非酒精性脂肪肝与钙稳态关系的研究进展

钙离子（Ca²⁺）是细胞内重要的第二信使,其主要储存在内质网和线粒体中,参与调控细胞多种生理功能及维持内质网、线粒体功能。内质网和线粒体对钙离子的摄取与释放直接影响胞内钙离子水平的变化,继而影响细胞正常生理功能。病理条件下,细胞内钙离子稳态失衡,可引发细胞生理功能异常并进一步影响内质网、线粒体功能。非酒精性脂肪肝（NAFLD）是临床常见病和多发病,其主要病理特征是：肝脏脂肪样变性、内质网应激、线粒体损伤和非特异性炎性反应等。其中持续的内质网应激及线粒体功能障碍是NAFLD发生发展的重要诱因。而细胞内钙稳态的变化可直接导致内质网及线粒体功能异常,继而影响NAFLD的发生发展。本文主要从钙稳态的主要影响因素以及钙稳态变化与NAFLD的关系两方面进行阐述,为寻求和研发防治NAFLD的药物提供新的方向。     

苦参碱联合甘草甜素在四氯化碳慢性肝损伤中的保护作用及机制

摘 要 目的：考察苦参碱联合甘草甜素在四氯化碳（CCl₄）慢性肝损伤中的保护作用,并从能量代谢及CYP酶的角度探讨其保护机制。方法: 建立CCl₄慢性肝损伤模型,通过考察血清ALT、AST观察两药及其联合用药在慢性肝损伤模型中的保护作用;检测血清谷氨酸脱氢酶（GLDH）及肝组织中肝脏腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、腺嘌呤核糖核苷酸（AMP）含量,评价药物对肝脏能量代谢及线粒体功能的调节作用;实时定量PCR及Western Blot法检测肝脏CYP1A2、CYP2E1 mRNA及蛋白水平,评价两药及其联合用药对肝脏CYP酶的调控作用。结果: 苦参碱（72.8 mg·kg^-1）、甘草甜素（43.4 mg·kg^-1）在CCl₄慢性肝损伤模型中均可降低大鼠血清ALT、AST（P<0.05）,两药联合（36.4 mg·kg^-1 苦参碱+21.7 mg·kg^-1 甘草甜素）使用保护作用更加显著(P<0.05);其中苦参碱（72.8 mg·kg^-1）、甘草甜素（43.4 mg·kg^-1）均可降低血清GLDH,并恢复肝脏ATP含量(P<0.05);苦参碱（72.8 mg·kg^-1）对CYP1A2、CYP2E1mRNA表达水平无抑制作用,甘草甜素（43.4 mg·kg^-1）对CYP1A2、CYP2E1mRNA及蛋白表达水平均有抑制作用（P<0.05）。结论: 苦参碱联合甘草甜素在慢性肝损伤模型中具有明显的线粒功能调节和肝保护作用。     

