CIK细胞治疗妇科肿瘤的临床研究

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）体外细胞毒活性,并观察CIK细胞治疗妇科肿瘤的近期临床疗效、免疫学活性及副反应.方法共收录2007年7月至2010年3月22例妇科肿瘤患者进行CIK细胞治疗,其中卵巢癌11例,子宫癌11例.经标准治疗方案治疗的患者,取外周血分离单个核细胞（PBMC）,体外诱导出CIK细胞培养后,观察CIK细胞表型,用MTT法测体外细胞毒活性.所有患者均接受一定剂量的CIK细胞过继免疫治疗,观察其近期临床疗效、免疫反应、不良反应.结果当效靶比为16：1、8：1时,CIK细胞体外细胞毒活性杀伤率分别（82.33±9.35）%和（61.59±13.59）%.卵巢癌11例,近期疗效评价中,部分缓解4例,近期有效率为66.67%,疾病控制率为66.67%.子宫癌11例,近期疗效评价中,部分缓解6例,近期有效率为100%,无肿瘤进展时间为4～26个月,中位无肿瘤进展时间为13个月.与CIK细胞回输前相比,患者CD3＋、CD4＋、CD8＋均有明显的升高（P〈0.05）,这表示可以诱导患者产生特异性的免疫反应.22例患者在输注CIK过程中未出现不良反应.结论 CIK细胞对妇科肿瘤有较好的临床疗效.     

CIK细胞治疗泌尿系统肿瘤的临床疗效分析

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）体外细胞毒活性,并观察CIK细胞治疗泌尿系统肿瘤的近期临床疗效、免疫学活性及副反应.方法 2007年7月至2010年3月共收录10例泌尿系统肿瘤患者进行CIK细胞治疗,经标准治疗方案治疗的患者,取外周血分离单个核细胞（PBMC）,体外诱导出CIK细胞培养后,观察CIK细胞表型,用MTT法测体外细胞毒活性.结果当效靶比为16：1、8：1时,CIK细胞体外细胞毒活性杀伤率分别（93.59±6.69）%和（76.78±14.23）%.前列腺癌2例,病情有较好的缓解,其中1例前列腺特异抗原和游离抗原治疗后均下降;4例肾癌完全缓解,1例SF,AFP和CEA在CIK治疗3个疗程后降至正常值.膀胱癌4例,部分缓解3例;与CIK细胞回输前相比,患者CD3＋、CD4＋、CD8＋均有显著升高（P〈0.05）,这表示可以诱导患者产生特异性的免疫反应.10例患者在输注CIK过程中未出现不良反应.结论 CIK细胞在泌尿系统肿瘤免疫治疗中能诱导机体产生特异性的免疫反应,亦是新的杀伤肿瘤细胞的效应细胞,有较好的临床疗效.     

人脐带间充质干细胞的培养鉴定及其向神经元细胞分化的研究

目的研究脐带间充质干细胞（UC-MSCs）在体外分离、培养、扩增和鉴定以及向神经元分化的方法.方法 30例符合入选标准的脐带采用贴壁法分离得到UC-MSCs,选用20%FBS血清培养液进行原代培养,再选用10%FBS扩增培养液进行一般传代.用神经分化培养基诱导UC-MSCs向神经细胞分化,在荧光显微镜下观察细胞形态,透射电镜观察UC-MSCs超微结构,用流式细胞仪分析其表面特性,采用直接和间接免疫荧光法检测细胞悬浮液的表型特征,用抗人神经纤维M、突触素、微管蛋白、半乳糖神经酰胺的单克隆抗体检测各代之间神经诱导形成率.结果 12 h后细胞开始贴壁生长,超微结构观察表现出未分化细胞的特征,CD123、CD49、CD29、CD73和CD166均为阳性,免疫荧光检测人UC-MSCs分化成神经细胞.结论 UC-MSCs长期传代培养,生物学特性稳定,具有向神经细胞分化的潜能.     

CIK细胞杀瘤实验前后细胞表型与细胞毒性相关性研究

目的为了分析体外细胞因子诱导培养CIK细胞在体外杀瘤实验中的细胞表型变化与其杀瘤活性的相关性及为临床过继免疫治疗提供实验依据。方法采用体外诱导方法扩增培养正常人外周血淋巴细胞及单个核细胞,用CCK-8试剂检测培养14d的CIK细胞对SPC-A-1和BGC-823肿瘤细胞的细胞毒活性,应用流式细胞术测定杀瘤实验前后CD3＋等6种不同表型细胞百分率的变化。结果在与效靶比成正比的条件下,体外实验CIK细胞对两种肿瘤细胞的杀伤率都与CD3＋CD4＋,CD3＋CD4-CD8-细胞比例变化呈正相关（P〈0.05）,都与CD3＋CD25＋,CD3＋CD28＋,CD3＋CD25＋CD28＋细胞比例变化呈负相关（P〈0.05）,对SPC-A-1细胞的杀瘤率与CD3＋CD16＋CD56＋呈正相关（P〈0.05）。结论本研究表明靶细胞抗原在活化细胞中起重要作用,测定培养细胞活化相关表型可以间接监测其杀瘤能力,为临床CIK细胞过继免疫治疗的应用提供实验依据。     

CIK细胞治疗消化系统肿瘤患者的效果观察和护理体会

目的总结CIK细胞免疫治疗消化系统肿瘤临床疗效及心理护理经验。方法 2007年7月至2010年3月昆明医学院附属延安医院收治97例消化系统恶性肿瘤患者进行192次CIK细胞免疫治疗,对CIK细胞免疫治疗前的细胞制备、治疗时、治疗后不良反应观察进行记录,对疗效进行跟踪随访,同时对患者进行心理护理。结果 97例患者中,3例食管癌,治疗后主观症状改善明显。胰腺癌6例,有近期疗效4例。肝癌6例,有近期疗效5例。胆囊癌5例,有近期疗效4例。在CIK细胞免疫治疗的18例胃癌、41例结肠癌、18例直肠癌中,近期有效率分别为77.78%、65.8%和72.22%。患者能积极配合进行CIK细胞免疫治疗,使治疗获得满意的效果。结论 CIK细胞免疫治疗为综合治疗的有效手段之一,对提高疗效、改善生活质量有重要意义。