二硫化碳对大鼠睾丸组织细胞凋亡线粒体通路的影响及环孢素A的干预作用

[目的]研究二硫化碳(carbon disulfide,CS2)对大鼠睾丸生殖细胞凋亡线粒体通路的影响及其可能的分子机制,同时观察环孢素A(cyclosporin A,Cs A)对细胞凋亡的干预作用。[方法]选取清洁级雄性SD大鼠48只并随机分为6组:对照组、3个CS2染毒组(50、250、1 250 mg/m3)、干预组[CS2(1 250 mg/m3)+Cs A(12.5 mg/kg)]和Cs A(12.5 mg/kg)组。静式吸入染毒,每天2 h,每周5 d,共10周,对照组仅吸入新鲜空气,Cs A则依据大鼠体重并按相应比例先溶解在牛奶中然后灌胃。染毒结束后取睾丸组织做HE染色,观察其形态学改变;TUNEL荧光法检测大鼠睾丸组织细胞凋亡情况;Western Blot法检测各组细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸天冬氨酸酶原9(Procaspase-9)、Procaspase-3、Bcl-x L抗凋亡和促凋亡蛋白Bad的表达含量。[结果]随着CS2染毒浓度的增加,HE染色大鼠睾丸组织形态损伤情况不断加剧,中、高浓度组的凋亡指数高于对照组(P<0.05),Cs A干预对大鼠睾丸组织形态损伤有一定缓解;与高浓度CS2染毒组相比,干预组的凋亡指数明显下降(P<0.05),但仍高于Cs A组(P<0.05)。CS2染毒组Cyt C、Bad蛋白含量与对照组比较有所增加,而Procaspase-9、Procaspase-3和Bcl-x L蛋白含量则有下降的趋势(P<0.05)。Cs A干预后与高浓度CS2染毒组比较,干预组Cyt C蛋白含量下降(P<0.05),Bcl-x L蛋白含量则提高(P<0.05);Procaspase-9、Procaspase-3和Bad蛋白含量均有不同程度的变化,但与CS2高浓度组相比差异无统计学意义。[结论]CS2染毒可影响细胞凋亡线粒体通路继而诱导大鼠睾丸生殖细胞凋亡,而细胞凋亡线粒体通路相关蛋白的表达可能与Cs A的干预有关。     

内毒素多克隆抗体制备及其在ELISA中应用

目的 制备抗大肠杆菌精制内毒素的兔多克隆抗体并建立检测内毒素的间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)方法.方法 大肠杆菌精制内毒素作为免疫原,采用逐渐加强免疫剂量的方法免疫家兔,制备抗体,将抗体用于ELISA检测精制内毒素;并与复合型内毒素进行反应.结果 随着免疫次数增加,抗血清效价逐渐提高,最后一次免疫后血清效价达到1∶6 400;在包被抗原浓度100 μg/mL和兔多抗稀释比1∶500最佳使用条件下建立间接竞争性ELISA,内毒素浓度与吸光度(A)值成反比例关系,线性回归方程为:y=-0.1 ln(x)+0.765,检测最低内毒素浓度为50ng/mL;兔血清与复合型内毒素反应效价为1∶16000.结论 成功制备出抗精制内毒素兔多克隆抗体,且能与复合型内毒素反应.     

内毒素的多粘菌素B与抗体联用夹心ELISA检测法

目的建立细菌内毒素的多粘菌素B(PMB)与抗内毒素兔多克隆抗体联合夹心ELISA(sELISA)检测法。方法将PMB包被于酶标板作固相,封闭后逐次加入不同浓度的大肠杆菌内毒素,优化抗内毒素兔多抗和酶标抗体的浓度,建立sELISA方法。结果在0.1～100μg/ml范围内,内毒素浓度与OD值呈正相关关系,回归方程为y=0.094lnx+0.227,R2=0.914,最低检测限为100 ng/ml。结论该方法适用于内毒素检测。     

三氯生在食品中残留及其经口暴露毒性效应研究进展

三氯生作为一种高效广谱抗菌剂,被广泛用于农业生产、食品加工、食品包装材料及日化用品生产等领域。三氯生可通过食品包装、食品清洁、污染水源、土壤等造成其在食品中残留,从而被人体摄入、危害人类健康,成为新的潜在公共健康威胁。然而,国内外尚缺乏三氯在食品领域应用的相关限值。本文概述了三氯生在食品中残留量及其经口暴露毒性研究的相关数据,总结三氯生在食品中的分布特征,分析可能影响因素和潜在健康威胁,为明确三氯生对食品安全和人类健康造成的影响,以及今后开展相关研究、制定三氯生食品中最大残留限值提供科学参考。     

二硫化碳对大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡线粒体途径相关基因表达的影响

[目的]研究二硫化碳（carbondisulfide,CS：）染毒对大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡线粒体途径相关基因表达的影响。[方法]选用22～24d龄清洁级雄性SD大鼠,建立睾丸生精-支持细胞体外共培养体系,将细胞分为4组：1个对照组和3个不同浓度csz染毒组（1、2、4μmol／mL）,提取RNA,应用荧光实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测Cyto C、 Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9、Aif、EndoG、Smac、IAPS、 Bax、 Bcl-2 mRNA表达水平。[结果]大鼠睾丸支持一生精共培养细胞中,CS2染毒可导致CytoC、Smac、IAPS、Caspase-3、BaxmRNA的表达水平和Bax／Bcl-2mRNA表达水平值均明显升高（P〈0．05）,同时使Apaf-1、Aif、Bcl-2和EndoGmRNA的表达水平明显下降（P〈0．05）。[结论]CS2染毒可影响大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡线粒体途径相关基因的表达,并且这一机制与CS2导致生殖损伤相关。     

