微小RNA-10b在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌组织和癌旁组织中微小RNA(miR)-10b的表达差异及其临床意义.方法 采用SYBR Green Ⅰ荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测78例胃癌患者手术切除癌组织及配对癌旁组织标本中miR-10b的表达水平.结果 miR-10b在胃癌组织中的相对表达水平(6.758±2.301)显著高于其在配对癌旁组织中的表达(8.516±1.870),差异有统计学意义(P＜0.01).胃癌组织中miR-10b的表达水平与临床TNM分期(P＜0.01)、肿瘤大小(P＜0.01)、淋巴结转移(P＜0.01)以及肿瘤浸润深度(P＜0.01)密切相关,而与年龄、性别、分化程度无明显相关(P＞0.05).结论 胃癌组织中miR-10b的高表达可能与胃癌的发生、发展、侵袭、转移相关.     

黄芩对大鼠体内甲苯磺丁脲药动学的影响

目的 研究黄芩对甲苯磺丁脲药动学的影响.方法 大鼠12只,雌雄各半,随机分为两组,生理盐水组(NS组)和黄芩组(HQ组).分别灌服生理盐水和等体积的黄芩水提物,0.5 h后灌胃给予甲苯磺丁脲50 mg/kg.采用HPLC-UV法检测甲苯磺丁脲及其代谢产物4-羟基甲苯磺丁脲的血浆浓度,计算药代动力学参数.结果 在雌性大鼠体内,NS组中甲苯磺丁脲及其代谢产物4-羟基甲苯磺丁脲的AUC0-t分别为(1 760±82)μg(mL·h)和(18±2)μg/(mL·h),HQ组中分别为(2 360±298)μg/(mL·h)和(25±4)μg/(mL·h),即给予黄芩后,甲苯磺丁脲的AUCo-t升高约34.1％(P＜0.05);而甲苯磺丁脲的t1/2以及AUC0-t(甲苯磺丁脲)/AUC0-t(4-羟基苯甲苯磺丁脲)比值,无论雌雄,NS组和HQ组间的差异无统计学意义.结论 黄芩可提高雌性大鼠体内甲苯磺丁脲的总体暴露水平.     

miR-4286与AEG-1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-4286、星形胶质细胞上调基因-1（AEG-1)在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与NSCLC临床病理特征的关系。方法分别采用原位杂交方法和免疫组织化学染色检测组织芯片中140例NSCLC癌组织及癌旁正常组织中miR-4286、AEG-1的表达,并分析两者表达水平与NSCLC临床病理特征的关系。结果NSCLC癌组织中miR-4286高表达率为62.14%,高于癌旁正常组织的4.29%,差异有统计学意义（P＜0.01）;NSCLC癌组织中AEG-1高表达率为55.71%,高于癌旁正常组织的7.86%,差异有统计学意义（P＜0.01）。miR-4286高表达与患者肿瘤直径大小、肿瘤TNM分期和淋巴结转移均有关（均P＜0.05）,AEG-1高表达与患者肿瘤TNM分期和淋巴结转移均有关（均P＜0.05）。Spearman等级相关分析显示NSCLC癌组织中miR-4286的表达与AEG-1的表达呈正相关（r=0.223,P=0.008）。结论NSCLC癌组织中miR-4286与AEG-1均高表达,miR-4286与AEG-1表达水平与TMN分期和淋巴结转移均有关,提示miR-4286和AEG-1可能参与NSCLC的发生、发展与转移。     

IGF-ⅠR信号通路在西妥昔单抗抗HepG2细胞增殖中的作用

目的探讨IGF-ⅠR信号通路在西妥昔单抗抗HepG2细胞增殖中的作用。方法选用浓度递增的西妥昔单抗(5～500)mg/mL、胰岛素样生长因子(IGF)(2.5～250)μmol/L及其抑制剂aIR3(2.5～250)μmol/L,单独或联合作用于HepG2细胞,观察IGF与aIR3对西妥昔单抗抗HepG2增殖的影响。结果细胞培养72 h后,单药西妥昔单抗对HepG2细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性,西妥昔单抗联合aIR3组增殖抑制率在相应浓度下均显著高于同浓度的西妥昔单抗组(均为P<0.01),IGF(10～250)μmol/L与西妥昔单抗(20～500)mg/mL联合组增殖抑制率均显著低于相应浓度的西妥昔单抗组(均为P<0.01)。结论 IGF-ⅠR通路可影响西妥昔单抗抗HepG2细胞增殖的作用,可能是肝癌细胞株对西妥昔单抗耐药的机制之一。     

