HPLC法测定福尔可定原料中的吗啡及可待因杂质

摘 要 目的：建立HPLC法测定福尔可定原料中的吗啡、可待因及相关未知杂质。 方法: 采用Waters XSelect CSH Phenyl Hexyl色谱柱（75 mm×4.6 mm,3.5 μm）,流动相为50 ml四氢呋喃与75 ml乙腈加入1 000 ml的0.02 mol·L-1磷酸缓冲液（0.2 mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH7.9）,柱温:40℃,流速：1.0 ml·min-1,检测波长：238 nm,进样量:20 μl。 结果: 该方法能较好的分离福尔可定及吗啡与可待因两个已知杂质,与其他未知杂质也能达到较好的分离;福尔可定在0.534 5～5.345 μg·ml-1的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 5）;吗啡在0.29~5.85μg·ml-1的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=1.000 0）,方法的回收率为99.7%,RSD=0.45%（n=9）;可待因在0.50～5.05 μg·ml-1的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 8）,方法的回收率为100.1%,RSD=0.45%（n=9）;可待因的校正因子为0.97,吗啡的校正因子为0.62;可待因的检出限和定量限分别为0.378 7 ng和1.262 5 ng,吗啡的检出限和定量限分别为0.234 ng与1.170 ng。 结论: 该方法专属性强、结果准确度高,可用于福尔可定杂质的控制研究以及质量标准的提高。     

采用计算机模拟技术结合Caco-2细胞模型与溶出度试验考察国产盐酸曲美他嗪片的生物等效性

目的：采用计算机模拟技术结合Caco-2细胞模型和溶出度试验，对国产盐酸曲美他嗪生物等效性进行研究。方法：首先基于Caco-2单层细胞膜模型考察盐酸曲美他嗪的渗透性，获得其表观渗透系数P_app；第二步采用HPLC法测定溶出曲线来比较10家国产企业与原研生产的盐酸曲美他嗪片在5种不同pH条件下体外溶出行为的差异；最后采用Gastrol Plus^TM软件，导入本试验实测P_app，通过该软件转化为P_eff值，建立准确的体外溶出曲线与体内药动学曲线之间的相关性模型，基于该模型预测国产盐酸曲美他嗪片的药动学曲线，对其生物等效性进行体内外相关的研究。HPLC测定法：C₁₈柱，以0.287%无水庚烷磺酸钠-甲醇（55：45）为流动相，检测波长为231 nm，流速1.0 mL·min^-1；溶出度方法：分别以0.05 mol·L^-1盐酸溶液，pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8缓冲盐溶液和水为溶出介质，桨法50 r·min^-1，溶出体积900 mL，分别考察片剂在上述5种溶出介质中5，10，5，20，30，45，60，90 min取样的溶出曲线。结果：盐酸曲美他嗪的表观渗透系数P_app值随着药物浓度的增加反而下降，属于中等渗透的药物；不同pH的溶出介质对盐酸曲美他嗪片的溶出行为无区分性；但在每种溶出介质中，国外原研片剂溶出较慢，与国产片剂的溶出行为存在明显差异，多数国产片剂快速溶出；采用Gastrol Plus^TM软件从药物在体内具有不同释放速率时的体内吸收情况与通过体外溶出曲线模拟体内吸收情况两个方面进行模拟研究，结果显示现有的国产盐酸曲美他嗪片与原研片剂在体内能够生物等效。结论：尽管国产盐酸曲美他嗪片的体外溶出曲线与原研片剂存在差别，但体内生物等效的可能性极大。Gastrol Plus^TM软件能够预测口服固体制剂与原研制剂的生物等效性，可在一致性评价工作中推广应用。     

HPLC法测定琥珀酸舒马普坦原料有关物质及含量

目的:建立琥珀酸舒马普坦原料的有关物质检查和含量测定的HPLC法.方法:色谱柱:资生堂CAPCELL PAK MGⅡC18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-缓冲液(1.7 ml二丁胺,0.6 ml磷酸,3.9 g二水合磷酸二氢钠溶解在750 ml水中,调pH至6.5后,加水至1000 ml)(8:9...     

高效液相色谱法测定比格犬血浆中伏立康唑及其药物动力学研究

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定Beagle犬血浆中伏立康唑(咪唑类抗真菌药)的方法 ,并比较伏立康唑冻干粉针(参比制剂)和伏立康唑亚微乳(受试制剂)的药动学特点.方法 采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水-乙酸 (55∶45∶0.25,v/v/v),流速为1.0 mL·min-1,外标法测定.结果 在选定的HPLC条件下伏立康唑与血浆杂质分离良好,伏立康唑的线性范围为0.2~50.0 mg·L-1,定量下限为0.2 mg·L-1.提取回收率为97.37%~110.00%,日内和日间RSD均小于10%,Beagle犬静脉滴注伏立康唑亚微乳及冻干粉针后的平均血药浓度-时间曲线符合二室模型,主要药动学参数:t1/2分别为(6.88±1.16) h和(6.82±1.73) h,Ke分别为(0.107±0.025) h-1和(0.109±0.031) h-1,AUC(0~∞)为(136±47.5) mg·h-1·L-1和(179±48.3) mg·h-1·L-1,MRT0~∞为(9.51±1.83) h和(9.35±2.75) h,消除率为(1.01±0.45) mL·min-1·kg-1和(0.68±0.21) mL·min-1·kg-1.结论 该方法 灵敏度高,无杂质干扰,结果 准确.两种制剂具有类似的药动学行为,可为伏立康唑亚微乳临床研究提供科学依据.     

