Isthmin 对博来霉素诱导肺纤维化小鼠胶原沉积及血管生成的影响

目的探讨Isthmin（ISM）对肺纤维模型小鼠肺部胶原沉积、血管新生的影响,为肺纤维化的防治提供理论依据。方法将昆明小鼠随机分成：对照组、模型组、ISM组3组,每组16只。博来霉素（BLM）气管内滴人制作小鼠肺纤维化模型,对照组（气管内注射0．9％NS＋尾静脉注入0．9％NS）、模型组（气管内注射BLM＋尾静脉注入0．9％NS）、ISM组（气管内注射BLM＋尾静脉注入Isthmin蛋白）。分别于第7天、14天、21天、28天取实验小鼠肺组织,病理切片苏木精-伊红染色（HE）染色观察肺结构变化,Masson染色了解肺部胶原沉积情况,CD31免疫组化观察对血管内皮细胞数目的影响。结果给予ISM蛋白可减轻小鼠肺结构破坏,减少肺部胶原沉积,血管内皮细胞数目增加。肺组织胶原纤维Masson染色经平均光密度比较,模型组与对照组第7、14、21和28天差异具有统计学意义（P〈0．01）;Isthmin组与模型组比较,第21天和28天差异具有统计学意义（P〈0．01）;肺组织CD31蛋白平均光密度比较,模型组与对照组第14天、21天和28天差异显著（P〈0．05）、第7天差异具有统计学意义（P〈0．01）,Isthmin组与模型组比较,第21天和28天差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论ISM蛋白可减轻肺纤维化程度,但不是通过抑制血管形成实现的。     

人多巴胺D2受体基因内含子区51103T/C多态性对基因转录活性的影响

目的探讨人多巴胺D2受体（DRD2）基因第3内含子区51103 bp位点单核苷酸多态性（rs2075652）对DRD2基因转录活性的影响,进一步揭示DRD2基因第3内含子区的单核苷酸多态性影响创伤后应激障碍发病风险的分子机制。方法以人全血基因组DNA为模板,扩增DRD2基因第3内含子区序列（399 bp）,51103 bp处分别为T或C,与报告基因载体pmir Glo相连接,构建重组荧光素酶表达载体,经限制性内切酶酶切及测序得以鉴定,然后分别与pRL-CMV共转染人胚肾癌细胞株HEK293,检测细胞中荧光素酶的相对表达量。结果双酶切及测序结果证实成功构建重组质粒pmir Glo-T/pmir Glo-C,荧光素酶检测结果显示,当第3内含子区51103 bp位点为C时荧光素酶活性显著高于为T时（P〈0.01）。结论成功构建了pmir Glo-T/pmir Glo-C报告基因重组质粒,DRD2基因第3内含子区rs2075652位点由T突变为C后,可能增强基因转录活性,该结果为进一步研究DRD2基因内含子区的功能奠定了基础。     

低氧条件下急性肺损伤小鼠肺血管通透性变化

目的:观察低氧环境下急性肺损伤(ALI)小鼠肺水含量、组织病理学及血管通透性变化,探讨低氧环境下ALI致死的可能机制。方法:280只昆明白小鼠,分为常氧+PBS组(CK组,n=35)、低氧+PBS组(HP组,n=35)、常氧+内毒素(LPS)组(NL组,n=60)和低氧+LPS组(HL组,n=150)。NL组和HL组采用LPS诱导致ALI模型,CK组和HP组给予等量PBS,随后按分组要求分别于常氧条件和低压氧仓中饲养,于造模后第1、3、7天观察各组小鼠肺水含量、肺组织病理学评分、肺血管通透性等指标变化,同时观察各组小鼠7天内的存活率,并比较分析各组差异。结果:与其它三组比较,HL组小鼠实验7天后死亡率明显增加(P0.05);在LPS所致ALI后,HL组肺水含量显著高于NL组(P0.05);肺组织HE染色结果显示,HL组出现较为严重的肺间质水肿、肺泡腔缩小、血管肥大、肺间质增厚等病理变化,且肺组织中伊文思蓝含量在第7天显著高于NL组(P0.01)。结论:低氧条件下ALI死亡率增加可能与肺间质屏障功能受损及肺血管通透性增加有关。     

