钙蛋白酶10基因多态性与贵阳地区人群2型糖尿病的相关性研究

目的探讨钙蛋白酶10(Calpain10)基因第3内含子SNP19多态性与贵阳地区人群2型糖尿病(T2DM)遗传易感性的关系。方法采用病例-对照研究设计,对74例T2DM患者和72例健康对照应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测Calpain10基因SNP19位点多态性,并与不同人群进行比较分析。结果与对照组相比病例组SNP19基因型频率、等位基因频率均无显著差异,与其他研究人群的结果相近。结论 Calpain10基因SNP19位点多态性可能与贵阳地区人群T2DM的发生无关。     

幽门螺杆菌毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白par-kin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株(1004HpAcagA)和野生型Hp/cagA+菌株(1004Hp)感染原代胃癌细胞,感染6 h收集细胞蛋白,用高表达cagA的真核表达载体pcDNA3.1/cagA脂质体转染胃癌细胞AGS,24 h收集细胞蛋白,用Western blot检测各组细胞线粒体自噬相关蛋白parkin.p62.LC3表达变化。结果parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在1004 HpAcagA感染组分别为0.97±0.23 J.71±0.23,1.03+0.14,1004 Hp感染组分别为1.61±0,32,2.26±0,08,1.32±0,04,1004 Hp感染组较1004 HpAcagA感染组升高了1.66倍、1.32倍、1.27倍,差异有统计学意义(F值分别为7.96,15.35,11.09,P<0.05);par-kin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在pcDNA3.1空载体转染组分别为1.15+0.14,0.75+0.23,0.74±0,19,pcDNA 3.1/cagA转染组分别为1.49±0,02,1.01+0.02、l.29±0.07,pcDNA3.1/cagA转染组较pcDNA3.1空载体转染组升高1.29倍、1.35倍、1.74倍,差异有统计学意义(F值分别为17.48,14.02,21.06,P<0.05)。Hp/cagA+感染和pcDNA 3.1/cagA转染取得一致结果,提示Hp cagA注入胃上皮细胞后影响细胞线粒体自噬相关蛋白的表达。结论HpCagA对线粒体自噬有一定的调控作用,其可能是Hp诱导胃癌发生发展的分子机制。     

贵阳地区1 891例儿童乙型肝炎病毒感染调查分析

乙型肝炎(乙肝)是我国高发传染病之一,治疗乙肝主要集中于减轻临床症状,而预防是控制乙肝病毒(HBV)感染最有效的方法.自1992年将乙肝疫苗预防接种纳入免疫规划管理以来,HBV感染率虽有不同程度的下降,但感染率仍然相当高.为了解我市儿童HBV感染及免疫情况,以采取有效干预措施降低其发病率,为进一步控制乙肝流行提供依据,本研究对本市1891例儿童进行了乙肝血清标志物检测,并对结果进行分析,现报告如下.     

促肝细胞生长素治疗肝硬化对hpcⅢ、HA水平的影响

为了探讨促肝细胞生长素（PHGF）对人肝纤维化的影响．我们采用放射免疫法对21例用PHGF治疗及15例不用PHGF治疗的肝炎后肝硬化患者治疗前、后血清人Ⅲ型前胶原（hpcⅢ）、透明质酸（HA）水平进行检测．结果表明，治疗前、后hpcⅢ分别为328．0±167．0μg／L和236．7±92．5μg／L·HA分别为1455．2±722．8ng／ml和1142．8±556．0ng／ml，均明显降低（P＜0．05）。初步证明PHGF具有抗人肝纤维化作用。     

血清肝纤四项检测在肝硬化诊断中的应用价值

目的探讨血清肝纤四项[透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)和Ⅳ型胶原(CⅣ)]检测在肝硬化诊断中的应用价值。方法选取2017年1-7月经贵州医科大学附属医院确诊为肝硬化的181例患者(肝硬化组)及同期该院的50例体检者(对照组)作为研究对象,应用化学发光法联合检测血清肝纤四项水平并进行统计分析。结果对照组血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ水平均明显低于肝硬化组,差异有统计学意义(P0.05)。血清肝纤四项对肝硬化的诊断价值从高到低依次为HA、PⅢNP、CⅣ、LN。受试者工作特征曲线计算HA、LN、PⅢNP、CⅣ曲线下面积分别为0.923、0.689、0.868、0.752,差异有统计学意义(P0.05)。结论血清肝纤四项具有良好的灵敏度与特异度,其检测水平对肝硬化诊断有一定的价值。     

幽门螺杆菌毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白par-kin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株(1004HpAcagA)和野生型Hp/cagA+菌株(1004Hp)感染原代胃癌细胞,感染6 h收集细胞蛋白,用高表达cagA的真核表达载体pcDNA3.1/cagA脂质体转染胃癌细胞AGS,24 h收集细胞蛋白,用Western blot检测各组细胞线粒体自噬相关蛋白parkin.p62.LC3表达变化。结果parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在1004 HpAcagA感染组分别为0.97±0.23 J.71±0.23,1.03+0.14,1004 Hp感染组分别为1.61±0,32,2.26±0,08,1.32±0,04,1004 Hp感染组较1004 HpAcagA感染组升高了1.66倍、1.32倍、1.27倍,差异有统计学意义(F值分别为7.96,15.35,11.09,P<0.05);par-kin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在pcDNA3.1空载体转染组分别为1.15+0.14,0.75+0.23,0.74±0,19,pcDNA 3.1/cagA转染组分别为1.49±0,02,1.01+0.02、l.29±0.07,pcDNA3.1/cagA转染组较pcDNA3.1空载体转染组升高1.29倍、1.35倍、1.74倍,差异有统计学意义(F值分别为17.48,14.02,21.06,P<0.05)。Hp/cagA+感染和pcDNA 3.1/cagA转染取得一致结果,提示Hp cagA注入胃上皮细胞后影响细胞线粒体自噬相关蛋白的表达。结论HpCagA对线粒体自噬有一定的调控作用,其可能是Hp诱导胃癌发生发展的分子机制。     

