PCR扩增rRNA基因在细菌菌种鉴定中的应用

PCR技术以其快速及准确的优点已广泛应用于微生物检测与菌种鉴定中。本文重点从16SrRNA序列、16S—23S rRNA间隔序列、5S rRNA序列及tRNA基因序列扩增四个方面介绍了近年来PCR技术在细菌菌种鉴定中的应用。     

不同来源的N-乙酰神经氨酸裂合酶的特性及在大肠埃希菌中的表达

综述了N-乙酰神经氨酸裂合酶的特性、应用及反应机理，对不同来源的N-乙酰神经氨酸裂合酶进行了比较。简要阐述N-乙酰神经氨酸裂合酶在大肠埃希菌中的克隆表达及其纯化。     

巨噬细胞泡沫化抑制剂的研究进展

胆固醇酯蓄积的巨噬细胞(泡沫细胞)是早期动脉粥样硬化斑块的主要组成和特征。它通过其细胞表面的多种受体无限制地摄取氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)颗粒及其他配体,结果在巨噬细胞内有大量的胆固醇酯和三酰甘油蓄积,使巨噬细胞发展成为泡沫细胞。因此,通过各种途径抑制这种在巨噬细胞的过量脂质蓄积,可以起到预防和治疗动脉粥样硬化的作用。     

细菌对MLS类和糖肽类抗生素产生耐药性的作用机制

MLS类和糖肽类抗生素在人类与细菌感染性疾病的对抗中发挥着重要作用.与其他抗生素一样,随着这些抗生素的临床使用,细菌耐药性的出现和不断发展给人们带来新的挑战.本综述对这两类抗生素的细菌耐药性产生机制进行了剖析,并就已开发的若干个新型MLS类和糖肽类抗生素作了介绍.     

传染病背后的科学——从“N个第一”的诞生到传染病的防治

现今世界上发达国家的人均寿命已经超过80岁,然而19世纪以前,人类的平均寿命仅有30~40岁,传染性疾病是当时占据首位的死亡原因。一个多世纪以来,人类寿命和健康水平的提高,得益于疫苗和药物的诞生,而在发现和发明这些具有里程碑式的“灵丹妙药”背后,是一场科学的革命。本文对从巴斯德革命性科学“微小生命体理论”的提出,到“细菌致病理论”的建立,到由此诞生的N个控制传染病的“灵丹妙药”发现和发明,进行了比较全面的文献梳理和阐述。旨在让读者在“身临其境”的COVID-19传染病大流行期间,能够重温一下在抗击“瘟疫”的历史长河中诞生的革命性的科学和伟大的科学家,并致敬各行各业为抗击疫情而努力的人们。     

鼠疫防治进程中的重大科学发现

鼠疫是在历史进程中对人类影响最大的一种“瘟疫”,它是由鼠疫耶尔森菌引起的一种自然疫源性传染病,啮齿类动物是病原菌的天然宿主,鼠蚤是传播媒介。本文从3次鼠疫大流行、鼠疫致病元凶的发现和进化、传播途径和致病机制、鼠疫的诊断和防治以及背后的科学发现进行概述,为我们应对新型传染病提供一些启发。     

全球抗菌药研发背景概况及对加快我国抗菌药研发的思考

本文简要介绍了当今全球新抗菌药的研究与开发概况,提出了对加快我国抗菌药研发的几点思考:①提升现有重要抗菌药产品质量,加强"高难度非专利药品种"的开发;②抓紧专利即将到期的重要抗菌药品种的开发;③研发和储备国外处于不同临床试验阶段的重要抗菌药品种;④加快抗耐药菌创新药物的开发步伐;⑤利用"举国机制"建立一支相对稳定的抗耐药菌创新药物研发队伍。     

高纯度庆大霉素C1a游离碱制备工艺研究

目的 探索用大孔吸附树脂层析法及盐析结晶法精制纯化硫酸依替米星起始物料-庆大霉素C1a成品(HPLC纯度91%~93%),从而减少由起始物料引入依替米星杂质的水平。方法 以庆大霉素C1a吸附量和庆大霉素C1a纯度为指标,考察大孔吸附树脂纯化庆大霉素C1a的吸附性能和洗脱参数;以盐析后庆大霉素C1a样品纯度和盐析收率为指标,考察盐析工艺最佳温度、溶剂、酸的添加量及酸的种类。结果 获得较优的树脂NM200,获得较优的解析液pH值为2.0和流速0.5BV/h。经过优化后,纯化收率从65%提高至74%。通过盐析结晶条件筛选和优化,确定室温先加溶剂后加硫酸(pH6.5)和甲醇与乙醇1:2的条件较优,优化后获得的庆大霉素C1a纯度达到98.2%,收率大于93%。研究了多种无机酸盐析结晶的情况,发现磷酸、硫酸和碳酸条件下能析出白色固体。结论 通过比较大孔吸附树脂和盐析结晶的纯化连接,组合纯化后获得的庆大霉素C1a游离碱纯度大于99.0%,比纯化前样品提高6%以上,收率大于70%。     

RPL31-siRNA对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用

目的:研究siRNA沉默糖体蛋白L31(ribosomal protein L31,RPL31)对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,探讨RPL31基因在胰腺癌中可能的作用机制.方法:设计合成靶向人RPL31基因的siRNA及阴性对照siRNA;建立人胰腺癌BxPC-3细胞的Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,按照移植瘤体积随机化分为3组:溶剂对照组、阴性对照组及RPL31-siRNA干预组;使用RNAi-Mate转染试剂将RPL31-siRNA进行移植瘤瘤内注射,观察各组裸鼠体内瘤体生长速度,绘制肿瘤生长曲线;采用实时定量PCR及Western blot的方法检测移植瘤组织RPL31基因的表达;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测裸鼠皮下移植瘤Ki-67及CD31的表达;原位末端标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果:与溶剂对照组和阴性对照组相比,RPL31-siRNA注射组裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,移植瘤体积明显缩小,差异具有统计学意义(P<0.05);移植瘤组织中RPL31基因的mRNA水平和蛋白水平表达下调;另外,RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤中Ki-67表达下调(55.78%±4.63%、51.37%±5.05%vs11.08%±1.31%),CD31的表达下调(56.53%±6.03%、44.84%±5.24%vs9.67%±1.39%);RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤细胞凋亡增加(2.92%±0.54%、3.85%±0.87%vs39.58%±4.02%).结论:RPL31-siRNA可以下调胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤中RPL31基因的表达,抑制移植瘤的生长,并且还可以抑制移植瘤中Ki-67及CD31的表达,诱导移植瘤细胞的凋亡.以RPL31为靶点的基因治疗有潜在临床应用前景.     

博来霉素A2和B2的HPLC测定

建立了HPLC法测定博来霉素A_2和B_2。采用C_(18)柱,以硫酸钾缓冲液和乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为254nm。博来霉素A_2和B_2均在0.05～2mg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率为99.1%和107.2%,RSD为0.96%和1.58%。