质粒pcDNA3.1-asHpa的构建及意义

目的 :构建乙酰肝素酶信号密码的反义基因真核表达载体 ,探索恶性肿瘤基因治疗的新途径。方法 :以质粒 pc DNA3.1为载体 ,将乙酰肝素酶信号密码的 DNA片段反向插入其多克隆位点得到反义乙酰肝素酶信号密码真核表达载体 ( pc DNA3.1 - as Hpa)。结果 :经过 PCR扩增鉴定、电泳证实获得的重组基因的大小和插入方向正确。结论 :成功的构建了乙酰肝素酶信号密码的反义基因真核表达载体 ,可以进一步用于反义基因表达的实验研究     

骨质疏松模型IL-6和NF-κβ的基因表达特征和意义

目的 探讨IL-6、NF-κβ和骨形成标志物(BALP 和BGP) 在大鼠骨质疏松模型中的表达水平和在骨质疏松发病中的特征.方法 将60只5月龄雌性SD大鼠随机分为对照组、假手术组和卵巢切除组.在术后第2、3、4、5、6月,每组随机取4只大鼠检测BMD、IL-6、BALP 和BGP.用实时定量RT-PCR检测其骨组织中的IL-6和NF-κβ的基因表达水平.结果 术后第4、5、6月卵巢切除组大鼠的骨密度(P＜0.01)与假手术组和对照组相比显著降低,血清 IL-6 水平在术后第2至6月明显升高(P＜0.01),血清BALP和BGP于术后4、5、6月显著增高(P＜0.05).实时定量RT-PCR分析表明卵巢切除组大鼠IL-6 和NF-κβ的mRNA表达水平随时间而增加,且与骨密度呈负相关,IL-6 和NF-κβ为正相关.结论 本研究表明骨质疏松大鼠的IL-6、NF-κβ和骨形成标志物水平明显增高.这些分子在骨质疏松发病中具有重要作用.     

大脑皮层神经细胞原代培养及其缺氧缺糖损伤模型

缺氧缺血性脑损伤的发病率、死亡率都很高 ,对其发病机理的研究和有效治疗方案的探索一直是研究的热点。在体实验往往受到体液、呼吸、循环等复杂因素的影响 ,很难解释某单一因素的影响作用及强度。因此探索体外培养方法 ,建立缺氧缺糖损伤模型 ,是神经科学研究中一项不可缺少的手段。1　材料和方法1 .1　动物出生 2 4h以内的Wistar大鼠 ,雌雄不限 ,由郧阳医学院动物中心提供。1 .2　药品与试剂高糖DMEM培养基 (Gibco公司 ) ,胎牛血清 (杭州四季青 ) ,神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、SP90 0 1试剂盒、DAB试剂盒 (北京中山 ) ,LDH(郎道…     

硝酸甘油促进人骨髓间质干细胞增殖分化实验研究

目的：探讨硝酸甘油（Nitroglycerin,NTG）对人骨髓间质干细胞（Human Bone Marrow—derived Mesenchymal StemCeHs,HBMSCs）的增殖及向成骨细胞分化的影响及其作用机制。方法：建立HBMSCs体外模型,诱导HBMSCs向成骨细胞分化。给予不同浓度的NTG,测定一氧化氮（NO）含量,考察不同浓度NTG对HBMSCs的NO生成的影响;用BrdU细胞增殖试剂盒测定反映细胞的增殖情况;测定细胞内碱性磷酸酶（ALP）活性与钙沉积量,反映不同浓度NTG对HBMSCs向成骨细胞分化的影响,探讨NO和ALP及钙沉积之间的关系;根据以上实验选出NTG最小有效浓度,再合用内皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthase,eNOS）拮抗剂以及诱导型一氧化氮合酶（Induciable nitric oxide synthase,iNOS）拮抗荆探讨NTG作用于HBMSCs的机制是否与NOS有关。结果：NTG呈剂量依赖性的增加原代HBMSCs的增殖、NO含量、ALP活性及钙沉积量。NTG10μM对HBMSCs增殖及成骨型分化的诱导作用以及对HBMSCs的NO产量和NOS活性的影响不能被eNOS抑制剂L—NAME及iNOS拮抗剂1400w所阻滞。结论：NTG可通过NO途径促进HBMSCs的增殖及其向成骨细胞的分化,但其释放N0的效应并不依赖NOS。     

