45年恙螨与媒介恙螨传播恙虫病的基础研究

报告作等45年来恙螨以及媒介恙螨传播恙虫病基础研究结果，主要包括：（1）恙螨调查研究：种类的发现，恙虫病东方体的分离和检测，媒介恙螨孳生地及其恙虫病流行；（2）恙螨生活史和实验生态研究；恙螨培育成功与生活史的实验，平民螨实验生态和恙虫病流行的预测预报；（3）恙螨传病机制及其控制恙虫病流行研究。恙虫病东方体阳性恙螨模型的建立及其东方体在恙螨体内的动态，恙螨体内东方体垂直传递和传病潜力。以及防灭恙螨与控制恙虫病的流行。     

粉尘螨主要变应原Derf1基因的改造与可溶性表达

目的在大肠杆菌中提高粉尘螨1类变应原（Derf1）的可溶性表达。方法用RT-PCR方法扩增得到Derf1的全长序列与成熟肽序列（mDerf1）；以已知DerP5基因的前导序列替换Derf1前导序列和原酶序列，重新构建出rDerf1基因；将上述3个基因分别克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中表达，经Western-blot对三者的表达产物进行分析鉴定。结果Western-blot表明，pGEX-Derf1与pGEX-mDerf1的表达产物分别为分子量约63000与51000的重组蛋白质，重组蛋白质主要存在于细胞裂解液的沉淀中。pGEX-rDerf1大量表达了可溶性目的蛋白质，分子量约53000，并被成功地分离纯化。以上三种表达产物均可被鼠抗GST抗体与螨过敏患者血清特异地识别。结论表达了含Derf1，mDerf1与rDerf1的三种GST融合蛋白质，它们均具免疫反应性，纯化获得了GST-rDerf1融合蛋白质，为后期的诊断及治疗奠定了基础。     

机会致病原虫动物模型在实验教学中的应用

目的探讨机会性致病原虫在实验教学中的应用效果。方法选择卡氏肺孢子虫为机会致病原虫的代表虫种,Wistar大鼠为实验动物。实验课中给实验动物口服免疫抑制剂,学生按时观察实验动物的生理状态变化,并称体重后记录。至第3周取卡氏肺孢子虫肺组织匀浆,经右胸注入部分对照组和实验组大鼠体内。第6周解剖大鼠观察肺部病理变化,并取肺组织制片检查病原体。结果实验组大鼠口服免疫抑制剂醋酸地塞米松,5周后一般状态较差,有明显的脱毛,咳喘等现象;体重由原来的160～180g下降至120～140g;肺组织印片查到卡氏肺孢子虫。对照组大鼠在实验过程中体重逐渐增加,由原来的160～180g增至190～210g;一般情况良好,肺印片镜检未发现卡氏肺孢子虫。学生在实验报告中记录了观察和检查结果,对机会性致病原虫的致病特点有深刻认识。结论有效的实验操作是保证教学质量和培养创造性思维的关键。     

以培养创新型高素质人才为目标开展精品课程建设

本文介绍了我校人体寄生虫学课程创建国家级精品课程的实践。在创建过程中，我们坚持“以人为本”的原则，以培养创新型人才为目标，使基础课程与疾病防治紧密结合，走教学与科研相结合的道路，这是创建国家级精品课程的关键因素。     

痔疮病人术后激光机中药坐浴的疗效观察与护理

痔疮是最常见的肛肠疾病,包括内痔、外痔、混合痔,民间有"十人九痔"之说,其发生与久站、久坐、活动少、便秘、腹泻、排便时间过长、饮酒过多、嗜好辛辣饮食等因素有关,发病率女性高于男性,以成人居多。将我院痔疮病人术后分别采用激光坐浴机中药坐浴和传统中药坐浴进行比较研究,旨在探讨痔疮病人术后采用激光坐浴机中药坐浴的效果及护理措施。     

