氧化应激和内质网应激在高糖诱导大鼠心肌细胞凋亡中的关系

目的探讨活性氧（ROS）介导的氧化应激（OS）与内质网应激（ERS）在高糖诱导大鼠心肌细胞凋亡中的作用关系。方法采用混合酶一步消化法分离SD大鼠乳鼠心肌细胞,将培养的心肌细胞分为3组,对照组、高糖组和抗氧化剂组,流式细胞术检测细胞凋亡,分别检测各组心肌细胞中ROS的含量和上清液中超氧化物歧化酶（SOD）的含量,以反映心肌细胞的OS水平,再利用免疫组化法和RT-PCR检测心肌细胞中内质网应激标志因子Caspase-12的表达情况。结果与对照组相比,高糖组心肌细胞中ROS含量明显增多（P〈0.01）;SOD含量显著下降（P〈0.01）;与高糖组相比,抗氧化剂组ROS含量明显降低（P〈0.01）,抗氧化剂组较高糖组ROS含量明显降低（P〈0.01）,SOD含量升高（P〈0.05）;免疫组化法检和RT-PCR测心肌细胞中内质网应激标志因子Caspase-12检测结果显示,高糖组明显大于对照组,抗氧化剂组与高糖组比较表达显著下调（P〈0.01）。结论高糖诱导的心肌细胞凋亡中,ROS启动的OS和ERS可能共同参与了心肌细胞凋亡过程。     

信息化教学背景下内分泌专业学位研究生培养初探

因临床医学教育理念的改变,我国设立专业学位以培养应用型高等医学人才。为了深化临床医学硕士研究生培养改革实行临床专业学位与住院医师规范化培训并轨。内分泌作为临床医学重要的学科之一,已经启动了以并轨的方式培养内分泌专业学位研究生的培养模式,但是由于制度并不完善,其培养模式仍存在许多问题。文章对内分泌专业学位培养中显现的不足之处进行思考与分析,提出相应的解决办法。文章论述了在信息化教学的背景下,在内分泌专业学位培养中多元化教学的可行性,比如微视频课程的普及、基于信息化翻转课堂的趣味教学、计算机模拟系统的应用以及Vlog在教学中作用的探索等,可以预见信息化教学将对内分泌专业学位研究生的培养提供巨大帮助。     

翻转课堂联合慕课学习在内分泌系统教学中的应用

目的探讨翻转课堂联合慕课学习在内分泌系统教学中的应用。方法选取锦州医科大学2015级临床医学专业学生60人作为研究对象。将其随机分成对照组和实验组,每组各30人。对照组实施传统教学模式,实验组实施翻转课堂联合慕课学习。通过笔试考核和调查问卷的形式评价教学质量和效果。结果实验组笔试成绩的总成绩、优秀率、及格率以及教学满意度均高于对照组,两组对比,差异具有统计学意义(P0.05)。结论在内分泌系统教学中应用翻转课堂联合慕课学习提高了教学质量和效果。     

活性氧激活线粒体凋亡通路介导高糖诱导心肌细胞凋亡的研究

目的探讨氧化应激和p53介导的线粒体凋亡通路在高糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的作用。方法将培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机分为四组：对照组、高糖组（葡萄糖浓度为25mmol/L）、高糖＋抗氧化剂组（抗氧化剂浓度为10mmol/L）和高糖＋p53抑制剂组（p53抑制剂浓度为50μmol/L）。荧光分光光度计检测细胞内的活性氧,分光光度计检测上清液中的超氧化物歧化酶,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot对各组细胞p53和Caspase-9进行半定量分析。结果与对照组相比,高糖组心肌细胞凋亡率（P〈0.01）和ROS明显升高（P〈0.01）,上清液中的SOD含量明显降低（P〈0.01）,Caspase-9（P〈0.01）和线粒体蛋白p53表达增多（P〈0.01）。与高糖组相比,高糖＋抗氧化剂组心肌细胞凋亡率（P〈0.01）和ROS明显降低（P〈0.01）,上清液中SOD明显升高（P〈0.01）,Caspase-9（P〈0.01）和线粒体蛋白p53表达减少（P〈0.01）。与高糖组相比,高糖＋p53抑制剂组的心肌细胞凋亡率（P〈0.01）和ROS明显降低（P〈0.05）,上清液中SOD含量升高（P〈0.05）,Caspase-9（P〈0.01）和线粒体蛋白p53表达减少（P〈0.01）。结论高糖可能通过产生的活性氧介导p53转位到线粒体激活线粒体凋亡通路,引起心肌细胞凋亡。     

