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目的以皮肤荧光转基因斑马鱼(ktr4:NTR-h Kik GR)为实验动物,研究长春新碱对皮肤细胞的损伤作用及其分子机制,建立皮肤损伤模型。方法取受精后24 h皮肤荧光斑马鱼胚胎,将脱膜后的胚胎分别置于0.01~0.04 mmol·L-1不同浓度的长春新碱中,24 h后采用荧光显像的方法对斑马鱼皮肤荧光斑点进行计数和统计处理;同时对鱼体细胞死亡情况进行TUNEL试剂盒检测,确定其皮肤细胞死亡的水平;利用蛋白免疫印迹的方法对各组斑马鱼胚胎的caspase-3、KRT4及p53表达水平进行检测。结果在长春新碱与斑马鱼胚胎共同孵育24 h后,0.02、0.04 mmol·L-1长春新碱明显引起斑马鱼荧光皮肤细胞减少(P<0.01);TUNEL检测表明,长春新碱与对照组比较能明显引起斑马鱼皮肤细胞凋亡;Western bolt分析显示,0.02、0.04 mmol·L-1长春新碱能诱导斑马鱼胚胎caspase-3和p53表达增加(P<0.01),同时高浓度的长春新碱可使皮肤角蛋白KRT4表达明显减少(P<0.01)。结论利用长春新碱引起斑马鱼皮肤损伤,该局部毒性作用可作为皮肤损伤的造模新方法。 相似文献
2.
水溶性氮酮对斑马鱼胚胎药物渗透及致畸性作用的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 研究水溶性氮酮对白藜芦醇透过斑马鱼胚胎性能与斑马鱼致畸性的影响.方法 利用对斑马鱼胚胎发育致畸作用,考察氮酮在斑马鱼筛选模型上的适用性,确定氮酮的使用剂量;利用氮酮的透皮促进作用,观察对白藜芦醇抑制斑马鱼节间血流的影响.结果 在0.01~0.5μg/ml范围内氮酮对斑马鱼较安全,0.5μg/ml溶性氮酮可显著促进斑马鱼对白藜芦醇的透过,斑马鱼节间血管的抑制率达到了22.9%.结论 浓度高于0.5 μg/ml的水溶性氮酮对斑马鱼胚胎的发育有明显致畸作用;0.5μg/ml的氮酮对白藜芦醇的斑马鱼胚胎透过效果最佳. 相似文献
3.
目的:观察醋酸肠道刺激对大鼠肠道高敏感性的影响及其可能影响因子。方法:采用醋酸慢性刺激建立肠道高敏感性大鼠模型,观察大鼠肠道敏感性以及结肠黏膜下P物质、5-羟色胺免疫反应阳性纤维的变化.结果:醋酸注射直肠能够引起实验动物的腹壁撤离反射的阈值降低;肠道内的P物质含量低于对照组(P<0.01),肠道粘膜下的5-羟色胺免疫阳性神经元/神经纤维阳性指数(IOD)显著增加(P<0.01);结论:醋酸直肠慢性刺激可导致肠道高敏感性,其机制可能与引起5-HT免疫阳性神经纤维增加、P物质分泌紊乱有关。 相似文献
4.
有机助溶剂对血管生成斑马鱼模型的适用性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究二甲基亚砜、丙酮、甲醇、异丙醇四种有机溶剂在斑马鱼模型抗血管生成药物筛选中作为助溶剂的适用性.方法 以每种有机溶剂系列浓度处理发育12h或24h斑马鱼胚胎,到发育72 h观察胚胎血管生成、畸形、死亡状况,计数体节问血管,并计算畸形率和死亡率.结果 有机溶剂中存活的斑马鱼胚胎体节间血管形态和数量正常,与对照一致.0.1%浓度二甲基亚砜、丙酮和1%浓度甲醇中斑马鱼胚胎无畸形和死亡状况,但随着浓度上升畸形率和死亡率均显著高于对照.0.1%浓度异丙醇中斑马鱼胚胎的畸形率和死亡率已显著高于对照.结论 作为助溶剂,二甲基亚砜、丙酮适宜浓度为≤0.1%,甲醇适宜浓度为≤1%,异丙醇不适合用于斑马鱼模型抗血管生成药物筛选. 相似文献
5.
