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重组人内皮抑素的表达、纯化、复性方法研究 总被引:3,自引:1,他引:3
[目的]摸索重组人内皮抑素(recombinanthumanendostatin,rhES)的最佳生产工艺路线,解决rhES在大肠杆菌中表达提取的蛋白变性问题。[方法](1)按所优化的条件进行rhES的表达,包涵体的提取、洗涤、变性、复性。(2)活性检测:观察rhES对裸鼠皮下移植瘤生长情况及病理组织学的影响。[结果](1)每升培养基可得可溶性rhES蛋白10.55mg,rhES在大肠杆菌中的表达量超过总菌体蛋白的60%,纯化后的蛋白纯度超过95%。(2)动物实验:rhES抑瘤效果显著,抑瘤率为45.86%,实验组与对照组在肿瘤体积、重量、裸鼠除瘤净重、瘤重/鼠净重4个指标上均有显著性差异(P<0.01)。光镜见实验组微血管密度降低,坏死面积增加,电镜见实验组凋亡细胞增加。[结论]本实验所优化的生产工艺路线可获得可溶性的、高纯度、高活性的rhES蛋白,解决了rhES在大肠杆菌中提取时的蛋白变性问题。 相似文献
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Toll样受体信号通路与冠心病关系的生物信息学分析 总被引:4,自引:0,他引:4
背景 冠心病严重威胁着中老年人的健康,在其发生、发展以及预后过程中炎症和免疫反应起着非常重要的作用。而Toll样受体(TLRs)能够介导天然免疫和获得性免疫反应,已有研究表明TLR2和TLR4信号通路与冠心病关系密切,但整个TLRs信号通路及其他亚型与冠心病的关系还有待进一步研究。目的 研究TLRs信号通路及其亚型与冠心病的关系,以利于深入研究TLRs信号通路与冠心病的关系,发现新的冠心病相关蛋白,为研发治疗冠心病的药物提供新的候选靶点。方法 2016年3月—2018年2月,基于GO数据库,利用语义相似性方法进行基因集合间功能的一致性分析,获得TLRs信号通路与冠心病的关系。利用蛋白互作网分析待测蛋白质的功能,根据与待测蛋白质互作的已知冠心病相关蛋白的数目,确定TLRs各亚型与冠心病的关系。结果 京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库的7类系统信号通路中,免疫系统信号通路的相似性得分最高。TLRs信号通路基因集合与冠心病基因集合功能相似性得分高于随机情况下两个基因集合的功能相似性得分(P<0.05)。14条免疫系统的信号通路中,TLRs信号通路的功能相似性得分最高。通过蛋白互作网的分析,发现除已知的TLR2、TLR4外,TLR10也与冠心病相关蛋白互作密切。结论 TLRs信号通路与冠心病关系密切,而TLRs家族可能是冠心病防治的新靶点,其中TLR10可能是新的冠心病相关蛋白。 相似文献
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目的:通过对干扰素软膏稳定性的考察,决定其有效期。方法:在不同温度和时间下,取样检测其活性的变化。结论:通过检测结果确定干扰素软膏在不同温度条件下贮存的有效期。 相似文献
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