贵阳市6032例乙肝患者HIV感染情况调查

目的:了解乙型肝炎病毒(HBV)感染人群人免疫缺陷病毒(HⅣ)感染状况,为预防与控制艾滋病在乙肝感染者中的传播提供科学依据.方法:收集贵阳地区6 032例乙肝感染者的血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行HIV抗体筛查,初筛阳性血清复检仍为阳性后标本送贵州省临床检验中心艾滋病抗体确认实验室用蛋白印迹法(WB)进行确认.结果:6032例HBV感染者中HIV阳性者8例,阳性率为1.3‰,其中乙肝病毒携带者(HBsAg阳性)HIV阳性4人.结论:HBV感染者中的HIV感染率明显高于一般人群感染率0.5‰,应采取有效措施预防并阻断艾滋病在乙肝感染者中的传播.     

幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠胃组织NLRP3炎症小体相关因子和自噬相关蛋白表达分析

目的 探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对蒙古沙鼠胃组织中NLRP3炎症小体相关因子和自噬相关蛋白表达的影响。方法 采用Hp国际标准株11637灌胃处理蒙古沙鼠,隔天一次,共5次,以相同体积无菌脑心浸液肉汤灌胃的沙鼠作为对照组。于感染第3、6、12和24个月后处死沙鼠,取胃黏膜组织并切片,HE染色后作病理学检查;免疫组织化学染色观察Hp定植;试剂盒法检测胃组织NLRP3炎症小体及其相关因子IL-18、IL-β和自噬相关蛋白P62、LC3的表达。结果 Hp感染蒙古沙鼠胃组织检测到Hp的定植,HE染色检查显示不同时间感染组沙鼠胃黏膜均出现糜烂黏膜下层组织水肿、黏膜局部浅表糜烂和淋巴浆细胞浸润等不同程度的慢性胃炎病理改变,感染24月部分区域出现非典型增生甚至癌变。对照组沙鼠均无Hp定植及组织学病变。与未感染对照组比较,Hp感染蒙古沙鼠胃组织中NLRP3、IL-18、IL-1β和LC3、P62的表达水平均显著升高(均P<0.05);其中NLRP3、IL-18、LC3表达3到12个月随着Hp感染时间的延长呈升趋势,12到24个月呈下降趋势。IL-1β表达无显...     

外周血中胰岛素生长因子检测与肝病的相关性研究

目的探讨肝病患者外周血中胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和IGF-Ⅱ水平与肝病的相关性及其检测意义。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定各组肝病患者血清IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的含量;提取外周血白细胞总RNA,以-βactin作为内参,采用实时荧光定量RT-PCR技术测定各组IGF-ⅡmRNA表达;并采用放射免疫法检测各组血清中透明质酸(HA)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的含量。结果 (1)慢性病毒性肝炎轻、中度组血清IGF-Ⅰ水平明显高于对照组(P<0.05);慢性重度肝炎组、静止型肝硬化组、活动型肝硬化组及原发性肝癌组血清IGF-Ⅰ水平均明显低于对照组和慢性轻、中度肝炎组(P<0.05)。活动性肝硬化组血清IGF-Ⅱ水平明显高于对照组、静止性肝硬化组和慢性肝炎组(P<0.05);原发性肝癌组血清IGF-Ⅱ水平明显高于各组(P<0.05)。(2)活动型肝硬化组、原发性肝癌组外周血IGF-ⅡmRNA表达均较对照组明显增高(P<0.05)。(3)慢性重度肝炎组、肝硬化组及原发性肝癌组HA和PCⅢ含量逐渐升高(P<0.05)。结论外周血中细胞因子IGF-Ⅰ水平与肝病患者肝纤维化程度密切相关,可作为反映肝细胞损伤程度的指标,并对肝病病情的估测有一定意义;肝病患者外周血中IGF-Ⅱ可能是导致肝癌的重要原因之一,当肝病患者外周血中IGF-Ⅱ水平异常增高或过量表达时要警惕肝癌的发生。     

乙型肝炎病毒免疫学标志物与HBV-DNA的定量分析

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)二对半抗原抗体系统、前S1蛋白(Pre-S1)和HBV脱氧核糖核酸(HBV-DNA)之间的关系.方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测209份HBV感染者血清的HBV二对半抗原抗体系统,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV DNA.结果:HBV-DNA滴度小于每毫升1×105copies者35份(16.7%),HBV-DNA滴度在1×105～1×107copies者88份(42.1%),HBV DNA滴度大于1×107copies者86份(41.1%).HBV-DNA滴度与HBeAg阳性率、Pre-S1阳性率呈正相关,相关系数分别为0.998(P=0.039)和0.882(P=0.024).结论:HBeAg和Pre-S1也是反应HBV复制的指标.对HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者检测Pre-S1,可帮助判断HBV复制情况.