复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠模型的诱导及其特点

目的 诱导复发性实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis,EAU)小鼠模型,评价其发生过程及特点.方法 完全弗氏佐剂(CFA)乳化的光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP) 161-180肽段免疫B10.RⅢ小鼠作为诱导组(35只),用CFA-PBS免疫小鼠作为对照组(6只).小鼠免疫后7、14、21、28、35 d裂隙灯显微镜和光学显微镜观察及评价眼部炎症发生、眼部表现和病理学变化;待炎症完全消失时,再次免疫小鼠,评价小鼠眼部炎症复发.结果 诱导组首次免疫后7d出现初发炎症,14 d炎症达高峰,随后炎症消退,至35 d完全消失.第35天进行再次免疫,36 d出现复发炎症,42 d达炎症高峰,随后炎症消退,但至观察期第96天部分鼠(1/5)仍维持炎症.眼部表现为睫状充血、前房渗出、瞳孔受损.病理学表现为视网膜和脉络膜炎性细胞浸润,血管炎、肉芽肿性炎,光感受器细胞层破坏,视网膜下渗出.对照组未见明显炎症.结论 建立的EAU呈现慢性复发性病程,其眼部表现和病理学特征与人类葡萄膜炎相似,可作为葡萄膜炎研究的新型动物模型.     

实验动物弓形虫几种检测方法的应用评价研究

目的:评价检测实验动物弓形虫的2种方法。方法:应用间接免疫荧光法(IFA)、间接酶联染色法(IEA)、间接酶联免疫吸附法(ELISA)对实验动物的血清样品进行检测,以间接免疫荧光(IFA)法作为检测弓形虫的标准方法,比较后2种方法的检出率、敏感性、特异性等。结果血清经IFA、IEA、ELISA     

人脐静脉血内皮祖细胞的分离扩增和生物学特征

目的:探索人脐静脉血内皮祖细胞的分离和扩增条件,并观测其生物学特性.方法:采集人脐静脉血,应用密度梯度离心法,分离其中单个核细胞,流式细胞术检测CD133 CD34 阳性率;利用差速贴壁法(48 h内贴壁和48 h后贴壁)联合内皮细胞专用培养基EGM-2培养细胞,接种于预先包埋了明胶培养瓶或培养板,倒置显微镜观察细胞生长形态和形成集落能力,免疫细胞化学法检测其免疫表型,摄取Ac-LDL和连接UEA-1功能,在生长因子培养体系中诱导其向成熟内皮细胞分化.结果:所获单个核细胞中CD133 CD34 百分比为1.06%;在EGM-2培养体系下可获得2种亚型的内皮祖细胞,即早期内皮祖细胞和晚期增殖性内皮祖细胞.其中48h后贴壁细胞属于早期内皮祖细胞,增殖能力较弱,免疫荧光检测,显示CD14和CD34KDR胞浆呈阳性表达,Ac-LDL UEA-1 功能特征;而48 h内贴壁细胞在10～17 d时可见由单个细胞增殖形成的克隆,呈铺路石样单层排列,增殖力旺盛形成融合状态,形成次集集落;经免疫荧光检测,显示CD133CD34和CD34KDR细胞质呈阳性表达,Ae-LDL UEA-1 功能特征,传代后vWF,CD31呈强阳性表达,是晚期增殖性内皮祖细胞.结论:经人脐静脉血可分离培养获得2种亚型的内皮祖细胞,在特定的培养体系中细胞可由祖细胞表型向成熟内皮细胞分化.     

立体定向接种胶质瘤细胞系C6形成大鼠脑内原位移植瘤的生长特性

目的通过立体定向技术建立大鼠脑原位移植瘤模型,观察其生长特性.方法在立体定向仪引导下,将体外培养的大鼠C6胶质瘤单细胞悬液(1×106/10 μl)接种于27只Wistar大鼠右尾状核区.以接种C6细胞后大鼠的允许生存期,将大鼠分成2组,观察大鼠生存状态、成瘤情况、肿瘤体积、脏器转移灶、组织学形态、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、血管内皮生长因子(VEGF)、兔抗人因子Ⅷ相关抗原免疫组化染色.结果大鼠成瘤率为100%,无颅外转移.荷瘤大鼠平均生存期为(25.50±5.75)d.肿瘤体积在第3～4周时肿瘤迅速增大.肿瘤呈浸润性生长,甚至侵袭颅骨;瘤细胞病理性核分裂像多见,GFAP蛋白呈散在阳性表达,VEGF蛋白强阳性表达;瘤组织内有典型的栅栏状坏死和丰富的微血管.结论 C6细胞在大鼠脑内原位移植瘤与人脑胶质母细胞形态和生长特性十分相似,具有分化程度低、微血管丰富、生长速度快且高度侵袭等特点.     