利用斑马鱼模型研究靛玉红及其衍生物抑制血管生成作用的构效关系 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 利用斑马鱼模型考察中药单体靛玉红(Ind)及其衍生物的抑制血管生成活性及其量效关系,并为斑马鱼模型在新药构效关系研究中的应用提供实验依据。方法 选用TG(VEGFR2:GFP)系血管荧光转基因斑马鱼作为筛选模型,分别用Ind及其衍生物靛玉红-3’-单肟(IMO)、6-溴-靛玉红-3’-单肟(BIO)处理斑马鱼胚胎,以节间血管数作为指标,考察药物对斑马鱼胚胎抑制血管生成的影响。结果 在相同的剂量下,Ind、IMO与BIO抑制斑马鱼节间血管(ISV)生成的作用依次增强,三者都显示明显的量效关系。Ind、IMO 与BIO的半数有效剂量(EC50),分别为89.10,5.188和2.686 μmol·L-1。结论 在靛玉红母体结构改造中,随着C-3’位肟化以及C-6位溴原子的引入,溶解性明显改善,其抑制血管生成活性也逐渐增强。 相似文献
6.
目的 考察新绿原酸对宫颈癌HeLa细胞体外迁移模型和斑马鱼移植瘤模型的影响。方法 MTT法检测新绿原酸(20、40、80、160、320 μmol/L)对HeLa细胞增殖的作用;应用宫颈癌细胞HeLa划痕愈合模型和Transwell实验考察新绿原酸(28、56、113 μmol/L)对体外迁移作用的影响;同时利用构建的绿色荧光蛋白(GFP)的HeLa细胞系建立斑马鱼移植瘤模型,考察新绿原酸(56、113、226 μmol/L)对体内移植瘤模型细胞迁移的作用;Western blotting法检测新绿原酸对内皮生长因子(EGF)诱导的HeLa细胞中表皮生长因子受体(EGFR)、p-EGFR蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,新绿原酸在160 μmol/L及以下浓度对HeLa细胞增殖无明显影响;与对照组比较,56、113 μmol/L新绿原酸显著抑制划痕愈合,抑制率分别为49.3%(P<0.05)和64.1%(P<0.01);Transwell实验结果提示,113 μmol/L新绿原酸具有显著抑制HeLa细胞向下层迁移的作用(P<0.05);与模型组比较,113、226 μmol/L新绿原酸可显著减少斑马鱼移植瘤模型的HeLa细胞的迁移面积(P<0.05、0.01);Western blotting结果显示,与EGF组比较,新绿原酸对EGFR表达和磷酸化有明显抑制作用,56、113 μmol/L浓度组差异显著(P<0.01)。结论 在未影响HeLa细胞增殖的浓度下,新绿原酸具有抑制宫颈癌HeLa细胞迁移的作用,其作用机制与抑制EGFR的表达有关。 相似文献
7.
肝素是一种常见的抗凝药,临床治疗和动物试验中发现肝素还具有抗肿瘤转移的作用,能显著提高肿瘤患者的生存率.在肝素多种抗肿瘤相关的生物活性中,竞争性抑制P选择素介导的肿瘤细胞的黏附作用最为关键,决定了肝素抗肿瘤转移能力的大小,这种与肝素的抗凝机制不同.通过对肝素分子基团进行化学修饰可以消除其副作用的危险,得到具有抗肿瘤转移活性的肝素衍生物. 相似文献
8.
目的:评价麝香接骨胶囊促进股骨颈骨折术后愈合的疗效.方法:将股骨颈骨折术后患者168例随机分成2组,分别服用麝香接骨胶囊和三七伤药片,观察2组病例骨折愈合时间,骨不连发生率.结果:麝香接骨胶囊组较三七伤药片组骨折愈合时间短、骨不连发生率低(P<0.05).结论:麝香接骨胶囊能促进股骨颈骨折术后的骨折愈合. 相似文献
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傣药研究开发的思路浅析 总被引:1,自引:1,他引:1
傣医药是我国边疆人民用以防治疾病的重要手段之一。傣族传统医药学的发展,应以傣药药性及傣医方剂探索研究带动傣医临床治疗技术研究,这是傣医药开发研究的重要环节,亦是傣药研究开发的基础。 相似文献
10.
目的研究西黄丸中具有抑制血管生成活性的组方药味.方法采用发育时间为24 h的血管荧光标记转基因斑马鱼胚胎作为模型,荧光显微镜下观察50μg/mL西黄丸甲醇提取物及其组方药味人工牛黄、人工麝香、乳香和没药甲醇提取物20 μg/mL给药24 h后对斑马鱼节间血管(Ⅳ)形成的影响.结果人工麝香、没药提取物对斑马鱼Ⅳ数量无影响,人工牛黄组Ⅳ数为22.67±2.60,抑制率为17.3%;乳香提取物组Ⅳ数分别为17.2±5.71,抑制率为37%;与对照组比较,人工牛黄、乳香提取物具有显著的抑制斑马鱼Ⅳ生成的作用(P<0.05或0.01).结论乳香与人工牛黄是西黄丸中具有抑制血管生成作用的主要药味. 相似文献