低分子肝素钠联合疏血通注射液治疗早期深静脉血栓超声观察

目的应用彩色多普勒观察低分子肝素钠联合疏血通注射液治疗早期深静脉血栓的效果。方法将早期深静脉血栓病例,随机分为治疗组和对照组,治疗组用低分子肝素钠合疏血通注射液治疗,对照组用低分子肝素钠合华法林治疗,应用彩色多普勒超声动态观察2组治疗效果并进行比较。结果治疗组血栓完全溶解40例、部分溶解4例,有效率88%;对照组血栓完全溶解37例、部分溶解8例,有效率68.2%。2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论疏血通注射液配合低分子肝素钠治疗早期深静脉血栓具有疗效好、疗程短、副作用少、复发率低的优点。     

应用彩色多普勒超声观察早期深静脉血栓的抗凝效果

目的观察早期深静脉血栓的抗凝治疗效果。方法对临床确诊的深静脉血栓患者应用低分子肝素钠和华法林抗凝治疗,彩色多普勒超声定期随访治疗效果。结果急性期深静脉血栓治愈率61.54%,好转率9.23%,有效率70.77%,亚急性期深静脉血栓治愈率41.7%,好转率20.83%,有效率62.53%,急性期血栓治疗效果优于急性期,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论彩色多普勒可以作为深静脉血栓的最佳检测和复查方法,获得满意疗效的关键是早诊断早治疗。     

ELISA与免疫传感器在大肠杆菌内毒素检测中的应用

目的:研究两种基于免疫反应和电化学的简便、灵敏、特异检测内毒素的新方法。方法:应用ELISA建立PMB-ET-ELISA法和免疫传感器法对大肠杆菌内毒素进行分析,并对两种方法检测范围和最低检测限进行分析和比较。结果:ELISA方法检测精制内毒素范围为1μg/ml～1 mg/ml,检测大肠杆菌O157:H7范围为105 CFU/ml～109 CFU/ml,相当于内毒素190μg/ml～2918μg/ml。免疫生物传感器法检测精制内毒素范围为1μg/ml～1 mg/ml;检测大肠杆菌O157:H7范围为106 CFU/ml～109 CFU/ml,相当于内毒素288μg/ml～1416μg/ml。结论:建立的ELISA和免疫传感器两种检测内毒素新方法有效、稳定、可用。     

二硫化碳对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴分泌功能的影响及NO的干预作用

目的探讨二硫化碳（CS2）对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴（hypothalamic—pituitary-gonad axis,HPGA）分泌功能的影响,同时观察一氧化氮（NO）对其的干预作用。方法清洁级SD雄性大鼠36只随机分为6组,以不同浓度CS2（0、50、250、1250mg／m3）静式吸入染毒,共10周,另设CS2（1250mg／m3）＋SNP（5mg／kg）组和CS（1250mg／m3）＋L—NMMA（2mg／kg）组,染毒结束前10d,对CS2高剂量染毒的3个组分别进行腹腔内注射生理盐水（NS）、SNP及L—NMMA,染毒结束后,测定大鼠血清、下丘脑、垂体、睾丸中NOS活性及NO含量,采用放射免疫法检测血清Gn—RH、FSH、LH、T的含量。结果（1）随着CS2染毒剂量的增加,大鼠血清、下丘脑、垂体、睾丸中NOS与iNOS活性、NO含量与对照组相比较均有不同程度的降低和减少;加入SNP后,NOS活性、iNOS活性均有所增高,与高剂量组相比较差异具有统计学意义（P〈0．05）,NO含量均有所增加,但差异无统计学意义（P〉0．05）;加入L－NMMA后N0s活性、iNOS活性降低、NO含量减少,但与高剂量组比较无统计学意义（P〉0．05）。（2）随着CS2染毒剂量的增加,血清中GnRH、LH的含量均有所下降,FSH含量随着染毒剂量的增加而增加,T有先升高后降低的趋势。加入SNP后,血清中GnRH、LH及T含量均有所升高,且与高剂量组比较具有统计学意义（P〈0．05）,FSH含量变化不明显（P〉0．05）．加入L—NMMA后,血清中GnRH、LH及T含量均有所降低,FSH含量变化不明显,与高剂量组比较均无统计学意义（P〉0．05）。结论（1）CS2染毒对大鼠体内N0含量有一定的影响;（2）CS2染毒能影响大鼠HPGA分泌的性激素有影响,NO对其具有一定的干预作用。     

浅论我国新型冠状病毒感染防控策略调整的现实必要性

自新型冠状病毒肆虐人类以来,全球已经历了3年的大流行,是20世纪以来最为严重的突发公共卫生事件。本文回顾了3年来全球疫情发展形势,系统地分析新型冠状病毒感染疫情的流行特点、病毒特性、疾病特征以及相关干预措施有效性的发展变化情况,重点讨论在新形势下防控策略调整的必要性所需考虑的综合因素,包括病毒传播特性、免疫屏障、疾病负担和危害、药物治疗等。围绕资源准备、监测体系建立、重点人群疫苗接种、健康宣传等方面提出新阶段的新型冠状病毒感染疫情防控应对建议,为今后新发传染病的应急处置和综合防控提供有益借鉴。