细菌耐药性监测数据处理软件WHONET 5.3简介

随着计算机技术的进步，药物敏感试验结果的收集，保存和处理也越来越多地依赖于计算机软件。WHONET软件就是这样一种软件，它能将各个实验室的数据文件采用通用的编码和文件格式，有利于各临床实验室分析、监控和处理当地的耐药性监测资料并把这些信息整合到全国或者全球的耐药性监测数据文件中，促进资源的共享，这是目前世界卫生组织推荐用于细菌耐药性监测的软件，能够满足美国临床实验室标准化委员会制定有关软件的要求。     

应用WHONET5软件进行细菌耐药性监测数据的质量控制

随着细菌耐药性监测范围的扩大,监测工具软件的应用,电子数据文件数据库逐年增多,其质量有待于进一步加强.世界卫生组织推荐的用于数据库管理的WHONET工具软件具有非常强大的数据分析功能可用于数据库文件的质量控制.笔者探讨了常规监测数据中存在的质量问题,详细介绍了软件在即时控制中的具体应用方法,希望能对从事细菌耐药性监测相关工作提供有益的借鉴.     

大肠埃希菌中氟喹诺酮耐药机制功能分析

目的 分析拓扑异构酶的突变和外排泵系统在大肠埃希菌(Escherichia coli)氟喹诺酮类药物耐药机制中的作用.方法 本研究通过基因重组技术对大肠埃希菌中拓扑异构酶不同点突变的功能进行了准确测定,同时也对大肠埃希菌中不同外排泵及膜蛋白的功能进行了分析.结果 在不同的菌株中,acrAB或tolC的切除所引起细菌耐药性的变化不同.对拓扑异构酶点突变的功能分析显示,gyrA中的点突变(S83和D87)在喹诺酮耐药机制中起主要作用,没有gyrA上的点突变,parC上的点突变(S80和A108)对细菌的耐药性不产生影响,但单独gyrA上的点突变(S83和D87)也仅导致敏感菌株对萘啶酸耐药,而对其他氟喹诺酮类药物仍表现为敏感.当对喹诺酮敏感的大肠埃希菌K-12同时具备gyrA(S83L和D87N)和parC(S801和A108V)上的点突变后,重组菌株对氟喹诺酮会自然产生耐药性,而并不需要过度表达的外排泵.结论 拓扑异构酶的突变在大肠埃希菌氟喹诺酮药物的耐药机制中起主要作用,对氟喹诺酮药物耐药的菌株通常应同时具备gyrA和parC上的点突变.     

抗青霉素单克隆抗体的制备及初步应用

目的:制备抗青霉素的单克隆抗体(mAb)并建立双抗体夹心ELISA检测方法,对临床上引起青霉素过敏反应的过敏原青霉噻唑蛋白进行研究。方法:将半抗原青霉素和载体蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术建立稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株。常规制备腹水,用辛酸-硫酸铵法纯化,并对纯化的mAb进行特异性鉴定。通过对不同抗体组合的分析和条件的优化,建立检测过敏原的双抗体夹心ELISA方法。结果:经细胞融合、筛选及克隆化,共获得9株稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株,其中5株亲和力较高。建立了双抗体夹心ELISA相对定量检测方法,该方法灵敏度达到870 U/L,平均回收率为107.81%,批内变异系数平均为6.7%,批间变异系数平均为9.3%,可用于A群链球菌制剂中青霉噻唑蛋白的检测。结论:成功地制备了抗青霉素的mAb,并建立了相对定量检测青霉噻唑蛋白的双抗体夹心ELISA法。     

美国食品药品监督管理局修订有关人用抗生素类药品说明书的新规定

20 0 0年 9月 1 9日美国食品药品监督管理局(FDA)发表了修订人全身用抗生素类药品标签说明书的草案。在此后近 1 3个月的时间里 ,美国FDA认真考虑了来自各方面的意见和建议 ,采纳了其中的部分建议 ,有些意见未予以考虑。 2 0 0 2年1 0月 4日 ,美国FDA对联邦法 2 1卷 (食品与药品法)的第 2 0 1条关于药品标签说明书进行了修订 ,增加了有关细菌耐药性方面的内容。该规定作为修订后的最终版本 ,将在公布之日的 365日后生效(编者注 :即 2 0 0 3年 1 0月 4日 )。新规定适用于所有人全身用治疗细菌感染的药物 ,除了抗分支杆菌的抗生素外 ,说明…     