恙螨体内恙虫病立克次体经精胞传递的实验研究

本文报道地里纤恙螨雄虫人工接种恙虫病立克次体后与雌虫配对培养和传代，应用幼虫叮咬小鼠分离立克次体和PCR结合核酸杂交（核酸杂交检测PCR产物）检测子代体内立克次体的结果。幼虫叮咬小鼠分离立克农作检查第3子代幼虫体内立克次体阳性。PCR结合核酸杂交检测佛山市的病人恙虫病立克次休（未定株）接种雄虫和健康雌虫配对的第1、2、3子代成虫体内立克次体DNA阳性。Karp株接种雄虫的第1子代幼虫体内立克次体的幼虫叮咬小鼠法和PCR结合核酸杂交均呈阳性。     

弓形虫MIC 6羧基端蛋白片段的表达及其多克隆抗体的制备

目的克隆表达刚地弓形虫微线体蛋白6羧基端蛋白片段(Tg MIC6C),制备多克隆抗体。方法PCR扩增目的基因片段,克隆到pGEX-4T-1载体上,构建MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST-MIC6C融合蛋白,亲和层析融合蛋白;用纯化的融合蛋白混合免疫佐剂免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,纯化并分析抗体的特异性。结果构建了MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统并获得纯化的GST-MIC6C融合蛋白;获得了抗目的蛋白的多克隆抗体,抗体能特异地识别目的蛋白,抗体效价为1∶8 000。结论在体外获得了纯化的GST-MIC6C融合蛋白及其多克隆抗体,为后续GSTpull-down筛选与MIC6相互作用的蛋白奠定了基础。     

粉尘螨主要变应原Derf1基因的改造与可溶性表达

目的 在大肠杆菌中提高粉尘螨1类变应原(Der f 1)的可溶性表达.方法 用RT-PCR方法扩增得到Der f 1的全长序列与成熟肽序列(mDer f 1);以已知Der P 5基因的前导序列替换Der f 1前导序列和原酶序列,重新构建出rDer f 1基因;将上述3个基因分别克隆人原核表达载体pGEX-4T-1中表达,经Western-blot对三者的表达产物进行分析鉴定.结果 Western-blot表明, pGEX-Der f 1与pGEX-mDer f 1的表达产物分别为分子量约63000与51000的重组蛋白质,重组蛋白质主要存在于细胞裂解液的沉淀中.pGEX-rDer f 1大量表达了可溶性目的 蛋白质,分子量约53000,并被成功地分离纯化.三种表达产物均可被鼠抗GST抗体与螨过敏患者血清特异地识别.结论 表达了含Der f 1, mDer f 1与rDer f 1的三种GST融合蛋白质,它们均具免疫反应性,纯化获得了CST-rDer f 1融合蛋白质,为后期的诊断及治疗奠定了基础.     

长学制临床医学专业人体寄生虫学双语教学改革的探讨

高等教育从21世纪经济社会科技发展的大趋势及其要求出发，为现代化建设培养高素质人才提供高质量的社会服务。要想实现这个目标，必须通过深化高等教育体制和方法的改革而提高教学质量，提高办学水平。     

超声在股浅静脉瓣膜戴戒术中的应用研究

目的 研究术中超声应用于股浅静脉瓣膜戴戒术治疗原发性下肢深静脉功能不全(PDVI)中的疗效和应用价值.方法 将经静脉顺行造影证实为原发性下肢深静脉瓣膜功能不全的88个病例分为A、B两组,两组均采用传统的股浅静脉瓣膜戴戒术加曲张静脉剥脱术,A 组术中加行超声辅助.以瓣膜反流持续时间评价即时效果,以临床病因-解剖-病理-生理(CEAP)临床分级与临床记分做随访评价疗效.结果 术中超声检测静脉反流持续时间戴戒后较戴戒前明显缩短;术后A、B两组临床分级与临床记分差值均有显著性差异( P < 0.01).结论 在股浅静脉瓣膜戴戒术中,超声检查进行辅助能够有效提高手术的针对性,增加手术效果.