黄芩素通过调控糖酵解及谷氨酰胺代谢抑制肝癌细胞能量代谢

摘要：目的:探讨黄芩素对肝癌细胞能量代谢能力的影响及机制。方法:不同人肝癌细胞SMMC-7721、HepG2中给予不同浓度的黄芩素,通过检测细胞ATP含量、乳酸含量、谷氨酰胺代谢评价黄芩素对肝癌细胞增殖及能量代谢的影响,同时分别采用siRNA干扰己糖激酶2（HK2）及溶质载体家族1A5（SLC1A5）表达后,考察黄芩素对肝癌细胞增殖及能量代谢能力的影响。结果:黄芩素可以浓度、时间依赖性的抑制肝癌细胞活力,SMMC-7721细胞24,48,72 h处理后的半数抑制浓度(IC50)分别为26.07,20.9,18.7μmol·L-1,HepG2细胞24,48,72 h处理后的IC50分别为27.8,24.5,22.6μmol·L-1。与对照组比较,20μmol·L-1黄芩素可明显降低SMMC-7721和HepG2细胞对葡萄糖的消耗及乳酸含量（P<0.05）,同时显著降低SMMC-7721和HepG2细胞中谷氨酰胺含量（P<0.05）。与敲除HK2的肝癌细胞联合培养72 h后,与对照组比较,20μmol·L-1黄芩素仍可降低细胞能量代谢水平（P<0.05）,但对肝癌细胞的糖酵解能力无显著影响。与敲除SLC1A5后的肝癌细胞联合培养72 h后,与对照组比较,20μmol·L-1黄芩素能显著降低肝癌细胞的能量代谢及糖酵解能力（P<0.05）。在无谷氨酰胺环境下,20μmol·L-1黄芩素对于敲除HK2肝癌细胞的能量代谢调节作用与siRNA HK2组无显著差异。结论:黄芩素可抑制肝癌细胞的增殖,降低肝癌细胞的能量代谢水平,其作用机制与其同时参与肝癌细胞糖酵解及谷氨酰胺代谢相关。     

甘草次酸衍生物TY501对小鼠免疫系统的影响

目的通过小鼠灌胃给药,研究TY501对小鼠中枢免疫器官的影响;对外周血中白细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞及各亚型淋巴细胞的比例和数量影响。方法选用50只ICR小鼠,设对照组、阳性对照泼尼松龙组、TY501低、中、高剂量组,对照组给予动物饮用水,给药组灌胃给予相应药物,20 mg/kg每日1次,持续给药21 d,末次给药24 h后分别进行外周血中白细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞的数量和各亚型淋巴细胞的比例测定;胸腺和脾脏脏器指数测定。结果泼尼松龙灌胃给药可导致动物体重显著降低,胸腺、脾脏萎缩,外周血中淋巴细胞数量降低等一系列对免疫系统的毒性反应;TY501灌胃给药对动物中枢免疫器官、外周血淋巴细胞数量及亚型未产生明显影响。结论TY501对小鼠免疫系统未发现明显的抑制作用。     

新生SD大鼠心肌细胞原代培养方法改进

目的:改良心肌细胞原代培养的方法条件、培养纯度,提高心肌细胞收获率和存活率。方法:取出生24h内SD大鼠心室,剪碎,0.05%胰蛋白酶、0.8～0.1mg/mlⅡ型胶原酶分次消化心室组织,差速贴壁法和化学试剂抑制非心肌细胞生长,纯化心肌细胞。用免疫组织化学方法检测细胞纯度。结果:心肌细胞存活率大于96%,细胞纯度亦为95%以上且细胞活性好。结论:本方法培养的原代心肌细胞存活率和纯度都大大提高,培养方法和操作步骤都得以简化,是一种理想心肌细胞原代培养方法。     

苦参碱抑制Akt信号通路诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的:研究苦参碱对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用及其可能的分子机制。方法:噻唑蓝比色法(MTT)测定苦参碱对SW480细胞株增殖的影响;Hoechst33258染色检测苦参碱对SW480细胞凋亡的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测苦参碱对SW480细胞中总蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的干预作用。结果:苦参碱(0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L~(-1))能浓度和时间依赖性地抑制SW480细胞增殖。作用24,48,72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为1.72,1.08,0.67 g·L~(-1),Hochest33258染色和流式细胞术结果显示苦参碱能显著诱导细胞凋亡(P0.01),随着药物质量浓度的提高,细胞凋亡率逐渐上升。Western blot检测显示,SW480细胞加入苦参碱后,胞内总Akt的含量无显著变化,但p-Akt的生成被显著抑制,凋亡抑制性蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增高(P0.05)。结论:苦参碱能够诱导SW480细胞凋亡,该药理作用可能与苦参碱对Akt信号通路的抑制有关。     