神经丝轻链蛋白在阿尔茨海默病早期诊断中的作用研究

目的： 探讨血清神经丝轻链蛋白（neurofilament light chain protein,NFL）是否可以作为预测阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease,AD）早期的外周血生物标志物。 方法： 纳入新疆医科大学附属中医医院阿尔茨海默病临床数据库的AD患者50例,遗忘型轻度认知功能障碍（amnestic mild cognitive impairment,aMCI）患者50例,以及选择同一时间段内按年龄、文化程度相匹配的健康对照者（cognitively normal,CN）50例,受试者均采集血清,采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清NFL水平。 结果： ①AD、aMCI与CN患者的年龄、教育年限、体质指数（body mass index,BMI）比较均无统计学差异（P>0.05）,资料具有可比性。②AD患者简易精神状态检查量表（mini-mental state examination,MMSE）、蒙特利尔认知评估量表（Montreal cognitive assessment,MoCA）评分显著低于aMCI组和CN组[AD组（17.48±7.50）,aMCI组（25.56±1.63）,CN组（28.60±1.09）;F=81.830,P=0.000],MoCA评分差异最明显[AD组（12.04±6.31）,aMCI组（19.92±3.17）,CN组（27.62±1.16）;F=177.187,P=0.000]。③血清NFL水平[AD组（4.486±2.463）ng/mL,aMCI组（5.101±2.172）ng/mL,CN组（2.885±1.469）ng/mL,F=15.167,P=0.000],AD组和aMCI组NFL水平显著高于CN组,其中aMCI组最高,3组间比较具有统计学差异;应用Spearman相关性分析发现3组间年龄、MMSE评分、MoCA评分、日常生活能力量表评分（activity of dai1y living scale,ADL）、临床痴呆评定量表（clinical dementia rating,CDR）评分与NFL水平没有相关性（P>0.05）。 结论： 轻度认知功能障碍患者血清NFL水平最高,提示血清NFL也许是预测阿尔茨海默病早期的外周血生物标志物。     

诺帝对血管内皮生长因子诱导的人脐血源性内皮祖细胞功能的影响

探讨手性化合物诺帝(Nordy)对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的人脐血源性内皮祖细胞(EPCs)功能的影响及其意义。应用密度梯度离心法分离新鲜人脐血的单个核细胞，接种于EGM-2培养液中培养7～10 d获得内皮祖细胞(EPCs)。分别采用MTT法、Millicell-PCF培养小室系统和Matrigel内小管形成试验检测诺帝对VEGF刺激下EPCs增殖活性、迁移能力和体外形成小管样结构能力的影响。结果表明，100 μmol·L^-1诺帝作用24 h明显抑制EPCs增殖活性(P<0.05)，诺帝(25～50 μmol·L^-1)作用48～72 h也明显抑制EPCs增殖活性(P<0.05)。诺帝(25～100 μmol·L^-1)显著抑制VEGF诱导的EPCs迁移活性和体外形成小管样结构的能力(P<0.05)。诺帝能抑制体外VEGF诱导的人脐血源性EPCs增殖、迁移和体外小管形成能力，提示其具有抗EPCs效应。     

几种药物对兔球虫病的疗效试验

选用40只45日龄左右、严重自然感染兔球虫的日本大耳白兔,随机分成5组,即兔球灵组(1500mg/kg)、地克珠利组(2mg/kg)、拉沙洛菌素组(150mg/kg)、氯苯胍组(300mg/kg)、不给药对照组,分别将药物按一定比例混匀在饲料中,制成颗粒料让兔自由采食,以比较其对兔球虫病的治疗效果。通过     

