癌胚抗原启动子控制基因靶向表达研究

目的 构建由癌胚抗原(CEA)启动子控制报道基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达的重组表达质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP.了解CEA启动子靶向驱动的含目的基因的重组质粒的效率.方法 构建重组质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP,以PCR,DNA测序及酶切进行鉴定.通过脂质体介导重组质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP体外分别转染A549细胞(CEA阳性)和16HBE(CEA阴性)细胞,进行绿色荧光蛋白检测分析基因表达的靶向性.结果 CMVE-pCEA-IRES-EGFP分别用VSP Ⅰ,VSP Ⅰ/Nhe Ⅰ酶切后电泳分别出现大小约405 bp,372 bp和4110 bp的片断,与预计各片断大小相符.以CMVE-pCEA-IRES-EGFP为模板PCR扩增得到CMV和CEA片段,分别连于T载体(pMD18-T)并测序,结果正确.嵌合启动子CMVE-pCEA能特异地驱动下游报告基因在CEA阳性肺癌细胞株绿色荧光表达阳性,而CEA阴性细胞株16HBE表达阴性.结论 成功构建了嵌合启动子CMVE-pCEA驱动的CMVE-pCEA-IRES-EGFP重组质粒,并能在转染的CEA阳性细胞株中表达,为靶向启动双基因表达载体构件提供了实验依据.     

短发夹RNA沉默促肝细胞再生磷酸酶-3基因表达对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭能力的影响

目的构建以促肝细胞再生磷酸酶-3（PRL-3）为靶基因的短发夹状小干扰RNA（short hairpin RNA,shRNA）表达载体,并探讨PRL-3-shRNA表达载体对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法 构建PRL-3基因特异性shRNA表达载体,使用脂质体法将PRL-3-shRNA表达载体转染入MCF-7细胞。采用Real-ti me PCR和Western blot分别检测转染后MCF-7细胞中PRL-3基因mRNA和蛋白的表达;运用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测转染后MCF-7细胞的增殖水平,用流式细胞仪检测细胞凋亡的情况;采用Transwell小室法检测细胞侵袭力变化。计量资料采用单因素方差分析或重复测量方差分析。结果 酶切鉴定和测序分析证实PRL-3-shRNA表达载体成功构建。转染成功后,shRNA-1~3组PRL-3基因mRNA表达分别为（0.31±0.27）、（0.15±0.14）和（0.31±0.03）,与空白组和阴性组（1.00±0.00、0.98±0.18）相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。PRL-3-shRNA-2组PRL-3蛋白的表达量明显低于阴性组和空白组（0.50±0.02比0.91±0.03和0.89±0.02,P〈0.05）;PRL-3-shRNA-2转染入MCF-7细胞后能明显降低其增殖水平（P〈0.05）;PRL-3-shRNA-2组凋亡率明显高于空白组和阴性组[（8.37±1.85）%比（1.60±1.58）%和（0.16±0.05）%,P〈0.05];Transwell小室侵袭实验显示,PRL-3-shRNA-2组穿膜细胞数明显低于阴性组和空白组（P〈0.05）。结论 沉默PRL-3基因表达可抑制MCF-7细胞的增殖,促进凋亡,抑制其侵袭能力     

从VATS手术探讨基层医院肺癌外科治疗的发展

目的:探讨基层医院肺癌外科治疗的发展.方法:回顾性分析我院5年来开展的影像辅助的小切口直视(VATS)肺叶切除+纵隔淋巴结清扫治疗肺癌52例患者的病例资料,其中,男31例,女21例.结果:全组病例均治愈出院,无死亡.术后并发症,肺不张2例,肺部感染3例.Ⅰ期26例,Ⅱ期21例,Ⅲa期5例.全部患者创口Ⅰ期愈合出院.结论:VATS肺癌手术能为基层医院开展全腔镜肺叶手术打下良好的技术基础,但传统开胸手术技巧仍是手术安全的重要保障,我们不应该盲目地追随手术潮流,而更应该加强传统开胸手术训练,在一定的技术成熟基础上逐步开始腔镜手术训练,熟练完成影像辅助的小切口直视手术后,有选择性地过渡到全腔镜肺癌手术.     