2002年临床常见革兰氏阴性杆菌耐药性监测

目的　调查国家细菌耐药性监测网临床常见革兰氏阴性杆菌对各种抗菌药物的耐药性现状。方法　药物敏感性试验采用纸片扩散法 ,耐药性数据分析采用 WHONET5软件。结果　 2 0 0 2年国家细菌耐药性监测网 8个省、市、自治区的 5 7家三级甲等医院共收集患者首次分离株 2 4 82 6株 ;大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯氏菌是最常见菌。主要标本为痰、尿和伤口及分泌物 ,分别占全部标本的 4 7.9% ,16 .8%和 10 .4 %。绝大多数肠杆菌科细菌对亚胺培南和美罗培南敏感 ,其次为第三代头孢菌素、含酶抑制剂的头孢菌素及阿米卡星。 15 % (15 .6 %～ 5 1.2 % )的肠杆菌、柠檬酸杆菌、沙雷氏菌和普罗威登氏菌对第三代头孢菌素耐药。除大肠埃希氏菌外 ,环丙沙星和左氧氟沙星对其他肠杆菌科细菌的耐药率低于 30 % (6 .0 %～ 2 9.7% ) ;产超广谱β-内酰胺酶 (ESBL s)的大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌株的检出率分别为 18.2 %和 2 2 .6 % ;铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为 19.1%和 15 .2 %。鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类抗生素较敏感 ,但对头孢哌酮、头孢他啶和阿米卡星的耐药率分别为 5 2 .8% ,4 1.6 %和 31.8%。结论　细菌耐药性问题是抗感染治疗的主要威胁 ,合理使用抗菌药物以降低耐药性和采取有效措     

降纤酶研究进展

降纤酶(Defibrase)是从尖吻蝮蛇Agkistrodon acutus和长白山白眉蝮蛇Agkistrodon halys ussuriensis蛇毒中提取分离得到的一种类凝血酶。具有显著的去纤、降粘、溶栓等作用,广泛地应用于临床治疗和预防心脑血管血栓性疾病。对降纤酶的生化性质与结构、生产制备、药理作用与临床应用以及质量分析与控制等方面的研究进行了综述。     

薄层色谱法快速筛查降血糖中成药及保健食品中添加磺酰脲类化学降糖药

目的:建立快速筛查中成药及保健食品中添加磺酰脲类化学降糖药的薄层色谱方法。方法:采用硅胶 GF_(254)薄层板,三氯甲烷-环己烷-乙醇-冰醋酸(8∶12∶1∶1)为展开剂,碘化铋钾试液为显色剂测定。结果:5种磺酰脲类化学降糖药格列喹酮、格列齐特、格列美脲、格列本脲和格列吡嗪呈橙红色斑点,在中成药中的最低检出限分别为每1g 中成药中含0.2,0.3,0.2,0.1,0.2 mg。对16种18个批次的市售降糖中成药及保健食品进行筛查,检出有3种4个批次的降糖中成药及保健食品中分别添加有格列本脲和格列吡嗪。结论:本方法经济、快速简便、灵敏、准确有效。可用于药品检测车上有关中药、保健食品添加化学降糖药的快速筛查。     

鱼腥草药材挥发油及其注射剂中癸酰乙醛的研究考证

目的：对鱼腥草药材挥发油及其注射剂中抗菌成分癸酰乙醛是否存在进行研究考证。方法：采用LC—MS／MS的一级质谱全扫描、选择性离子检测和子离子扫描方式对癸酰乙醛进行分析确证，以GC—MS和GC—FID进行佐证。结果：多种分析手段一致确证了鱼腥草药材挥发油中含有癸酰乙醛，而注射剂中却未检出。结论：鱼腥草注射液现有生产工艺和产品标准仅对化学成分甲基正壬酮进行分析控制，没有对挥发油中具有药理活性的癸酰乙醛进行测定控制，有待改进。     

近红外光谱法测定氯雷他定胶囊含量

目的：利用近红外光谱建立快速测定氯雷他定胶囊含量的方法。方法：用HPLC法测定氯雷他定胶囊含量，采用偏最小二乘法（PLS）建立NIR光谱与HPLC法测定值之间的多元校正模型，预测氯雷他定胶囊中氯雷他定的含量。结果：所建立校正模型内部交叉验证的决定系数R^2为98．32，内部交叉验证均方差（RMSECV）为0．158；外部验证均方差（RMSEP）为0．1，决定系数R^2为99．51，外部验证预测值与理论值的相关系数为0．9982，预测值平均回收率为100．3％（RSD=1．42％，n=12）。结论：本法操作简便、快速无损、环保，可用于氯雷他定胶囊含量的快速检测和质量控制。