白血病患者巨细胞病毒抗体检测及其临床意义初探

目的初步探讨白血病患者巨细胞病毒(HCMV)感染状况及HCMV抗体检测的应用价值.方法采用ELISA法对75例白血病患者和28名健康人HCMV抗体进行检测.其中有11例M3患者作化疗前后对比检测.结果白血病组HCMV-IgM抗体阳性率为2.7%,健康对照组为0;白血病组HCMV-IgG抗体水平较健康对照组显著(P＜0.01)或非常显著(P＜0.005)增高;如以HCMV-IgG抗体高于8.4IU/ml(约临界值1.1IU/ml的4倍)考虑为HCMV活动性感染,则白血病组阳性率35.7%,较健康对照组3.6%明显升高(P＜0.005),且M3化疗后阳性率有上升趋势.结论HCMV抗体检测有助于白血病患者HCMV感染的临床诊疗.     

标本流条码化管理检验优质高效

检验标本从医师申请至标本检测和保存有许多环节，涉及到医师、护士、护工和检验技术员等多层次交接，在这些环节和交接中是标本流最易出错、影响检验结果准确性且不易解决的难题。因此如何依托LIS与HIS的无缝联接平台，实行标本流的全程条码化和信息化管理是减少标本流环节差错、提高工作效率和保全标本信息的必由之路。我院建立标本流的全程条码化和信息化管理已运行了3年，大大提高了工作效率和检验质量，提高了标本流管理的水平，创建了标本流在检验方面的证据系统，为防止医疗纠纷提供了有效的保证，现就应用体会介绍如下：     

POCT设备网络化实时在线管理系统的建设及应用

目的基于实验室信息管理系统/医院信息管理系统(LIMS/HIMS)创建智能化POCT设备网络化实时在线管理系统,规范医院POCT设备的应用和管理。方法依据医院POCT设备应用和管理委员会的要求,研发POCT设备网络化实时在线管理系统,以检验科为管理中心,结合POCT管理的质量指标,构建本地化的医院POCT设备网络化实时在线管理系统。结果对医院各临床科室不同类型的POCT设备实现了智能化、标准化和规范化管理,使POCT设备为临床诊疗提供了优质的服务。结论 POCT设备网络化实时在线管理系统是POCT设备在线一体化管理的有效手段,值得推广应用。     

共信号分子CD40/CD40L质粒标准品的构建

背景:目前,对CD40/D40L的研究主要集中在可溶性和蛋白方面,对其在转录水平上的研究文献不多,可能与其无商品化质粒标准品有关.目的:构建检测CD40/CD40L mRNA表达水平差异的标准品.设计、时间及地点:单一样本实验,于2009-04在苏州大学附属第一医院检验科实验室完成.材料:取手术切除的子宫肌瘤组织,经患者知情同意.方法:以手术切除的子宫肌瘤组织细胞的总RNA为模板、Random 6mers为引物反转录合成cDNA,用该cDNA为模板PCR扩增人CD40/CD40L基因相应的cDNA片断,构建PMD-18-CD40/CD40L重组质粒,鉴定测序后,用荧光定量PCR制作标准曲线.主要观察指标:①RNA质量检测结果.②扩增的目的片段电泳结果.③CD40/CD40L基因测序结果.④标准品的扩增情况.结果:组织提取的总RNA完整性良好,构建的CD40/CD40L质粒经PCR扩增后分别得到136 bp,200 bp的清晰条带,测序结果与目的片段完全一致,且质粒的原始浓度为2.66×10~(13)、2.45×10~(13) copies/mL,倍比稀释至2.0×10~6 copies/mL均能得到良好的标准曲线(R~2=1).结论:实验成功构建了CD40/CD40L基因荧光定量PCR标准质粒.     

子宫肌瘤和肌壁组织B7-H3 mRNA表达水平及意义

目的探讨子宫肌瘤患者肌瘤组织和正常子宫肌壁B7-H3 mRNA的表达水平及其在子宫肌瘤患者发病中的作用。方法利用逆转录多聚酶链反应法和实时荧光定量PCR法检测44例子宫肌瘤患者的肌瘤组织和正常子宫肌壁的B7-H3 mRNA表达水平。结果子宫肌瘤的肌瘤组织表达的B7-H3 mRNA高于正常子宫肌壁。结论子宫肌瘤组织高表达B7-H3 mRNA,B7-H3 mRNA高表达可能与子宫肌瘤发生发展有关。     