中期因子在不同分子分型的乳腺癌中的表达及其临床意义

探讨在5种不同分子分型的乳腺癌中中期因子在组织中的表达,并分析其临床意义。采用免疫组化法检测203例乳腺癌组织的中期因子表达量;采用CD105抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。结果显示,中期因子与肿瘤的淋巴结转移、临床分期相关性密切。中期因子表达量高的样本具有较高的以CD105表征的微血管密度。与其他4种分子分型相比,中期因子和CD105在基底细胞样型的表达量最高,但是该差异不具有统计学意义。中期因子可以作为乳腺癌预后的标记物应用于临床诊断和治疗,与其他分子亚型的乳腺癌相比,基底细胞样型的乳腺癌可能并不具有独特的血管生成模式。     

湖州地区幽门螺杆菌对克拉霉素和左氧氟沙星的耐药情况及耐药基因突变位点分析

目的：研究湖州地区幽门螺杆菌（Hp）对克拉霉素和左氧氟沙星的耐药性及与相关基因突变的情况,为临床根除Hp提供依据。方法收集湖州市中心医院267例胃炎、胃溃疡及胃癌患者的胃黏膜样本,并成功分离136株Hp,采用平板掺入法检测Hp对克拉霉素和左氧氟沙星的耐药性;提取基因组DNA,采用基因芯片法针对23S rRNA V区（可变区）的2142位点和2143位点及gyrA基因QRDR区（含喹诺酮类耐药决定区）的87位点和91位点进行基因突变的检测。结果136株Hp中对克拉霉素和左氧氟沙星的耐药率分别为7.35%（10/136）和17.65%（24/136）;基因芯片结果检测出2143位点突变17例,2142位点未发生突变;同时也检测出gyrA基因突变27例,其中87位点突变25例,91位点突变2例。结论湖州地区Hp对克拉霉素耐药率不高,突变位点主要为2143位点,宜将克拉霉素继续作为一线药物使用;对左氧氟沙星耐药率高,gyrA基因突变的位点以87位点为主,建议临床用药依据药敏试验结果。     

黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液对HL-7702和HepG2细胞毒性研究

目的：研究黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液对HL-7702和HepG2细胞的毒性。方法：75%乙醇回流提取得黄药子提取物,高、中、低剂量作用于Caco-2细胞,以经Caco-2细胞的摄取物作用于HL-7702细胞和HepG2细胞,进行细胞活性实验,测定生化指标ALT、AST、GSH-PX和MDA值。结果：与对照组比,高剂量组和中剂量组黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液作用后,HL-7702细胞和HepG2细胞的存活率显著降低（P<0.01）;高剂量组黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液作用72 h后,HL-7702细胞上清液中ALT、AST显著升高（P<0.01）;高剂量组黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液作用48 h和72 h后, HepG2细胞上清液中ALT、AST显著升高（P<0.01）。高剂量组和中剂量组黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液作用48 h和72 h后,HL-7702细胞和HepG2细胞上清液中MDA显著升高,GSH-PX显著降低（P<0.01）。结论：黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液对HL-7702和HepG2细胞有毒性。     

中药肝毒性及配伍减毒研究进展

随着中药毒理学研究的不断深入,已发现多种中药具有肝毒性,如川楝子、黄药子、雷公藤、苍耳子等.通过合理的配伍,可达到增效减毒的效果.现代科学技术的发展有利于阐明中药肝毒性及配伍减毒的作用机理,从而使配伍用药具有合理性、科学性.     

桂枝汤类方化学成分含量研究

目的:建立HPLC法同时测定桂枝汤(桂枝、白芍、生姜、甘草和大枣)类方中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸含量的方法,并探索配伍对各成分含量的影响。方法:用SUPELCO Discovery C18柱,0.05%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长为230nm和254nm;测定桂枝汤、桂枝加桂汤和桂枝加芍药汤中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸的含量,不同配伍之间的差异采用SPSS软件进行方差分析。结果:建立了同时测定原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸含量的高效液相色谱法和相应的回归方程,与单味桂枝相比,三个类方中原儿茶酸含量增加、桂皮酸含量减少,桂枝汤和桂枝加桂汤中香豆素含量增加;与单味芍药相比,三个类方中芍药苷含量减少;与单味甘草相比,三个类方中甘草酸含量增加。结论:本方法专属、重复性好,可用于桂枝汤类方中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸的含量测定。不同配伍对各成分含量有影响,其影响非常复杂。     

药物生物等效性临床试验中方案偏离的分析与改进

目的 研究药物生物等效性临床试验实施中发生方案偏离的原因,并探讨解决对策,为提高临床试验质量提供依据。方法 以方案偏离的年度分布、发生率和类别为评价指标,分析造成方案偏离现象的原因,并提出解决对策。结果 2018年1月至2022年12月湖州市中心医院共开展生物等效性试验项目27个,发生方案偏离项目23个,共计229例次。发生方案偏离的类别主要为血样采集过程(59.40%)、违反试验流程(33.17%)和生物样本管理(7.43%)。结论 建议组建职业化的临床试验人才队伍,建立完善的质量管理体系;研究人员应持续学习和培训,严格遵循GCP原则及试验方案,减少方案偏离的发生。