HPLC法测定复方水杨酸苯甲酸搽剂有关物质和含量

摘要：目的:建立HPLC法测定复方水杨酸苯甲酸搽剂中的有关物质及水杨酸、苯甲酸的含量。方法:采用Agilent Zorbax C18（250 mm×4.6 mm, 5μm）色谱柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸（40∶60∶1.5）,流速为1.0 ml·ml-1,检测波长为270 nm,柱温为35℃,进样体积20μl。结果:有关物质方法建立时,水杨酸的3个已知杂质4-羟基苯甲酸、4-羟基间苯二甲酸、苯酚之间的分离度良好,上述3个杂质的质量浓度分别在3.06～7.14、1.51～3.78、1.63～4.07μg·ml-1范围内线性关系良好,相关系数r均超过0.999 5,校正因子分别为0.066,0.11,0.25;平均回收率分别为100.2%,100.4%,100.6%,RSD分别为0.52%,0.61%和1.03%（n=9）。在含量测定方法建立时,水杨酸和苯甲酸的分离良好,2个成分的质量浓度分别在0.305 1～0.711 9,0.635 7～1.483 3 mg·ml-1范围内线性关系良好,r均为0.999 9,水杨酸和苯甲酸的平均回收率分别为101.5%和101.3%（RSD=0.40%和0.33%,n=9）。4批复方水杨酸苯甲酸搽剂中检出的4-羟基苯甲酸、4-羟基间苯二甲酸、苯酚杂质量分别为0.010%～0.018%,0.012%～0.014%,0.016%～0.028%;水杨酸和苯甲酸的含量分别为87.0%～90.1%,90.7%～95.2%。结论:本文建立的HPLC法操作简便,灵敏度、稳定性和重复性良好,可用于复方水杨酸苯甲酸搽剂中4-羟基苯甲酸、4-羟基间苯二甲酸和苯酚等已知杂质的检查,并能同时对水杨酸和苯甲酸两种主成分的含量进行测定。     

非水滴定与电位滴定法测定福尔可定含量的比较

目的对非水滴定和非水电位滴定法测定福尔可定的含量进行比较。方法均以冰醋酸为溶剂,非水滴定法采用结晶紫作为指示剂指示滴定终点,电位滴定法测定以第二个滴定突跃为滴定终点,两法均对滴定结果进行空白校正。结果电位滴定法滴定突跃明显,测定出的3批实际样品含量高于非水滴定的结果。结论因非水电位滴定法操作简单、滴定突跃明显,相较于非水滴定法能更好地控制福尔可定的质量。     

布洛芬软胶囊的有关物质研究

目的:对布洛芬软胶囊中的杂质情况进行分析,考察了最大未知杂质的结构和来源。方法:采用高效液相色谱法测定布洛芬软胶囊中的已知和未知杂质;通过原料和制剂强制降解试验考察了样品中已知杂质和最大未知杂质的来源;采用LCMS联用鉴定最大的未知杂质的结构,并合成该未知杂质;MS和NMR确证了未知杂质的结构,推测其主要的裂解途径;模拟体内胃、肠的酸碱环境,考察未知杂质在体内的水解情况。结果:对比已知混合杂质对照品色谱图的保留时间,实际样品中存在已知杂质D、J、N和E;原料强制降解后可产生已知杂质D、J、N和E,最大的未知杂质仅由制剂强制降解后产生;通过结构的确证表明,未知杂质为布洛芬与辅料甘油发生反应脱一分子水缩合产生的布洛芬甘油酯,结构为2-(4-异丁基)苯基-6,7-二羟基-丙酸丙酯,在体内环境中不能水解形成布洛芬。结论:生产布洛芬软胶囊时应避免采用甘油作为辅料,布洛芬软胶囊有关物质检查法中应明确对布洛芬甘油酯杂质的限度控制。     

枸橼酸舒芬太尼有关物质HPLC分析方法的优化

目的:优化枸橼酸舒芬太尼有关物质的HPLC分析方法。方法:以Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱为固定相,0.13mol.L-1醋酸铵溶液–甲醇–乙腈(31∶45∶24)(用冰醋酸或氨水调节pH值至7.2)为流动相;检测波长为228 nm;流量1.5 mL.min-1。结果:枸橼酸舒芬太尼峰与各杂质峰能得到较好分离,舒芬太尼及其中间体脱苄物、醚化物、丙酰化物的检测限分别为0.36,0.32,0.64,2.80 ng。结论:该方法灵敏度高,专属性强,可用于枸橼酸舒芬太尼的有关物质的检测。