经皮冠状动脉球囊置入后冠状动脉粥样硬化性心脏病患者缺血修饰白蛋白的检测及意义

背景：最近发现缺血修饰白蛋白诊断心肌缺血的敏感性很高,能在心肌缺血早期可逆阶段被检出,是第一个被FDA批准销售的心肌缺血标志物。目的：探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者经皮冠状动脉球囊置入后冠状动脉粥样硬化性心脏病患者缺血修饰白蛋白的水平变化及其临床意义。设计、时间及地点：病例-对照观察,试验于2007-11/2008-03在苏州大学附属第一医院检验科实验室完成。对象：选择苏州大学附属第一医院心内科住院确诊为冠状动脉粥样硬化性心脏病并行择期经皮冠状动脉球囊置入治疗的患者46例,男35例,女11例,年龄34～81岁;另选苏州大学附属第一医院体检健康人群60名作为对照,男36名,女24名,年龄42～75岁。方法：测定60名体检健康者和46例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者术前与术后5min,术后2,6h血清中缺血修饰白蛋白的水平;46例择期经皮冠状动脉球囊置入治疗的患者,于球囊扩张后5min,2,6h取静脉血2mL进行心肌肌钙蛋白T测定,测定值〉0.16μg/L者判为阳性。主要观察指标：血清中缺血修饰白蛋白及心肌肌钙蛋白T的水平。结果：行经皮冠状动脉球囊置入治疗后5min、术后2h缺血修饰白蛋白水平较术前及对照组升高（P〈0.01）;术前与术后6h相比,差异无显著性意义（P〉0.05）。在行经皮冠状动脉球囊置入治疗后5min、术后2h46例患者心肌肌钙蛋白T均为阴性,术后6h有3例患者心肌肌钙蛋白T阳性。结论：心肌缺血患者血清中缺血修饰白蛋白水平升高较心肌肌钙蛋白T出现早,缺血修饰白蛋白可作为心肌缺血发生后到发生细胞坏死之前的一个早期指标。     

肺癌与癌旁组织中miR-20a的定量检测及其意义

目的：探讨人肺癌与癌旁组织miR-20a定量检测的临床意义。 方法：real-time PCR检测31例肺癌及其对应癌旁组织中miR-20a的表达量, 分析其与肺癌组织学类型、临床分期、分化程度等临床病理特征的关系。 结果：肺癌组织miR-20a表达量(2^{-△△Ct)为3.630（1.042～7.727）,与对应癌旁组织相比,有显著性差异(P<0.05)。miR-20a与肺癌临床分期、分化程度、病理类型、肿块大小和淋巴结转移均无相关性(P>0.05) 。 结论:miR-20a在肺癌组织高表达,可能与肺癌的发生有关。}     

围绝经期和绝经后女性雌激素与T细胞亚群和PD-1的相关性

目的:探讨绝经前、围绝经期和绝经后外周血雌激素水平与T细胞亚群和PD-1表达的相关性。方法:选取对照组女性60例,围绝经期组30例,绝经后期组40例。采用流式细胞术和化学发光等技术测定T细胞亚群、PD-1表达和雌激素水平。结果 :相比正常组,围绝经期组和绝经后期组CD3+、CD4+T细胞亚群相对值及CD4+/CD8+比值显著下降(P<0.05)。CD8+T细胞亚群相对值在组间无统计学差异。CD4+、CD8+T细胞PD-1相对表达量3组间有差异(P<0.05),绝经后期组低于围绝经期组和正常组。CD4+、CD8+T细胞亚群PD-1相对表达量均与E2呈正相关(P<0.001)。结论:围绝经期及绝经后期女性CD3+、CD4+和CD8+T细胞亚群相对值均下降。CD4+、CD8+T细胞PD-1表达量也降低,显示雌激素与T细胞免疫关系密切。     

乙型肝炎病毒DNA定量与ALT的相关分析

目的 探讨HBsAg 、HBeAg 、HBcAb (简称"大三阳")及HBsAg 、HBeAb 、HBcAb (简称"小三阳")乙型肝炎(简称"乙肝")患者病毒DNA(HBV DNA)与ALT的相互关系.方法 选择1191份乙肝患者血清标本(其中大三阳192例,小三阳999例),HBV DNA测定采用FQ PCR法,ALT检测采用酶法,对其检测结果进行分析.结果 大三阳组和小三阳组HBV DNA与ALT值的差异均有高度统计学意义(P＜0.01).大三阳组HBV DNA异常率(91.67%)和ALT异常率(60.42%)显著高于小三阳组(21.62%、28.13%)(P＜0.01),但HBV DNA与ALT并无相关性.结论 大三阳患者HBV DNA含量及肝损伤程度高于小三阳患者,但HBV DNA与ALT并不相关,HBV DNA与ALT两者同时测定有助于更明确地反映患者体内病毒的感染情况.     

内参基因β-actin质粒标准品的构建

为构建检测内参基因β-actin mRNA表达水平差异的标准品，以成人外周血细胞的总RNA为模板、Random 6 mers为引物反转录合成cDNA，用该cDNA为模板PCR扩增人β-actin基因相应的cDNA片段，构建PMD-18-β-actin重组质粒，鉴定测序后，用荧光定量PCR制作标准曲线。结果外周血提取的总RNA完整性良好，构建的β-actin质粒经PCR扩增后得到一186 bp的清晰条带，测序结果与目的片段完全一致，且质粒的原始浓度为2.39×1013 copies/mL，倍比稀释至2.0×104 copies/mL均能得到良好的标准曲线（R2=1），提示构建β-actin基因荧光定量PCR标准质粒成功。