乳酸杆菌属细菌对白色念珠菌生长抑制作用的实验探讨

目的 研究乳酸杆菌属细菌对白色念珠菌的生长、菌落形成的影响。方法 使用多菌种混合培养技术,菌落形成单位培养技术。结果 在MRS培养基上混合培养显示:乳酸杆菌属中的嗜酸乳杆菌对白色念珠菌的生长抑制作用最强,从形态观察,被抑制生长后的白色念珠菌单细胞孢子的细胞壁和细胞质都有较大的改变,加入嗜酸乳杆菌后可将白色念珠菌的菌数由原来的(11.62±2.68)×10~3CFU/ml(每毫升菌落数)降低到(4.23±0.62)×10~3CFU/ml。两组比较有极显著性差异(P<0.01)。结论 嗜酸乳杆菌能抑制白色念珠菌的生长,破坏白色念珠菌细胞内正常结构。     

HCMV基因及其产物在感染中的作用

人类巨细胞病毒（HCMV）是人群中普遍存在的病原体，感染率很高。HCMV的毒力较弱，侵入机体后一般不会使器官和组织受到严重损伤，但病毒基因易整合到宿主细胞的相关基因，则可阻止或影响后者的复制和表达，最后导致不可逆的形态和结构的异常，同时HCMV是目前发现的基因组成最复杂的人类病毒，其多种基因产物在感染过程中发挥作用。本文就HCMV基因及其产物对宿主细胞代谢的影响作一综述。     

潜、慢型克山病患者柯萨奇B组病毒特异性IgM、 IgG的检测

目的　了解柯萨奇B组病毒(CoxB)感染与克山病的相关关系。方法　采用间接酶联免疫吸附法对四川省克山病病区30例潜、慢型克山病患者血清中CoxB     

重组汉坦病毒核壳蛋白的制备及其单克隆抗体的研制

将ＰＣＲ扩增的ＨＴＶ７６－１１８ＲＮＡ小片段的ｃＤＮＡ克隆插入到载体ｐＤＳ５６／ＲＢＳⅡ－（Ｏ）－６Ｈｉｓ中,通过ＩＰＴＧ诱导表达以及镍螯合层析纯化重组ＮＰ,经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、免疫转印和ＥＬＩＳＡ方法分析其蛋白特性,证实该重组ＮＰ与毒粒ＮＰ相同,均为４９．６ｋｕ,能与肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）患者血清产生特异性反应。以此重组ＮＰ作为抗原制备抗ＮＰ单克隆抗体,获得两株持续稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用抗ＮＰＭｃＡｂ建立检测ＩｇＭ抗体的ＥＬＩＳＡ捕获法。证实纯化重组ＮＰ作为抗原,避免了组织培养病毒的感染性和非特异性以及难以标准化的缺点。所建立的ＥＬＩＳＡ捕获法检测ＨＦＲＳ患者血清中ＩｇＭ抗体的方法特异性强、敏感性高,可作为ＨＦＲＳ的早期诊断试剂     

结核分枝杆菌热休克蛋白65与汉坦病毒G2糖蛋白融合基因真核表达载体的构建与表达

目的 构建以结核分枝杆菌热休克蛋白65（HSP65）和汉坦病毒G2糖蛋白重组融合基因为基础的真核表达载体。为进一步研究其在结核病和出血热防治中的作用奠定基础。方法 采用聚合酶链反应从结核分枝杆菌H37Rv株基因中．扩增出HSP65的编码基因，从T-H8205G2质粒扩增出G2糖蛋白的编码基因．经相应限制性核酸内切酶消化后．插入真核表达载体pcDNA3．1／His，并将此重组质粒通过脂质体介导转染NIH3T3细胞．用SDS-PAGE、免疫组织化学及免疫荧光方法分别测定表达产物的相对分子量及特异性。结果 获得正向插入的pcDNA3.1/ His-HSP65-G2重组表达质粒，表达产物的相对分子量为105kD．与理论预期大小一致．并且可与汉坦病毒H8205株的腹水抗体和HSP65单抗起特异反应。表明构建的pcDNA3．1／His-HSP65-G2能在哺乳动物细胞中表达并具有抗原性。结论 编码HSP65和G2抗原基因的重组基因的真核表达载体构建成功。     

静脉药瘾者T细胞亚群与丙型肝炎病毒感染的关系

为探讨静脉药瘾者 (IVDUs)T辅助细胞与丙型肝炎病毒 (HCV)感染的相互关系 ,以利于阐明Th1/Th2在HCV感染中的作用 ,我们采用放射免疫测定法 (RIA)、荧光定量聚合酶链反应 (F PCR)和荧光免疫法对收集的 381例静脉药瘾者进行了检测 ,现将结果报道如下。对象和方法一、研究对象为云南省戒毒所强制戒毒的静脉吸毒人员 ,共 381例 ,其中男 36 0例 ,女 2 1例 ,吸毒史 1～ 18年 ,吸毒量 0 .1～ 0 .5g/d ,年龄 17～ 6 1岁 ,平均年龄 31.9岁 ,4 9.0 8% (187/381)有共用注射器史 ,93.2 %为务农和待业者 ,其余为工人、商人和个体户。对照组 10 2…     

卡介苗热休克蛋白16.3基因的克隆与原核表达

目的 克隆卡介苗(BCG)的热休克蛋白16.3基因(hsp16.3),并在大肠杆菌中表达.方法 利用PCR技术从BCG中扩增hsp16.3基因,并将其克隆到质粒pProEX HTb中,进行测序.将得到的重组表达质粒pProEX HTb-hsp16.3在大肠杆菌BL21中进行表达.结果 成功地克隆了BCG hsp16.3基因.经DNA测序证实,与Gen Bank公布的序列一致.含pProEX HTb- hsp16.3重组质粒的大肠杆菌BL21经诱导后,能够表达相对分子质量约为16KDa的融合蛋白.结论 获得了BCG hsp16.3基因,成功构建原核表达质粒pProEX HTb- hsp16.3,并在大肠杆菌得到高效表达.     

靶向DF3的白喉毒素A链基因对乳腺癌细胞的杀伤作用

目的探讨白喉毒素A链(DTA)基因在DF3/MUC1启动子调控下的杀伤作用。方法构建含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A链基因的表达载体pGL3-DF3-DTA,转染DF3阳性的乳癌细胞MCF-7,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DTA基因的表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长活性;免疫组织化学法和流式细胞术检测细胞凋亡。结果酶切和测序表明获得了与预期结果相一致的pGL3-DF3-DTA真核表达载体。转染MCF-7细胞后,RT-PCR检测到了249 bp的DTA mRNA片段。与对照组比较,转染pGL3-DF3-DTA的MCF-7细胞生长受到了抑制,流式细胞术检测到的凋亡率达39.43%,而对照组仅有0.28%。结论pGL3-DF3-DTA可对DF3阳性的乳癌细胞产生特异性的杀伤,对乳腺癌的基因治疗有潜在的应用价值。