从清扫淋巴结角度看胸腔镜辅助手术在肺癌治疗中的应用

背景与目的：电视胸腔镜辅助小切口作为一种微创手术径路,其能否完成标准肺癌根治术一直是胸科医师争论的焦点。本研究从清扫淋巴结角度探讨传统切口与电视胸腔镜辅助小切口在肺癌根治术中的应用。方法：选取2001年1月—2005年12月的549例肺癌患者,所选病例均行电视胸腔镜辅助小切口肺癌根治术,统计各病例术后胸内清扫淋巴结数,并计算各组淋巴结的清扫数目、平均每例淋巴结清除数等。收集有关系统胸内淋巴结清扫、胸腔镜辅助肺叶或（左或右）全肺切除等资料,进行淋巴结清扫对比研究。结果：549例共清扫淋巴结7360个,平均每例清扫淋巴结数13．41个,与传统切口开胸清扫淋巴结数对比,差异无显著性。结论：电视胸腔镜辅助小切口可以完成同质量的系统性胸内淋巴结清扫．并能规范的完成肺痛根治术。     

L形覆膜气管支架治疗支气管胸膜瘘

目的初步探讨L型覆膜气管支架治疗肺切除术后支气管胸膜瘘的可行性。方法应用覆膜气管支架治疗左、右全肺或者左、右上肺叶切除术后支气管胸膜瘘6例。结果术后5例经胸腔冲洗而痊愈,随访6个月无复发并成功取出支架,1例无效,术后仍有持续胸管漏气、咳黄脓痰取出支架,终生带管生存。结论覆膜气管支架为全肺或者上肺叶切除术后支气管胸膜瘘治疗提供了一个安全、有效的方法。     

胸腔镜辅助肺叶切除术206例

目的探讨胸腔镜辅助肺叶切除术的临床应用。方法回顾性分析本院2003年3月～2012年5月开展的胸腔镜辅助肺叶切除术206例病例资料,其中,男126例,女80例。其中全胸腔镜肺叶切除术35例。结果全组患者均治愈出院,无严重并发症及围术期死亡,术中出血量60～500mL,仅2例术中输血。术后并发症：肺不张8例,心律失常5例。结论胸腔镜辅助肺叶切除是一种安全、微创的手术,并利用胸腔镜辅助小切口直视手术为基础操作,逐步过渡到全胸腔镜肺叶切除术。     

医疗机构与非医疗机构中青年职工的心血管疾病危险因素分析

目的探讨医疗机构与非医疗机构中青年职工的心血管疾病危险因素差异。方法回顾性分析2016年—2017年中南大学湘雅三医院健康体检的职工979例作为医疗机构职工组,以及非医疗行业来该院体检群众51 069例作为非医疗机构职工组。基于年龄、性别对两组人群进行1∶1倾向性评分匹配,匹配后每组979例。比较倾向性评分匹配后两组的危险因素、心血管病检出率差异及影响因素。结果两组性别、年龄、文化程度、空腹血糖、TG、HDL比较,差异无统计学意义（P>0.05）。两组SBP、DBP、吸烟、饮酒、缺乏体育运动、TC、LDL比较,差异有统计学意义（P<0.05）。两组肥胖、糖尿病、血脂异常、高尿酸血症率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。医疗机构组高血压率低于非医疗机构组（P<0.05）。多因素Logistic一般回归分析显示：饮酒■是非医疗机构职工高血压患病的危险因素（P<0.05）。结论医疗机构中青年职工的心血管疾病危险因素十分突出,故此强化医疗机构中青年职工健康意识与职工健康文化建设十分必要。     

电视胸腔镜肺癌手术治疗中若干问题探讨

目的探讨胸腔镜肺癌手术治疗患者选择、手术技巧及术后康复治疗等若干问题。方法回顾性分析我院肺癌手术中辅助小切口腔镜手术70例及全腔镜手术16例的病例资料。结果全组病例均治愈出院,无围手术期死亡。中转开胸率5.5%。术后并发症：肺部感染5例,肺不张4例,心律失常2例。病理报告鳞癌48例,腺癌35例,支气管肺泡细胞癌3例。全部患者创口I期愈合。结论胸腔镜肺癌切除术在开展初期病例选择采用TN评分分级评判对保障手术安全具有实际指导意义;术中良好的技术彻底清扫肺门纵隔淋巴结是手术成功的重要保障;采用助拉带康复操协助VATS患者FTS操作性强,效果好。     

电视胸腔镜治疗自发性血气胸52例分析

目的：探讨如何运用电视胸腔镜治疗自发性血气胸。方法：回顾性分析本科1998年9月～2009年12月共开展胸腔镜治疗自发性血气胸52例的资料。结果：全部患者无术中及术后死亡、大出血、感染。20例随访2年,10例随访1年无复发,1例中转开胸。结论：胸腔镜治疗自发性血气胸效果良好。