振动运动对大鼠骨骼肌AMPK-GLUT4糖代谢通路的影响

目的　研究不同频率和时间的振动运动对大鼠骨骼肌糖代谢的影响,并探讨适宜的振动频率和振动时间。 方法　42只SD雄性大鼠,根据对其施加的不同振动频率（15、25、35 Hz）和持续时间（5 　min和15 min）随机分成7组：安静对照组(CC) 、低频率短时间振动训练组(LS) 、低频率长时间振动训练组（LL）、中频率短时间振动训练组(MS) 、中频率长时间振动训练组（ML）、高频率短时间振动训练组(HS)和高频率长时间振动训练组( HL) 。每组进行相应频率和时间的振动运动,每周训练6 d,持续8周。训练结束后取材,检测空腹血糖、肌糖元、肌酸激酶和肌纤维横截面积;免疫组化、Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）和葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）的表达。 结果　（1）与CC组相比,ML组血糖显著降低（P<0.05）,肌纤维横截面积显著减小（P<0.05）,腓肠肌糖元、肌酸激酶增加幅度最大（P<0.05）。（2）与CC组相比,各实验组AMPK-GLUT4通路蛋白的表达显著高于CC组（P<0.05）,其中ML组变化最明显,显著高于其它实验组（P<0.05）。 结论　（1）振动运动能够促进骨骼肌对葡萄糖的摄取利用,改善糖代谢。（2）中频率长时间的振动运动（25 Hz,15 min）最有利于促进大鼠骨骼肌细胞的糖代谢。     

与肌源性干细胞共培养改善大鼠胰岛活性

目的研究体外共培养模型中肌源性干细胞(MDSCs)改善大鼠胰岛活性的作用。方法提取新生大鼠MDSCs原代细胞,差速贴壁培养后行结蛋白免疫细胞化学鉴定,取第4代MDSCs接种在transwell底板。提取大鼠胰岛后,双硫腙染色鉴定,胰岛在高糖环境中处理24 h后放入tran-swell板上层与MDSCs共培养。在培养的第1、3、6天分别用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色胰岛,RT-PCR检测胰岛的Bcl-2/Bax基因表达来评价胰岛凋亡,其结果与单独胰岛培养组比较。结果与单独胰岛培养相比,共培养组第3、6天AO/EB染色见胰岛细胞明显增多,Bcl-2明显升高,而Bax明显降低(P<0.05、P<0.01)。结论大鼠胰岛与MDSCs共培养延长大鼠胰岛存活时间,改善胰岛活性。     

基于"金课"背景的内分泌混合式教学的探讨

内分泌系统是为配合"以人体器官系统为基础"的医学教育模式而开设的一门课程,为响应教育部提出的教育信息化的要求,基于"金课"的建设标准的背景下,内分泌系统实现了基础医学与临床医学的有机结合.借助雨课堂和腾讯会议,开展了混合式教学,通过课前预习、课堂授课、线上自学等多种形式的课堂教学和课后复习等教学活动,提高了学生的学习兴...     

P53在高糖诱导心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨P53在高糖诱导心肌细胞凋亡中的作用.方法 将培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机分为4组:对照组、P53抑制剂组(葡萄糖浓度为5.5mmol/L,P53抑制剂浓度为50μmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度为25mmol/L)和高糖+P53抑制剂组(P53抑制剂浓度为50μmol/L).噻唑盐比色法(MTT法)检测心肌细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot对各组细胞P53、BAX和Caspase-3进行半定量分析.结果 与对照组相比,高糖组心肌细胞活力明显降低,凋亡率明显升高,Caspase-3、BAX和线粒体蛋白P53表达增多.与P53抑制剂组相比,高糖组心肌细胞活力明显降低,凋亡率明显升高,Caspase-3、BAX和线粒体蛋白P53表达增多;高糖+P53抑制剂组心肌细胞活力也有所降低,凋亡率升高,Caspase-3、BAX和线粒体蛋白P53表达增多.与高糖组相比,高糖+P53抑制剂组的心肌细胞活力增高,凋亡率明显降低,Caspase-3、BAX和线粒体蛋白P53表达减少.结论 高糖可能通过介导P53转位到线粒体激活凋亡通路,引起心肌细胞凋亡.     

内质网应激在高糖诱导心肌细胞凋亡中的作用

目的探讨内质网应激在高糖诱导大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法采用混合酶一步消化法分离SD大鼠乳鼠心肌细胞,以高糖诱导的心肌细胞为模型,将培养的心肌细胞分为3组,甘露醇对照组(对照组)、高糖(25 mmol/L)组和高糖加抗氧化剂组(NAC组),分别检测各组心肌细胞中活性氧(ROS)的含量,利用RT-PCR法检测心肌细胞中内质网应激标志分子GRP78、CHOP和Caspase-12的表达情况。结果与对照组比较,高糖组心肌细胞中ROS含量明显增多,细胞凋亡率升高(P<0.01),与高糖组比较,NAC组ROS含量减少(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01);与NAC组比较,高糖组内质网应激标志分子的mRNA表达显著上调(P<0.01),抗氧化剂能阻断高糖心肌细胞中内质网应激标志分子mRNA的表达,使其表达明显下调(P<0.01)。结论内质网应激凋亡通路可能参与高糖诱导的心肌细胞凋亡。