人多巴胺D2受体基因内含子区51103 T/C多态性对基因转录活性的影响

目的：探讨人多巴胺D2受体(DRD2)基因第3内含子区51103 bp位点单核苷酸多态性(rs2075652)对DRD2基因转录活性的影响,进一步揭示DRD2基因第3内含子区的单核苷酸多态性影响创伤后应激障碍发病风险的分子机制。方法以人全血基因组DNA为模板,扩增DRD2基因第3内含子区序列(399 bp),51103 bp处分别为T或C,与报告基因载体pmirGlo相连接,构建重组荧光素酶表达载体,经限制性内切酶酶切及测序得以鉴定,然后分别与pRL-CMV共转染人胚肾癌细胞株HEK293,检测细胞中荧光素酶的相对表达量。结果双酶切及测序结果证实成功构建重组质粒pmirGlo-T/pmirGlo-C,荧光素酶检测结果显示,当第3内含子区51103 bp位点为C时荧光素酶活性显著高于为T时(P<0．01)。结论成功构建了pmirGlo-T/pmirGlo-C报告基因重组质粒,DRD2基因第3内含子区rs2075652位点由T突变为C后,可能增强基因转录活性,该结果为进一步研究DRD2基因内含子区的功能奠定了基础。     

细胞因子生物标志物在爆炸致急性肺损伤检测中的应用

爆炸冲击伤在现代战争、民用爆破及恐怖袭击中的发生比例日益增加,肺脏作为爆炸冲击伤的最敏感靶器官之一,在冲击伤发生发展过程中最具有代表性。原发肺冲击伤导致急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征是其主要死亡原因。根据肺冲击伤病情发展的不同阶段,目前可以通过相关的生物标志物的检测来进行诊断与评估,笔者就目前爆炸致急性肺损伤检测的主要生化标志物进行综述,为爆炸冲击伤发展过程的动态观测提供依据。     

细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤是中枢神经系统的一种严重创伤,迄今为止尚无痊愈的治疗措施。目前,细胞移植治疗脊髓损伤已广泛应用于基础研究及临床治疗。由于不同类型种子细胞所具有的生物学特性及功能不同,细胞植入后,存活、生长、分化各异,使得细胞移植治疗脊髓损伤的效果及安全性差异极大。未来的研究应首先保证细胞移植治疗的安全性,并采用联合措施,更有效地促进脊髓损伤修复。     

小鼠血管内皮细胞的培养、鉴定及巨噬细胞移动抑制因子对其促增殖作用的研究

目的探讨小鼠血管内皮细胞的培养、鉴定方法及巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对其增殖活性的调节作用。方法取小鼠主动脉,去除周围的脂肪和结缔组织,将动脉环剪成0.5 mm大小,放入基质胶处理的12孔培养板内,待细胞长满,用胰酶消化后,取单细胞悬液用抗CD146免疫磁珠纯化,再用CD31抗体鉴定细胞纯度,按104个细胞/孔加入96孔板培养,细胞70%～80%融合时用不同浓度MIF或MIF抑制剂处理细胞,48 h后用甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖程度。结果经CD146磁珠纯化后细胞纯度为95%以上,MTT检测结果显示低剂量MIF能促进血管内皮细胞的增殖,并具有剂量效应关系,而高剂量MIF则与MIF抑制剂一样,抑制血管内皮细胞的增殖。结论成功建立了简单可行的小鼠血管内皮细胞的体外培养方法,并证实一定剂量范围内的MIF能促进血管内皮细胞的增殖,说明MIF在血管内皮细胞的多种病理生理反应中起重要作用。     

调节自噬对创伤性失血休克后血管功能障碍的影响

目的 研究自噬对创伤性失血休克（THS）后血管功能障碍的影响。方法 80只SD大鼠随机分为对照组、休克组、休克+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）1、2、4 mmol/L组、休克+自噬激动剂雷帕霉素（RAPA）0.1、1、2、10μmol/L组、休克+RAPA(1μmol/L)+3-MA(2 mmol/L)组,建立THS大鼠模型,观察上调或抑制自噬对THS大鼠血管反应性的影响。24只大鼠随机分为正常组、休克+乳酸林格氏液（LR）组、休克+LR+RAPA组,在体观察诱导自噬对休克大鼠平均动脉血压（MAP）及血流灌注的影响,同时检测血管组织中自噬标志物相关蛋白的表达。结果 离体血管功能检测结果显示,THS大鼠的血管反应性明显降低,RAPA处理可提高THS大鼠的血管反应性,而3-MA处理可使THS大鼠血管反应性进一步降低,并且可拮抗RAPA提高THS大鼠血管反应性的作用。在整体动物水平,THS大鼠在给予2倍失血量的LR复苏后,MAP和肝、肾血流灌注有所恢复,但仍显著低于正常大鼠;预先给予RAPA的THS大鼠在经LR复苏后,MAP和肝、肾血流灌注均得到了明显恢复,其效果明显优于单纯LR治疗。...