miR-502增强肺癌对替莫唑胺化疗敏感性的机制研究

摘要：目的:探讨miR-502对替莫唑胺化疗敏感性的影响及其作用机制。方法:用200μmol·L-1的替莫唑胺处理细胞A549作为替莫唑胺组,不作任何处理的细胞作为对照（Con）组;将miR-NC、miR-502、anti-miR-NC、anti-miR-502质粒分别转染至A549细胞中,分别记为miR-NC组、miR-502组、anti-miR-NC组、anti-miR-502组; miR-502转染至A549细胞后再用200μmol·L-1的替莫唑胺处理作为替莫唑胺+miR-502组;将miR-502质粒分别与pcDNA 3.1、pcDNA 3.1-ERCC1共转染至A549细胞中再用200μmol·L-1的替莫唑胺处理,分别记为替莫唑胺+miR-502+pcDNA 3.1组、替莫唑胺+miR-502+pcDNA3.1-ERCC1组;转染均采用脂质体法。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-502表达水平;蛋白质印迹（Western Blot）法检测p21、细胞周期素D1（Cyclin D1）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、切除修复交叉互补基因1（ERCC1）表达;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测miR-502和ERCC1的靶向关系。结果:与人胚肺成纤维细胞MRC5相比,肺癌细胞A549中miR-502表达水平显著降低。过表达miR-502、替莫唑胺处理以及替莫唑胺处理同时过表达miR-502,肺癌细胞A549中p21、Bax表达水平均显著升高,Cyclin D1、Bcl-2表达水平均显著降低,细胞活性均显著降低,细胞凋亡率均显著升高（P<0.05）。结论:过表达miR-502和替莫唑胺均可抑制细胞A549增殖,促进细胞凋亡,过表达miR-502可增强替莫唑胺对细胞A549增殖抑制和凋亡促进作用,其机制可能与ERCC1有关,将可为提高肺癌化疗效果提供新途径。     

胃癌组织中FBXO45和SKP1蛋白表达及其临床预后意义

为了探讨胃癌组织中FBXO45与S期激酶相关蛋白1(SKP1)蛋白表达及其临床预后意义,选取2013年5月至2014年5月该院进行胃癌手术的60例患者作为研究对象。收集其癌组织标本及对应的癌旁组织标本,并采用免疫组化染色法检测其中FBXO45与SKP1蛋白的表达水平,采用χ^2检验分析FBXO45与SKP1表达情况与胃癌临床病理特征的关系,多因素Cox回归分析探讨FBXO45与SKP1表达情况与预后的相关性。胃癌组织FBXO45、SKP1阳性表达率分别为33.33%,65.00%;癌旁组织FBXO45、SKP1阳性表达率分别为68.33%,30.00%,胃癌组织与癌旁组织中FBXO45、SKP1阳性表达比较存在明显差异(P<0.05)。TNMⅢ~Ⅳ期、低分化、出现淋巴结转移患者的FBXO45阴性表达率、SKP1阳性表达率均上升(P<0.05)。经单因素分析得出:TNMⅢ~Ⅳ期、低分化、出现淋巴结转移、FBXO45阴性表达、SKP1阳性表达的胃腺癌患者生存时间均显著缩短(P<0.05)。经多因素分析显示:TNMⅢ~Ⅳ期(HR=3.50,95%CI:2.32~5.29)、淋巴结转移(HR=3.13,95%CI:2.16~4.54)、肿瘤低分化(HR=3.76,95%CI:2.47~5.72)、FBXO45阴性表达(HR=2.69,95%CI:1.99~3.64)、SKP1阳性表达(HR=4.11,95%CI:2.51~6.74)均为影响胃癌预后的独立危险因素(P<0.05)。FBXO45在胃癌组织中表达水平降低,而SKP1表达在胃癌组织中表达水平升高,FBXO45表达阴性与SKP1表达阳性均为胃腺癌患者预后危险因素,二者可作为判断胃癌预后的生物标志物。