餐后2h血糖、游离三碘甲状腺原氨酸及胱抑素C对阿尔茨海默病认知损害的影响

目的探讨餐后2 h血糖(2h P-BG)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT₃)及胱抑素(Cys-C)对阿尔茨海默病(AD)认知损害的影响。方法选取2017至2021年新疆医科大学附属中医医院AD数据库中470例AD患者，根据CDR量表评分将患者分为4组。分别为：轻度认知损害组(a MCI组)136例、轻度痴呆组(Mi-D组)140例、中度痴呆组(Mo-D组)134例和重度痴呆组(SD组)60例。用Spearman相关性分析、有序Logistic回归分析AD患者认知损害的危险因素。结果(1)4组间患者的年龄、高血压病病史、BMI、TT₃、TT₄、FT₃、FT₄比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)相关性分析显示：MMSE量表评分与年龄(r=-0.238,P<0.05)、TT₃(r=-0.323,P<0.05)、FT₃(r=-0.252,P<0.05)、FBG(r=-0.111,P<0.05)呈负相关；...     

实验动物弓形虫几种检测方法的应用评价研究

目的:评价检测实验动物弓形虫的2种方法。方法:应用间接免疫荧光法(IFA)、间接酶联染色法(IEA)、间接酶联免疫吸附法(ELISA)对实验动物的血清样品进行检测,以间接免疫荧光(IFA)法作为检测弓形虫的标准方法,比较后2种方法的检出率、敏感性、特异性等。结果血清经IFA、IEA、ELISA检测,分别有32.73%(18/55)、41.86(36/86)和6.34%(4/63)阳性;IFA、IEA两种方法检测血清的阳性率之间无显著性差异(P>0.05),IFA与ELISA两种方法检测血清的阳性率之间有显著性差异(P<0.05)。IEA、ELISA敏感性和特异性分别为100%与86.48%,13.33%与100%;经独立性检验,IFA与IEA两种方法存在关联性(P<0.05),IFA与ELISA两种检测方法相互独立(P>0.05)。结论:与IFA相比,IEA检测弓形虫抗体具有相似的敏感性及特异性,检出率较高,可适用于基层单位实验动物弓形虫抗体的检测;ELISA检测弓形虫抗体敏感性不高,检出率低,仍需进一步探讨和完善。     

阻断ERK信号通路降低大鼠脑创伤后MMP-9的表达及减轻脑水肿

目的 观察并探讨阻断ERK通路激活对SD大鼠脑创伤后基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达变化及脑水肿形成的影响及意义。方法 取健康成年雄性SD大鼠90只,随机分为：对照组：只在颅骨上做一直径约为4 mm的骨窗,不作脑创伤;脑创伤组：制作改进式Feeney’s创伤性脑损伤模型;ERK抑制组：脑创伤前15 min股静脉注射ERK抑制剂（SCH772984,500 μg/kg）,每组30只/组大鼠。制作改进式Feeney’s 脑创伤模型后,分别在脑创伤后2 h、2 d时断头取脑,Evans Blue法测定血脑屏障通透性变化,干湿比重法测定脑组织含水量,RT-PCR法和Western blotting法检测各组大鼠脑组织ERK磷酸化的水平及MMP-9 mRNA及蛋白的表达水平。结果（1）与对照组比较,脑创伤组大鼠脑组织中ERK的磷酸化水平在伤后2 h和2 d均出现明显上升（P<0.01）,MMP-9mRNA和蛋白的表达在脑创伤后2 d时表达也出现显著增高（均P<0.01）;与脑创伤组比较,ERK抑制组大鼠脑组织中ERK的磷酸化水平在各时间点均明显下降（P<0.01）,MMP-9 mRNA和蛋白在伤后2 d的过表达水平也较脑创伤组出现明显降低（均P<0.01）;（2）脑创伤组大鼠的血脑屏障通透性较对照组在伤后出现显著升高（P<0.05）,ERK抑制组大鼠的血脑屏障通透性则较脑创伤组出现明显降低（P<0.05）;脑创伤组大鼠的脑含水量在伤后在2 d时出现显著增加（P<0.01）,ERK抑制组大鼠的脑含水量则较脑创伤组有明显降低（P<0.01）。结论 阻断ERK通路过度的活化可显著降低大鼠脑创伤后MMP-9高表达,减轻大鼠血脑屏障破坏及创伤性脑水肿,提示ERK信号通路在脑创伤后的过度活化可通过调节MMP-9的表达在创伤性脑水肿中发挥重要作用。