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目的研究半夏曲中4种优势微生物的生理生化特性,测定炮制过程中不同时间点各样本的黄色素含量,为揭示半夏曲炮制机制奠定基础。方法以半夏曲中筛选出的4株优势菌枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis、宛氏拟青霉Paecilomyces variotii、丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis、黑曲霉Aspergillus niger为研究对象,分别测定它们的最适宜生长温度、pH值,利用糖类的产酸能力以及产淀粉酶、蛋白酶、黄色素的能力,同时测定半夏曲炮制过程中5个不同时间点样本的黄色素含量。结果枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉生长的最适温度分别为35℃、29℃、29~31℃、39℃,最适pH值分别为7.0、7.0、7.5、7.0。4种菌均具有产淀粉酶和蛋白酶的能力,宛氏拟青霉、丝衣霉菌具有产黄色素能力。5个不同时间点样品的黄色素质量分数分别为69.875、69.875、71.750、119.500、137.875μg/g。结论 4种优势微生物在半夏曲炮制中可能起重要作用。 相似文献
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目的 初步研究纯种发酵淡豆豉的抗抑郁作用及其活性成分。方法 制备自然发酵淡豆豉和枯草芽孢杆菌纯种发酵淡豆豉,采用显色鉴别、薄层鉴别、异黄酮和 γ-氨基丁酸(GABA)的含量测定对纯种发酵淡豆豉进行质量评价;昆明小鼠按体质量随机分为 8 组,每组 10 只,雌雄各半,分别为对照组、模型组、盐酸氟西汀(阳性对照,0.01 g·kg-1)组、γ-氨基丁酸(GABA,0.014 45 g·kg-1)组、异黄酮(0.003 05 g·kg-1)组、自然发酵淡豆豉 醇 提 水 洗 脱 物(水 洗 脱 物 ,1.82 g·kg-1)组 、自 然 发 酵 淡 豆豉 总 提 物(自 然 发 酵 ,1.82 g·kg-1)组、纯种发酵淡豆豉总提物(纯种发酵,1.82 g·kg-1)组,除对照组外,建立慢性温和不可预知应激(CUMS)小鼠抑郁模型,边造模边给药,每日应激前 1 h ig 给药,连续给药 28 d。实验第 0、7、14、21、28 天分别测定各组小鼠体质量,第 28 天给药 1 h 后,进行悬尾、强迫游泳、糖水偏好、敞箱实验各行为学指标检测;HE 染色后观察海马 CA1 区病理学变化;超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)鉴定水洗脱物组、纯种发酵组的主要化学成分。结果 纯种发酵淡豆豉与自然发酵淡豆豉有相同的显色反应、显色斑点和 GABA 含量。与模型组相比,各给药组在应激第 14、21、28 天时体质量增加明显(P<0.01),悬尾及强迫游泳不动时间显著降低(P<0.01);GABA 组、异黄酮组、纯种发酵组、自然发酵水洗脱物组小鼠糖水偏好指数均显著增加(P<0.05、0.01);盐酸氟西汀组、水洗脱物组、GABA 组、纯种发酵组小鼠敞箱实验跨格数和直立数均显著增加(P<0.05、0.01);各给药组海马 CA1 区细胞排列紧密有序,边缘圆润,细胞间隙正常。纯种发酵组与自然发酵总提物组、水洗脱物组小鼠的各项行为学指标均无显著差异。自然发酵醇提水洗脱物组、纯种发酵总提物组都含有大豆苷元、染料木素、GABA 和各种氨基酸。结论 纯种发酵淡豆豉具有与自然发酵淡豆豉相似的抗抑郁作用,抗抑郁作用的主要成分可能是 GABA 和异黄酮。 相似文献
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目的探讨羟苯磺酸钙对早期糖尿病肾病患者尿微量白蛋白(UAER)排泄率的影响。方法选择60例早期糖尿病肾病患者的资料,按照患者治疗方式分为观察组及对照组,各30例,两组患者均给予糖尿病饮食、胰岛素控制血糖、安慰剂口服,观察组患者在此基础上加用羟苯磺酸钙治疗,连续治疗12w,比较两组患者尿微量白蛋白排泄率变化。结果观察组尿微量白蛋白排泄率明显降低,与对照组比较,差异明显,有统计学意义(P<0.05)。结论羟苯磺酸钙治疗早期糖尿病肾病,能有效降低尿微量白蛋白排泄率,未见明显不良反应,值得在临床推广。 相似文献
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目的 观察慢性肾脏病(CKD)3、4期患者脂质代谢紊乱情况,并分析其相关因素.方法 选择CKD 3、4期患者126例作为CKD组,同期健康体检者100例作为对照组.记录2组的性别比(F:M)、年龄(Age)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、BMI.采用日立7170A自动分析仪测定血脂(TC、TG、HDL、LDL)、肾功能(Scr、BUN、UA)、空腹血糖(FPG)、血清白蛋白(A)、血清白蛋白与球蛋白比值(A/G)、C反应蛋白(CRP);采用免疫比浊法检测D-二聚体(DD),放射免疫法检测内皮素(ET);采用免疫比浊法检测尿白蛋白,碱性苦味酸法检测尿肌酐,并计算肾小球率过滤(eGFR)、尿白蛋白/肌酐比值(ACR).采用多因素Logistic回归分析与脂代谢有关的独立危险因素.结果 CKD组TC、TG、HDL、LDL分别为(5.49±1.68)、(2.63±0.89)、(0.99 ±0.36)、(2.98±0.61) mmoL/L,对照组分别为(4.26±0.84)、(1.86±0.54)、(1.13 ±0.42)、(2.40±0.48) mmoL/L,P均<0.05.CKD组3期TG、HDL分别为(2.15±1.08)、(1.08 ±0.42) mmoL/L,4期分别为(2.77 ±1.10)、(0.81 ±0.38) mmoL/L,P均<0.05.Logistic回归分析显示,eGFR、CRP为TC升高的独立危险因素,ACR、A、eGFR、DD、CRP为TG升高的独立危险因素,Age、eGFR为HDL降低的独立危险因素,ACR、CRP为LDL升高的独立危险因素,P均<0.05.结论 CKD患者多有脂代谢紊乱,4期脂代谢紊乱比3期更严重;ACR、A、Age、eGFR、DD、CRP是CKD患者脂代谢紊乱的独立危险因素. 相似文献