数学模型应用于膝关节骨性关节炎证型识别的研究

目的 运用模糊数学方法对膝关节骨性关节炎（KOA）的中医证侯进行客观量化,初步建立该病证型识别的模糊数学模型.方法 依据《中医临床路径实用指南》膝痹病的4个常见证型,参照《中医诊断学》和《中药新药临床研究指导原则》,制定KOA中医辨证要素诊断标准.采用专家评判法,计算出各辨证要素的权重值.以个体模式识别数学模型公式,运用最大隶属度原则建立KOA证型识别数学模型.符合纳入标准的KOA患者分别以人工辨证法和模糊数学识别模型进行辨证.结果 105例病例中两种方法辨证结果一致者90例,辨证符合率为85.71％,一致性经配对卡方检验,Kappa=0.795 （P＜ 0.01）.结论 本研究初步建立了KOA证型识别模糊数学模型,与专家辨证有较高的一致性,经进一步优化有望发展为KOA证型专家诊疗系统.     

新生儿枫糖尿病脑损伤的MR表现(3例报告并文献复习)

目的 探讨新生儿枫糖尿病(MSUD)脑损伤的MR表现.方法 回顾性分析3例经质谱分析证实的新生儿MSUD患儿颅脑MR资料并复习相关文献.结果 3例颅脑MR表现为双侧大脑半球中央前后回、放射冠、半卵圆中心、内囊后肢、丘脑腹外侧核、大脑脚、脑干背侧、皮质脊髓束、脑桥、双侧小脑中脚以及小脑白质等已髓鞘化区域对称性长T1、长T2异常信号,其中2例行扩散加权成像(DWI)扫描见如上区域呈明显高信号.结论 新生儿MSUD脑损伤有较为特征的MR表现.     

湖北十堰地区正常人群骨密度调查研究

目的调查十堰地区正常人群的骨密度变化规律及骨质疏松患病情况,为骨质疏松的诊断和防治提供科学依据。方法选取居住在湖北十堰地区的居民3026例(男性1468例,女性1558例),用DTX-200骨密度仪(美国OSTEOMETER MEDITECH公司生产)测量非优势手尺桡骨远端1/3的BMD。结果男女性BMD均在30～39岁达到骨峰值,各年龄段男性的BMD均高于女性。女性从40～49岁开始(男性组从50～59岁开始),BMD开始明显下降(P0.05),骨量减少和骨质疏松的检出率明显增加(P0.05)。同龄组女性骨质疏松患病率比男性高(P0.05)。结论十堰地区正常人群BMD随年龄增长而降低,OP患病率随年龄增加而增加,女性OP患病率高于男性。     

临床药师在慢性肾衰竭患者中的用药监护1例

随着临床药师制度的建立、健全,国家对临床药学工作的重视和投入,医院药学已经全面进人以病人为中心的药学服务阶段。临床药师在临床的作用和地位,随着临床药学工作的深入和其自身能力的不断提高,正逐步得到医生和患者的认可。笔者经过一年的临床药师培训,回本院作为肾内科专科临床药师,积极参与临床用药方案的制定及患者用药监护。现将临床药师参与慢性肾衰竭典型病例用药方案制定、用药监护及体会报道如下。     

双嘧达莫对体外培养神经干细胞增殖的影响

目的研究双嘧达莫(dipyridamole)对体外培养神经干细胞的促增殖作用.方法取新生小鼠大脑进行神经干细胞原代培养,通过神经球生成的观察、特异性蛋白质免疫细胞化学染色和BrdU标记鉴定并判断其增殖能力;双嘧达莫按0.1,0.5,2.5 μmol·L-13个浓度加入神经干细胞培养基中,同时设立溶媒对照组和阳性对照组,通过观察神经球形态、神经球生成数目及MTT法定量比较,分析不同浓度双嘧达莫对神经干细胞分裂增殖的影响.结果在培养物中有大量神经球生成,神经干细胞的特异性蛋白质免疫细胞化学染色呈阳性,BrdU标记亦呈阳性反应,表明所培养的细胞为神经干细胞,具有增殖能力.双嘧达莫中、高浓度组神经球数目、MTT比色结果明显高于溶媒对照组.结论双嘧达莫具有促进神经干细胞增殖的作用.     

建立MRI影像组学列线图术前预测子宫内膜癌浸润深肌层

目的 构建MRI影像组学列线图,评价其预测子宫内膜癌(EC)深肌层浸润(DMI)的价值.方法 分析133例EC患者术前临床及影像学资料,根据术后病理所见肌层浸润情况将其分为DMI组(n=62)和非DMI组(n=71).获取并筛选其影像组学特征,计算影像组学得分(Radscore),利用多因素logistic回归筛选常规...