出血性脑梗死临床分析

目的探讨出血性脑梗死的影响因素。方法回顾分析本院5年来收住的1500例脑梗死病人的临床资料。结果脑梗死后出血与大面积梗死、合并房颤、皮质梗死、高血糖有关,而与患者的性别、年龄、高血压、病前是否长期使用抗血小板药物、口服抗凝剂,病后是否使用溶栓、抗凝、抗血小板药物,既往中风病史等无关。结论对大面积梗死、合并房颤、皮质梗死的病人宜密切动态观察,注意梗死后出血的可能,及时复查头颅CT/MRI以调整治疗方案。     

芒果苷通过抑制糖酵解反应影响胃癌细胞迁移及侵袭

摘 要 目的：考察芒果苷对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其与细胞糖酵解反应的关系。 方法: 考察不同浓度（10,30,90 μmol·L-1）芒果苷对人胃癌SGC 7901和BGC 823细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并检测肿瘤细胞的乳酸及葡萄糖消耗水平,同时将芒果苷与丙酮酸激酶M2（PKM2）抑制剂联合（30 μmol·L-1+ 30 μmol·L-1）给予不同胃癌细胞,初步考察芒果苷影响胃癌细胞迁移及侵袭的机制与胃癌糖酵解反应的关系。 结果: 芒果苷可浓度依赖性抑制不同胃癌细胞的增殖活力,降低肿瘤细胞迁移及侵袭的能力,并减少细胞乳酸及葡萄糖消耗水平,抑制糖酵解反应,抑制PKM2二聚体的表达,与空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。与PKM2抑制剂联合使用后,芒果苷联合抑制剂组与单一抑制剂组相较,对肿瘤细胞增殖活力、细胞迁移及侵袭的的调节作用差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论: 芒果苷可通过抑制PKM2二聚体的表达,抑制胃癌细胞糖酵解反应,继而抑制胃癌细胞增殖活力并降低其迁移及侵袭能力。     

苦参碱促进胰高血糖素样肽1分泌与肠苦味受体途径的相关性研究

摘 要 目的：研究苦味物质苦参碱促进胰高血糖素样肽1（GLP 1）分泌与肠苦味受体途径的相关性。方法: 噻唑蓝比色法（MTT）测定苦参碱对小鼠肠道内分泌细胞株（STC 1）增殖的影响;采用ELISA法检测培养基上清中的GLP 1及胞内三磷酸肌醇（IP3）含量;采用荧光分光光度仪进行Fluo 3荧光检测STC 1细胞内游离钙离子浓度;免疫印迹法（Western blot）检测磷脂酶C β2（PLC β2）、α 味导素蛋白（Gαgust）的表达水平。结果: 苦参碱（0.2,0.5,1,5,10,15,20 mmol·L-1）可浓度和时间依赖性抑制STC 1细胞增殖,作用24,48,72 h处理后的半数抑制浓度（IC50）分别为10.32,8.37,6.58 mmol·L-1;与正常对照组比较,苦参碱中、高剂量组（6,12 mmol·L-1）可显著升高STC 1细胞内IP3含量（P<0.05）及胞内游离钙离子的浓度（P<0.05）。苦参碱高剂量组（12 mmol·L-1）可明显升高Gαgust蛋白表达量（P<0.05）。结论: 苦参碱可通过激活肠上苦味受体下游信号分子PLC β2及Gαgust促进胞内IP3及钙离子浓度增加,进而刺激GLP 1分泌。     

低伏立康唑谷浓度致幻视1例

摘要：<正>1病例资料患者,女,34岁,体重59 kg; 2021年5月初,因无明显诱因出现乏力、面色苍白,伴有低热,体温最高37.5℃,就诊于当地医院,确诊骨髓增生异常综合征。2021年6月18日给予地西他滨+IA(去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷)方案化疗。治疗后20 d, 骨髓细胞形态示：原始粒细胞9%。7月26日给予维奈克拉+阿扎胞苷化疗,治疗后患者血象偏低伴发热,最高体温39℃。为求进一步治疗,于2021年8月5日入住我院血液科。