采用Illumina测序技术检测非小细胞肺癌驱动基因关键位点突变

<正>肺癌尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)是许多国家常见且病死率位于首位的恶性肿瘤~([1])。目前认为NSCLC是由一系列驱动基因突变形成的恶性肿瘤,包括EGFR、ALK、KRAS、NRAS、BRAF、HER-2、ROS1、RET、MET和PIK3CA等基因。现阶段手术、化疗、放疗等治疗手段效果均不理想~([2]),针对以上10个基因突变的分子靶向治疗的出现给患者带来了新曙光,但前提是必须有精确的分子学信息,这就要求有合适的分子检测方法。Illumina测序技术已应用于多种常见肿瘤基因的检测,如乳腺癌、胰腺     

结直肠癌KRAS突变与临床病理特征的关系

目的检测结直肠患者KRAS的突变情况,分析KRAS突变与临床病理特征的关系。方法应用蝎形探针扩增阻滞突变系统(ARMS)荧光定量PCR技术,检测结直肠癌患者KRAS第12和13位密码子的突变情况并分析其与临床病理特征的关系。结果 1 207例结直肠癌KRAS突变率为42.92%(518/1 207)。第12号密码子6种突变类型,其中G12D突变率16.32%(197/1 207);G12V突变率10.36%(125/1 207);G12C突变率3.31%(40/1 207);G12S突变率2.40%(29/1 207);G12A突变率1.74%(21/1 207);G12R突变率0.58%(7/1 207)。第13号密码子G13D突变率为9.69%(117/1 207)。还检测出8种同时存在两种突变类型及一种同时存在3种突变类型。女性患者KRAS突变率(46.21%)高于男性(40.46%,P<0.05)。KRAS在右半结肠突变率(46.45%)和直肠突变率(44.50%)均高于左半结肠(37.50%,P<0.05)。结论结直肠癌KRAS突变有多种类型,并且多种突变类型可同时存在。女性患者突变率高于男性患者,右半结肠和直肠突变率均高于左半结肠。     

MMR蛋白免疫组化和微卫星不稳定性检测在Lynch综合征筛查中的研究

目的观察符合临床诊断标准的Lynch综合征患者MMR蛋白缺失和微卫星不稳定性(MSI)的情况,探讨免疫组化和MSI检测在筛选Lynch综合征中的临床指导意义。方法选取经过临床病史和病理诊断证实符合Amsterdam标准和Bethesda指南的结直肠癌26例为研究组,另取15例散发性结直肠癌为对照组,免疫组化方法检测4种MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)表达情况,同时行多重荧光PCR-毛细管电泳技术进行MSI检测。结果 MMR蛋白在研究组中表达缺失率为88.5%(23/26);15例散发性结直肠癌中未发现MMR蛋白缺失;MSI在研究组中检测到MSI-H 24例,MSS 2例,15例散发性结直肠癌中检测到MSI-H 1例,MSI-L 3例,MSS 11例。结论应用免疫组化和MSI检测都可以筛查Lynch综合征。免疫组化检测筛查敏感性和特异性较强,并且能有效的检测出突变蛋白的类型,使用方法简便、经济、快捷并且相对稳定,可以广泛应用于临床。     

胃肠道间质瘤靶向药物治疗相关基因突变临床分析

目的 探讨靶向药物治疗相关基因(C-KIT和PDGFRA)在治疗胃肠道间质瘤中的作用。方法 收集福建省立医院确诊的胃肠道间质瘤240例,采用Sanger测序法检测基因突变情况(C-KIT基因9、11、13、17、18号外显子,PDGFRA基因12、18号外显子),分析其与临床特征的关系。结果 1)C-KIT基因突变率为79.2%,其11、9及13号外显子的突变率分别为80.5%、10%、4.2%,11号外显子以缺失突变及点突变多见。2)PDGFRA基因突变率为6.7%,其18号外显子突变率93.75%,D842V点突变多见。3)C-KIT基因11号外显子突变在胃部发生率高,以中高危级别多见,组织学以梭形细胞型多见。PDGFRA基因18号外显子突变在胃部发生率高,以极低危、低危级别多见,组织学以上皮细胞型为主。结论 胃肠道间质瘤患者发生C-KIT/PDGFRA基因突变的频率很高,突变位点及形式多样,建议临床治疗前进行C-KIT/PDGFRA基因联合检测,为靶向药物治疗提供依据。     

心肌酶谱、高敏肌钙蛋白在小儿手足口并发心肌炎的诊断

目的探讨心肌酶谱、高敏肌钙蛋白(hs-cTnl)在小儿手足口并发心肌炎的诊断意义。方法将我院2016年1月～2018年6月收治的124例小儿手足口病作为研究对象,其中62例为并发心肌炎患儿,62例为未并发心肌炎患儿。对患者均进行心肌酶谱、高敏肌钙蛋白检测。比较两组患儿心肌酶谱、高敏肌钙蛋白水平间的差异与异常率。结果手足口病并发心肌炎组患者hs-cTnl[(426.9±32.6)pg/mL]、CK[(321.5±32.9)U/L]、AST[(65.2±7.3)U/L]、LDH[(187.3±43.8)U/L]水平显著高于手足口病未并发心肌炎hs-c Tnl[(89.6±23.8)pg/m L]、CK[(123.7±15.0)U/L]、AST[(21.6±3.9)U/L]、LDH[(90.6±21.9)U/L],比较差异有统计学意义(P 0.05);手足口病并发心肌炎组在hs-cTnl(67.74%)、CK(62.90%)、AST(64.52%)、LDH(66.13%)异常率上均比手足口病未并发心肌炎组高(P 0.05)。结论心肌酶谱、高敏肌钙蛋白在小儿手足口并发心肌炎具有较高的诊断价值,有利于指导疾病诊断及治疗,值得临床选择。     

甲状腺乳头状癌MC蛋白表达和BRAF (V600E)突变检测分析

目的 通过甲状腺乳头状癌间皮表面微绒毛抗原(MC蛋白)表达和BRAF (V600E)基因突变的分析,探讨MC蛋白表达和BRAF (V600E)突变在甲状腺乳头状癌中的意义.方法 对452例甲状腺乳头状癌,采用免疫组织化学技术检测MC表达情况,荧光PCR检测BRAF基因突变,并进行比较分析.结果 免疫组织化学染色显示MC阳性率91.8％,荧光PCR检测BRAF基因突变率为85.0％,免疫组织化学染色和荧光PCR两法检测结果阳性率的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 MC蛋白的表达和BRAF (V600E)的突变为甲状腺乳头状癌的诊断提供依据,联合MC蛋白表达和BRAF (V600E)突变检测可提高甲状腺乳头状癌诊断的阳性率.