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TLR4基因沉默下调TLR2信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时,TLR2和TLR4信号通路发挥的作用,以及沉默TLR4基因后,对TLR2信号通路的影响.方法 利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染RAW264.7细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,将细胞随即分为正常组(N组)、正常+烟曲霉孢子刺激组(N+Af组)、正常+TLR4-siRNA组[TLR4(RNAi)组]、正常+TLR4-siRNA+烟曲霉孢子刺激组[ TLR4(RNAi) +Af组],RT-PCR和Western blot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后TLR2、TLR4、MyD88 mRNA及TNF-α蛋白的表达变化.结果 (1)TLR4基因沉默前:与N组比较,N+Af组TLR2、TLR4、MyD88 mRNA及TNF-α蛋白表达量均显著升高(P<0.05).(2)TLR4-siRNA( 100nmoL/L)转染RAW264.7细胞,沉默效率达83%.(3)TLR4基因沉默后:与N组比较,TLR4( RNAi)组TLR2、MyD88 mRNA的表达量均显著降低(P<0.05);与N+Af组比较,TLR4( RNAi)+Af组的TLR2、MyD88 mRNA和TNF-α蛋白的表达量均显著降低(P<0.05);与TLR4( RNAi)组比较,TLR4(RNAi)+ Af组MyD88 mRNA表达量显著升高(P<0.05),而TLR2 mRNA及TNF-α蛋白表达量却无显著变化(P>0.05).结论 RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,TLR2和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用;当沉默TLR4基因后,TLR2信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,沉默TLR4基因下调了TLR2信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用,可能TLR4较TLR2在抵抗烟曲霉孢子刺激时发挥更重要的作用. 相似文献
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目的:检测半夏曲炮制过程中细菌、酵母菌、霉菌的菌落数量并定量分析其中4种优势微生物数量的动态变化,为研究半夏曲炮制机制提供实验依据。方法:参照《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》(第十册)制备半夏曲,取半夏曲炮制过程中0,30,60,90,120 h共5个不同时间点样品,分别用选择性培养基进行细菌、霉菌、酵母菌的培养和分离纯化,并进行菌落计数;应用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,宛氏拟青霉Paecilomyces variotii,丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis,黑曲霉Aspergillus niger进行绝对定量,分别以枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉重组质粒为对照品,经倍比稀释后制作标准曲线,对半夏曲炮制至5个不同时间点(0,30,60,90,120 h)样品中的4种微生物进行定量分析。结果:半夏曲炮制过程中细菌数量少且变化平缓,而酵母菌和霉菌数量至发酵后期时迅速增加,至发酵结束时均 1×106CFU·m L~(-1)。枯草芽孢杆菌5个不同时间点样品中的拷贝数分别为3. 53×10~5,7. 56×10~4,1. 58×10~5,1. 90×10~6,1. 85×10~6copies·g~(-1);宛氏拟青霉的拷贝数为0,0,0,3. 45×10~7,4. 15×10~8copies·g~(-1);丝衣霉菌的拷贝数为0,0,0,1. 04×10~8,2. 28×10~8copies·g~(-1);黑曲霉的拷贝数为0,0,9. 48×10~5,1. 47×10~6,7. 56×10~6copies·g~(-1)。结论:半夏曲炮制过程中微生物菌群变化趋势可以用4种优势微生物的动态变化来反映,霉菌在半夏曲炮制中可能起重要作用。荧光定量PCR技术具有快速灵敏、重复性好和特异性高的优点,适用于半夏曲的炮制机制研究。 相似文献