中性粒细胞弹性蛋白酶的过表达促进K562细胞增殖并抑制其凋亡

目的利用Ad Easy系统构建携带人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)基因的重组腺病毒表达质粒,并感染K562细胞,观察其对K562细胞增殖和凋亡的影响。方法以急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株HL-60的RNA为模板,经反转录PCR得到NE基因的编码区并克隆入穿梭载体p Ad Track-CMV,得到p Ad-NE,经HindⅢ、EcoRⅤ酶切鉴定和测序正确后,将其转化入p Ad Easy-1-BJ5183进行同源重组,得到重组子Ad-NE,经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞进行包装。14 d之后收获原代病毒,经5轮扩增后,测定病毒滴度,进行PCR鉴定。感染K562细胞后,荧光显微镜初步观察感染效率,同时用流式细胞术检测感染效率;Western blot法进一步鉴定NE是否表达上调;CCK-8法测定细胞增殖情况;流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期变化。结果酶切鉴定及测序结果表明重组穿梭质粒p Ad-NE构建成功;酶切鉴定显示同源重组成功,得到重组子Ad-NE;荧光显微镜表明病毒包装成功;经过5轮扩增后,病毒滴度达到1.64×1012pfu/m L;感染K562细胞后,荧光显微镜观察感染效率达80%左右;Western blot法检测到NE表达上调;CCK-8实验显示NE表达上调后K562细胞增殖能力增强;流式细胞术显示S期细胞明显增多并且细胞凋亡减少。结论过表达NE可促进K562细胞增殖并抑制其凋亡。     

军事训练伤中医药防治策略探讨

为更好地做好军事斗争的准备，近年来部队加强了军事训练，随着训练强度的加大，军事训练伤（military training injuries，MTI）的发生率呈现上升趋势，对官兵的身体健康及部队战斗力造成很大的影响。目前，我军军训伤防范研究已经取得可喜成绩，但与一些发达国家相比，无论在研究的深度和广度以及经费投入、人才培养上都存在不小的差距，因此，根据国家对军队的要求，要加强MTI的防范措施研究。     

地塞米松衍生物对K562细胞增殖的抑制作用及机制

目的：研究地塞米松衍生物对K562细胞的增殖抑制作用，并对其作用机制进行初步的探讨。方法：以地塞米松为原料合成并纯化得到新的衍生物。用不同浓度的地塞米松衍生物对K562细胞进行处理，通过MTT比色法检测细胞增殖抑制率，电镜法观察细胞凋亡的形态学变化，免疫细胞化学法测定细胞Bcl-2，Fas表达，比色法检测Caspase-3的活性变化。结果：地基米松衍生物能抑制K562细胞的增殖，使Bcl-2表达降低，Fas表达上调，Caspase-3活性增强，诱导K562细胞凋亡。结论：地塞米松衍生物可能通过诱导K562细胞凋亡而抑制细胞增殖。其诱导细胞凋亡的机制可能与抑制Bcl-2蛋白的表达，上调Fas受体，进而激活细胞内的Caspase-3有关。     

下肢静脉血栓致肺梗塞误诊1例

病例男性，37岁，飞行员，汉族，已婚，因“右下肢疼痛1个月，咳嗽咳痰伴胸痛2d”入院。入院前1个月患者无明显诱因先后出现右小腿内侧持续性胀痛、右侧腘窝及右大腿内侧痛，无红肿，在我院骨科检查右膝关节、骨盆及双侧髋关节拍片未见异常X征象，右膝MRI平扫未见异常，B超肝胆胰脾肾膀胱输尿管未见异常，诊断为“右下肢肌筋膜炎”。予“丁胺卡那霉素、左氧氟沙星、替硝唑”抗炎，辅以TDP治疗15d后疼痛缓解出院；此次入院前2d，患者起床时突感胸部不适，咳嗽，咳白粘痰，痰中带血丝，继之感左胸痛，呼吸时加重，     

