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中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化 总被引:8,自引:0,他引:8
目的:获得原核表达的中国版纳猪SLAI类P1蛋白质分子。方法:PCR扩增去信号肽的SLAI类P1cDNA序列,亚克隆至pGEMT载体,测序。将亚克隆的P1 cDNA片段插入表达载体pET42b(+),构建重组表达质粒pET-42b(+)/sla-pl,转化E·coli表达菌 BL21-CodonPlus(DE3)-RIL,IPTG诱导 P1-8 x his融合蛋白表达,经包涵体洗涤,8 mol/L尿素变性溶解,Ni2+亲和层析,梯度透析后,定量保存。SDS-PAGE、western-blotting鉴定目的蛋白的表达与纯化。结果:目的蛋白(分子量39.5 kD)表达量占细菌总蛋白 15%,每升表达菌获得纯度95%的目的蛋白 40 mg~60mg。结论:成功建立猪 SLA分子全长原核表达、纯化体系,为建立间接识别猪移植抗原SLAI类分子的人T细胞系及表位分析打下基础。 相似文献
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碱性磷酸酶同工酶对原发性胆汁性肝硬化的诊断价值初探 总被引:2,自引:0,他引:2
目的初步探讨血清碱性磷酸酶(ALP)同工酶对原发性胆汁性肝硬化(PBC)的辅助诊断价值.方法用Sebia琼脂糖凝胶电泳分离30名正常人、23例PBC患者和25例其他肝胆疾病患者的血清ALP同工酶,经光密度扫描仪扫描后,分析各型同工酶的相对含量.结果血清ALP同工酶经电泳后可分为肝型、胆汁型、肠型和骨型4个区带.PBC患者的肝型ALP的相对含量最高,约为56%~70%,显著高于正常对照及乙肝后肝硬化患者(P<0.05),而其胆汁型ALP的相对含量显著低于肝外阻塞性黄疸患者(P<0.05).结论ALP同工酶分析可辅助诊断PBC. 相似文献
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目的 比较和确定Eurosteril一次性封装袋在高温高压和环氧乙烷灭菌后的无菌有效期。方法 将 96 0把11号刀片用一次性封装袋通过专用封口机 (Euroseal)进行标准包装。随机分成A和B两组 ,分别经高温高压和环氧乙烷灭菌后 ,定期抽样对刀片进行细菌培养。结果 高温高压组绝对无菌期为灭菌后 7周 ,环氧乙烷组为灭菌后8周。两组间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,高温高压总体灭菌效果优于环氧乙烷。结论 使用Eurosteril一次性封装袋在高温高压和环氧乙烷灭菌后均能达到至少 7周的无菌有效期 ,但高温高压总体灭菌效果稍优于环氧乙烷 相似文献
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目的 评价基因芯片技术在丙型肝炎病毒 (HCV)基因分型中的临床应用价值。方法 对HCVRNA阳性血清用基因芯片法和线性探针法进行基因分型。结果 基因芯片法和线性探针法的符合率是 10 0 %。结论 基因芯片法的准确率与国外第二代线性探针法试剂盒相同 ,而操作简单 ,特别是能准确地检出HCV混合感染 ,具有良好的应用前景。 相似文献
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目的评价UF-100细菌定量计数在尿路感染诊断中的价值.方法 226例病人的清洁中段尿标本分别做细菌培养、UF-100尿细菌计数和尿干化学试带检测.结果与中段尿培养相比,UF-100细菌数>8000个/μl时,诊断尿路感染的敏感度为63.08%,特异性为94.41%,阳性预示值为82%,阴性预示值为86.36%,准确度为85.40%.结论 UF-100能快速、直接的计数细菌,是尿路感染筛检的良好方法. 相似文献
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陈福祥 《上海交通大学学报(医学版)》1995,(4)
苦参总碱体外抗柯萨奇B病毒3型作用测定及其机理的初步研究陈福祥,等。中华实验和临床病毒学杂志1995;9(2):115先用酸水浸泡、氯仿萃取等处理提取苦参总碱,然后通过微量细胞培养法,病毒蛋白质Westernblot,分析了不同浓度苦参总碱对病毒增殖... 相似文献
