长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用

选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇(PEG)为修饰剂,以活性酯法制备出PEG- 重组人超氧化物歧化酶(PEG-rh SOD)共价结合物.修饰酶的生物半衰期为15h,比修饰前延长了90倍,对酸、碱、热的耐受力明显高于修饰前.用照射小鼠的活存率评价了PEG-rhSOD的辐射防护作用.小鼠受8.5Gy γ射线照射前1h腹腔注射30万U/kg PEG-rh SOD,可提高活存率42%,与未修饰的rhSOD相比,活存率提高14%.实验仍在进行中.     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对骨髓造血干细胞的辐射防护作用

用照射小鼠的骨髓造血干细胞(CFU-S)外源性脾结节形成法,评价人基因工程重组SOD(rhSOD),聚乙二醇(PEG)修饰的长半衰期重组SOD(PEG-SOD)对CFU-S的辐射防护作用.结果显示:rhSOD和PEG-SOD均能明显提高CFU-S产率,其中rh SOD在照射前1h给药效果好,而PEG-SOD在照射前2～3h给药作用更为明显,化学修饰后SOD血浆半衰期延长,将使给药时机及药物作用持续时间得到改善.     

脂质体包埋超氧化物岐化酶的制备及对创伤性脑水肿保护作用的实验研究

实验选用家猫28只,采用硬膜外打击法制做创伤性脑水肿动物模型,随机分为外伤组、F—SOD治疗组和L—SOD治疗组,分别观察伤后意识活动、脑电生理、BBB通透性、脑含水量、脑组织形态学、血清、脑脊液、脑内OFR和SOD含量变化.结果表明F—SOD和L—SOD均对创伤性脑水肿有保护作用,但后者的作用更明显更持久.本文介绍了L—SOD的制作过程及其特点,并根据实验结果对两种SOD的作用机理进行了探讨.     

氧自由基在猫创伤性脑水肿中的作用和超氧化物歧化酶防治作用的实验研究

目的：进一步证实氧自由基（ＯＦＲ）在创伤性脑水肿发生中的作用和外源性超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的防治作用。方法：用硬膜外自由落体打击致猫重型颅脑损伤，随机分为外伤组、游离ＳＯＤ（Ｆ－ＳＯＤ）治疗组和脂质体包埋ＳＯＤ（Ｌ－ＳＯＤ）治疗组。观察伤后１、３、６、２４小时动物意识及肢体活动、ＥＥＧ、血清和ＣＳＦ中脂质过氧化物（ＬＰＯ）和ＳＯＤ含量、２４小时后脑含水量、血脑屏障通透性、脑组织脂质过氧化物（ＬＰＯ）和ＳＯＤ含量以及组织形态学改变。结果与结论：ＯＦＲ是脑外伤后继发性脑损伤和脑水肿的重要因素之一；外源性Ｆ－ＳＯＤ和Ｌ－ＳＯＤ均对创伤性脑水肿有防治作用，但后者作用更显著。     

RT-PCR法扩增人锰超氧化物歧化酶cDNA的克隆及其核苷酸序列测定

从人肝细胞提取总RNA,以此为模板进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),制备出人锰超氧化物歧化酶(hMnSOD)的cDNA片段.将此cDNA克隆入专为装载PCR产物而构建的质粒载体pGEM-T中.对重组质粒进行限制酶切分析和序列测定.结果表明,该克隆片段与国外报道的hMnSOD cDNA序列一致.表达蛋白的工作正在进行之中.     

金属螯合层析介质的研制及其在纯化重组人铜锌超氧化物歧化酶中的应用

以琼脂糖Sepharose 4B为基质,经氯代环氧丙烷活化,与亚氨基二乙酸通过化学交联再与铜螯合,合成了金属铜螯合层析介质,结果显示此介质不仅具有特异性吸附能力,且有一定的刚性,对强碱和热亦有一定的耐受性.用此介质纯化人超氧化物歧化酶(rhSOD),即可得到高纯度的rhSOD产品,简化了纯化工艺,降低了生产成本.     

重组人铜锌超氧化物歧化酶脂质体的制备

应用反相蒸发法制备出重组人铜锌超氧化物歧化酶(rh Cu/Zn SOD)脂质体,其包封率为49.1%,在大鼠体内半衰期为3.45 h,体外模拟胃酸、胃蛋白酶、胰酶耐受力分别为90.3%、86.2%.79.8%;在小鼠体内脾、肝、肺脏中分布最高.     

长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用研究

选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇（ＰＥＧ）为修饰剂，以活性酯法制备出ＰＥＧ－重组人超氧化物歧化酶（ＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ）共价结合物。修饰酶的生物半衰期为１５ｈ，比修饰前延长了９０倍，对酸、硷、热的耐受力明显高于修饰前。用照射小鼠活存率评价了ＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ的辐射防护作用。小鼠受８．５Ｇｖｒ射线照射前１ｈ腹腔注射３０万Ｕ／ｋｇＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ，可提高活存率４２％，与未修饰的ｒｈＳＯＤ相比，活存率提高１４％。     

恶性疟原虫裂殖子与人血型糖蛋白A之间分子识别的研究

用纯化的人血型糖蛋白A(Glycophorin A,简称GPA)和GPA糖肽分别对恶性疟原虫FCC-1/HN株的裂殖子进行免疫胶体金标记。标记样品按常规电镜要求处理,透射电镜观察。结果显示,胶金颗粒呈弥漫状分布于整个裂殖子虫体表面,获得恶性疟原虫裂殖子与GPA及GPA糖肽特异识别结合的直观实验证据,属国内外首次报道。本结果进一步证实GPA是恶性疟原虫裂殖子的受体,及GPA糖肽区域是膜受体的活性部位。