大黄素诱导白血病K562细胞凋亡的实验研究

目的:探讨大黄素对人白血病K562细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用.方法:采用MTT法检测大黄素对K562细胞的增殖抑制作用;通过Wight-Giemsa染色(W-G染色),在普通光镜下观察细胞的形态学变化;运用Annexin V/PI双标记法检测大黄素对K562细胞的凋亡效应;采用流式细胞技术检测细胞周期变化与凋亡情况;通过比色法检测Caspase-3、8、9的相对活性,分析大黄素诱导K562细胞凋亡的信号途径.结果:大黄素能显著抑制K562细胞的增殖,作用24、48、72 h后的半数抑制率浓度分别为80、50、40 μmol/L;处理组细胞在普通光镜下可见典型的凋亡形态学改变;Annexin V/PI双标记法检测到K562细胞在大黄索的诱导下出现早期凋亡并呈剂量依赖性(P<0.01);流式细胞仪结果分析发现,处理组的K562细胞被阻滞于G0/G1期,与对照组相比,凋亡率明显升高并呈现剂量依赖性(P<0.01);大黄素可触发caspase-3、8、9的活性增高(P<0.01).结论:大黄素能有效地抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制和Caspase信号途径的活化有关.     

微量元素锌,铜,锰与冠心病

随着微量元素检测技术的不断提高，现已证实微量元素与身体健康关系密切，尤其是与心血管疾病。人体的老化有非常密切的关系【l。。现将本院对周例冠心病患者及48例正常对照组测定微量元素的含量报道如下。1研究对象和方法1．1研究对象：按世界卫生组织1979年公布冠心病（CH）、急性心肌梗塞（AMI）的诊断标准。①CHD组：81例（AMI13例，7例在发病后M小时内及恢复期各测定一次）。男44例，女对例，年龄46～80岁，平均年龄sl岁，按年龄分成A、B组。A组共39人，年龄46－0岁（男16例，女对例），B组共42人，年龄均60岁以上（男28例，女1…     

ATRA诱导SP100蛋白表达及其对白血病NB4细胞增殖的影响

目的探讨SP100蛋白在全反式维甲酸(ATRA)作用NB4细胞过程中的表达及其对NB4细胞增殖和周期的影响。方法实时定量PCR检测SP100 mRNA的表达;Western blot检测SP100蛋白的表达;免疫荧光检测SP100的定位;CCK-8检测NB4细胞的增殖;流式细胞术检测NB4细胞的周期。结果 ATRA能明显促进NB4细胞中SP100mRNA水平和蛋白水平,并将SP100由弥散的小点状转变为较大的斑块状;感染SP100-shRNA的NB4细胞增殖活力明显高于未感染组和病毒空载组(P0.05),并使G2/M期的细胞增多。结论 ATRA促进NB4细胞中SP100蛋白的表达,SP100蛋白可能参与NB4细胞增殖活力的调节。     

中医治未病理念在军事飞行人员颈椎病防治中的应用

军事飞行人员由于职业、飞行环境、工作条件等多种特殊因素的影响,颈椎病已成为其常见病之一,并对飞行工作产生显著影响.为此,在分析军事飞行人员颈椎病现状及致病因素的基础上,运用中医治未病理念于军事飞行员颈椎病的防治,并讨论了其防治意义及具体防治措施,拟为降低飞行因素所致颈椎病发生率、保护军事飞行人员的身心健康,保障飞行安全提供依据.     

HA-2FKBP-ABD融合蛋白的原核表达及与BCR-ABL的相互作用

摘要：目的：构建经原核表达和纯化的HA-2FKBP-ABD（HF-2A）融合蛋白,探讨HF-2A对BCR-ABL的靶向作用。 方法：用PCR扩增HF-2A片段,将HF-2A克隆入pET32a（+）原核表达载体,IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化HF-2A蛋白,SDS-PAGE分析诱导和纯化的条件,western blot鉴定HF-2A蛋白的表达,pull down实验检测HF-2A与BCR-ABL的相互作用。 结果：重组原核表达载体经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确;0.1 mmol/L IPTG 25 ℃诱导4 h获得HF-2A蛋白的高表达,其分子量（Mr)约为74 000,纯化后可获得高纯度的HF-2A蛋白;HF-2A与BCR-ABL能相互作用。 结论：成功表达并纯化了HF-2A融合蛋白,HF-2A能够靶向作用BCR-ABL。