地塞米松诱导大鼠胰岛素抵抗机制的研究

观察了大鼠肌注地塞米松１周和３周后的空腹血糖、血清胰岛素及血浆胰高血糖素ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ水平。结果是经地主松处理后、１周组和３周组的大鼠血清胰岛素明显高于对照组；１周组血糖浓度无显著变化，３周组血糖浓度明显升高；血浆胰高血糖素水平无明显变化，未被高血糖，高胰岛素所抑制；１周组血浆ｃＧＭＰ明显下降；３组间的ｃＡＭＰ浓度差异无统计学意义。     

气功灌顶对循环功能的作用

本文测试了参加藏密气功普及班学员患有高血压、脑血栓、动脉硬化等病灌顶前后的血压、心率、脑血流图和皮温。结果表明,灌顶确有客观的生物学效应,对循环功能具有良好的调节作用。     

绿多维胶囊对实验性糖尿病大鼠血糖的影响

本文观察了绿多维胶囊对四氧嘧啶性糖尿病大鼠血糖的影响。结果表现,绿多维胶囊能够对抗四氧嘧啶(Alloxan)所致的高血糖,具有降低血糖作用。     

Streptomyces sp.4353中3-氨基-5-羟基-苯甲酸（AHBA）合酶基因的克隆及其在大肠埃希菌中的表达

目的 克隆Streptomyces sp.4353中的3-氨基-5-羟基-苯甲酸(AHBA)合酶基因,并将其在大肠埃希菌中表达.方法参与AHBA生物合成的5个基因,即氨基奎尼酸脱水酶基因、氨基奎尼酸/莽草酸脱氢酶基因、AHBA合酶基因、氧化还原酶基因和磷酸酶基因通常连锁,形成一个AHBA生物合成基因簇.本文通过分析、比较已知AHBA生物合成基因簇的基因组织结构特点和序列保守性,设计引物,以Streptomyces sp.4353的总DNA为模板,在已知737bp AHBA合酶基因部分序列的基础上,通过PCR扩增其上、下游DNA序列,克隆至pMD18-T载体上,测序、拼接并进行生物信息学分析.以pET24a(+)为表达载体,对克隆得到的AHBA合酶基因在大肠埃希菌BL21-Codon Plus(DE3)-RIL中进行表达和SDS-PAGE检测.结果从Streptomyces sp.4353中得到了一段2872bp大小的DNA片段(NCBI GenBank接受号EU734184),其中含有AHBA生物合成基因簇中的AHBA合酶基因、氧化还原酶基因和磷酸酶基因(部分);AHBA合酶基因在大肠埃希菌中得到了成功表达,在SDS-PAGE上可见到清晰的、与预计大小(42.7ku)一致的蛋白表达特异条带.结论 Streptomyces sp.4353中的AHBA合酶基因的克隆以及在大肠埃希菌中的表达为进一步研究该基因的功能奠定了基础.本研究克隆得到的2872bp DNA片段还有可能用于AHBA的杂合/异源生物合成,以及安莎类抗生素的组合生物合成.     

地塞米松诱导大鼠胰岛素抵抗机制的形态学研究

为了探讨胰岛素抵抗的发病机制及胰岛素抵抗与非胰岛素依赖性糖尿病的关系，我们选用了地塞米松处理大鼠1周和3周并设置了对照组，观察了大鼠胰岛B细胞的变化，结果显示：地塞米松处理1周后，大鼠体重下降（P＜0.01），大鼠胰岛素细胞增殖明显。地塞米松处理3周后大鼠体重进一步下降（P＜0.01），胰岛B细胞数目减少，功能下降。     

藏密气功对BMR和T_3、T_4的影响

对52名藏密气功学员练功前后基础代谢率和34例甲状腺轴激素水平测定,结果显示基础代谢率有下降趋势;甲状腺轴激素中水平总 T_3下降且有显著性。     

地塞米松诱导大鼠胰岛素抵抗机制的研究

作者观察大鼠肌注地塞米松1周和3周后空腹血糖、血清胰岛素浓度及血浆胰高血糖素、cAMP、cGMP水平。结果：地塞米松处理1周组、3周组的大鼠血清胰岛素明显高于对照组。1周组血糖浓度无显著变化,3周组血糖浓度明显升高。虽然血浆胰高血糖素水平无明显变化，但未被高血糖、高胰岛素所抑制，血浆cGMP在1周组明显下降，而cAMP浓度三组间差异无统计学意义。     

AHBA合酶基因的筛选与放线菌素D产生菌的发现

根据3,5-AHBA合酶基因序列的保守性所设计的简并引物,通过PCR的方法,从20株未知产物放线菌菌株中,获得两个AHBA合酶基因阳性菌株(S.violaceusniger 4353和Streptomyces rochei 4088).同源性分析显示,克隆到的3,5-AHBA合酶与已知的3,5-AHBA合酶蛋白序列有一定的同源性(86%～87%).对其中一株阳性菌株4353(S. violaceusniger 4353)的发酵活性产物进行了化学分离纯化和TLC、HPLC-UV、MS、1H.NMR和13C-NMR等分析结构鉴定,表明其发酵产生的一个活性成分为放线菌素D.基因单交换阻断实验结果证明,4353菌株所产生的放线菌素D确实与3,5-AHBA合酶基因相关.本文对获得这一结果的可能原因进行了讨论.     

Geldanamycin产生菌生物合成相关基因的克隆与分析

目的：从geldanamycin产生菌吸水链霉菌（S.hygroscopicus)中克隆生物合成基因，为阐明生物合成机制及改造其结构奠定基础。方法：以链霉菌／大肠埃希氏菌穿梭cosmids pKC505为载体构建了插入片段为20－30kb的S.hygroscopicus总DNA文库，以利福霉素中与3－氨基－5－羟基苯甲酸（AHBA）合成相关基因为探针，经菌落杂交，Southern杂交筛选同源基因片段，测序结果与Genbank进行同源性比较分析，并以attp-噬菌体载体KC515利用基因阻断实验对克隆的基因片段进行功能鉴定。结果：构建的基因文库含重组基因比率高，基因组覆盖率高，稳定性好，经同源基因探针杂交，从文库中筛选出9个阳性cosmids克隆pCGB20,pCGB26,pCGB28,pCGB29,pCGB36,pCGB45,pCGB49,pCGB63,pCGB75，测序分析表明，cosmid pCGB20中BamHI-BamHI 8kb片段两端的不完整ORF编码蛋白与竹桃霉素（oleandomycin)PKS Module 5,Module 6(一致性为79％）和红霉内酯合成酶ORF2（一致性为75％），ORF1（一致性为73％），ORF3（一致性为70％），高度同源；BamHI-BamHI 3kb片段一端与编码类结核分枝杆菌的磷酸吡哆醛依赖的氨基转移酶家族中半胱氨酸脱硫酶的DNA有同源性，该家族与AHBA合成酶关系密切，Cosmid pCGB20的BamHIBamHI 8kb及BamHI-BamHI 3kb基因片段已通过基因阻断实验初步鉴定，证明它们参与geldanamycin生物合成，而其他cosmids阳性克隆的序列分析及功能研究尚在进行中。