基于斑马鱼模型的紫河车冻干粉水提物抗衰老功效研究

目的 应用斑马鱼模型评价紫河车冻干粉水提物（PHFAE）抗衰老的功效。方法 将健康产妇新鲜胎盘冷冻干燥后碾磨为粉，并使用蒸馏水进行提取，制成紫河车冻干粉水提物（PHFAE）。发育8 h （8 hpf）的AB系斑马鱼使用PHFAE（0、1、10、25 μg·mL^-1）连续作用72 h，对其体内β-半乳糖苷酶进行染色。随后将AB系与皮肤荧光转基因斑马鱼均随机分成对照组、模型组和PHFAE （1、10、25 μg·mL^-1）组，对照组给予培养水，模型组给予0.5 mmol·L^-1 H₂O₂溶液制备氧化损伤模型，PHFAE组同时给予H₂O₂与不同浓度PHFAE，连续作用72 h后，测定皮肤表面荧光斑点的数量；试剂盒法检测鱼体内活性氧（ROS）含量；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达变化。结果 与对照组比较，1、10、25 μg·mL^-1的PHFAE组斑马鱼体内β-半乳糖苷酶的活性均显著降低（P＜0.01）；与模型组比较，1、10、25 μg·mL^-1的PHFAE显著抑制H₂O₂诱导的角质细胞的死亡（P＜0.01），明显抑制ROS的积聚，显著升高ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达（P＜0.01）。结论 PHFAE通过调控ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod基因的表达，提高了机体的抗氧化能力，进而发挥抗衰老之功效。