIK术后角膜后表面曲率变化的研究

目的采用Orbscan-Ⅱ测量方法对LASIK术后患者角膜后表面曲率的变化进行评估。方法Orbscan-Ⅱ测量95例189眼LASIK术眼手术前后角膜后表面的曲率参数,高斯光学公式计算角膜后表面屈光力,对手术前后角膜后表面曲率半径和屈光力的比较采用配对t检验进行统计学分析,Bland—Altman用于其一致性和可重复性的评估。结果手术前后角膜平均曲率半径分别为（6．42±0．23）mm和（6．32±0．24）mm,即LASIK术后角膜曲率半径较术前下降,差异有统计学意义（P〈0．01）,角膜后表面屈光力手术前后分别为（-6．24±0．22）D和（-6．33±0．24）D,差异有统计学意义（P〈0．01）。LASIK手术前后角膜后表面屈光力的差异值与矫正近视量呈正相关（r=0．326,P=0．0004）。Bland—Ahman显示手术前后角膜后表面曲率半径的一致性界限为（-0．118mm,0．31mm）,角膜后表面屈光力的一致性界限为（-0．116D,0．308D）。结论Orbscan-Ⅱ可用于LASIK术后角膜后表面曲率半径的测定,联合高斯光学公式计算角膜后表面屈光力对于LASIK术后人工晶状体计算的评估是可行的。     

不同保存时间对于血液DNA提取质量的影响

目的探讨不同保存时间对于血液DNA提取质量的影响。方法将新鲜抽取的血液离心得上清,分别冻存1年、2年、3年和4年;之后进行DNA提取,并对提取的DNA的完整性和纯度等进行分析。结果冻存1年的白膜样本与新鲜全血白膜相比,其得率下降极显著,差异具有统计学意义(P 0.01);冻存2年的白膜样本与冻存1年的白膜样本相比,其得率下降呈显著水平,差异具有统计学意义(P0.05);冻存2,3,4年的白膜样本得率比较,差异无统计学意义(P 0.05)。冻存时间对于样本的提取纯度无显著性影响;冻存时间对于DNA的完整性无影响。结论在-80℃保存的白膜样本,在最初冻存时有可能会造成DNA数量上的损失,但对于纯度及完整性影响不大。