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目的观察急性心肌梗死(AMI)患者溶栓治疗后凝血系统的变化.方法对临床确诊的34例AMI患者和33名正常对照者,采用ELISA法检测血浆凝血酶抗凝血酶复合物(TAT),对其中6名患者溶栓前、溶栓6 h及溶栓12 h血浆TAT进行动态观察并与正常对照组进行比较.结果 AMI患者的TAT[(13.10±6.70) μg/L]较正常对照组[(6.96±3.60) μg/L]显著升高(P<0.01).6例患者TAT在溶栓治疗前[(11.60±5.10) μg/L]较正常对照组显著升高.溶栓治疗6 h后,TAT[(15.10±7.60) μg/L]较治疗前均有显著升高.溶栓治疗12 h后,TAT[(13.75±5.80) μg/L]下降接近治疗前水平,但仍高于正常人.结论 AMI患者的凝血酶活力增加,溶栓治疗后,导致TAT短时间内进一步提高. 相似文献
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目的:观察中西医结合外治疗法治疗角化型手足癣的临床疗效。方法:将61例患者分为中西医结合治疗组(治疗组)41例,以中药浸泡结合0.25%盐酸阿莫罗芬乳膏外涂患处;西药治疗组(对照组)20例,仅用0.259/6盐酸阿莫罗芬乳膏外涂。观察5项主症及真菌学检查等指标。结果:治疗组愈显率为88.2%,对照组愈显率60.0%,两组愈显率比较差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:中西医结合外治疗法治疗角化型手足癣疗效明显优于单纯西药治疗。 相似文献
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中国猪种SLA-DR基因的克隆及序列分析 总被引:2,自引:1,他引:2
为探讨SLA DR基因结构及其在猪 人异种器官移植中的作用 ,本研究采用RT PCR扩增三个中国猪种SLA DRcDNA ,然后克隆入测序载体 ,进行双向测序 ,获得了具有完整阅读框架的三个结构和已有序列不同的新DRB等位基因 ,其长度为80 1个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 6 6个氨基酸残基 ;三个中国猪种DRA基因和已报告的NIH小型猪DRA基因结构相同 ,其长度均为 75 9个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 5 2个氨基酸残基。分析还揭示 ,(1)中国猪种SLA DR基因及其推导的氨基酸序列与人相应基因的同源性明显高于小鼠I E基因 ;(2 )中国猪DR分子 (DRα链和β链 )存在和人CD4分子相结合的HLA同源序列 ,但个别关键氨基酸残基发生改变 ,其改变幅度明显低于小鼠I E分子。人 猪MHC显示较高的同源性 ,在分子水平为人体T细胞同时采用直接和间接方式识别猪SLA这一免疫学现象提供了依据。 相似文献
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糖化血红蛋白对糖尿病的诊断价值 总被引:1,自引:0,他引:1
摘要:目的:探讨糖化血红蛋白(HbA1c)在糖尿病(DM)诊断中的应用价值。 方法:随机选择DM初筛患者535例,均行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),用高效液相色谱法检测HbA1c水平。根据OGTT结果把受试者分为糖耐量正常(NGT)组、血糖调节受损(IGR)组和糖尿病(DM)组,NGT组和IGR组并称为非糖尿病组(non-DM)。用ROC曲线分析HbA1c、空腹血糖(FPG)诊断DM及IGR的能力。 结果:DM组患者、FPG、餐后2 h血糖(2h PG)及HbA1c均显著高于其他组(P均<0.01);上述指标IGR组亦显著高于NGT组(P均<0.01)。DM组男性患者显著多于女性(P<0.01)。HbA1c 的cut off值为6.1%时,诊断DM的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.849,敏感性为79.1%,特异性为78.4%,与7.0 mmol/L FPG的诊断能力无显著性差异(P>0.05)。2者联合应用显著提高诊断能力,AUCROC=0.885,敏感性为75.0%,特异性为88.0%。以HbA1c 5.7%为cut-off值,诊断IGR(AUCV=0.66)能力显著低于FPG(AUCROC=0.787),P<0.01。 结论:HbA1c的cut off值为6.1%时可用于诊断DM,与7.0 mmol/L FPG 联合应用可增加诊断DM的能力,但5.7% HbA1c对IGR的筛查能力较弱,不及5.6 mmol/L FPG。 相似文献