抗人T细胞猪免疫球蛋白药代动力学检测方法的建立、验证及应用

目的 建立抗人T细胞猪免疫球蛋白（porcine anti-human T cell immunoglobulin,p-ATG）药代动力学检测方法并验证,以检测用药后患者血清总p-ATG浓度。方法 采用兔抗猪IgG F(ab')₂包被酶标板、辣根过氧化物酶标记的羊抗猪IgG作为二抗,建立人血清p-ATG含量的双抗体夹心ELISA,并验证该方法的标准曲线拟合范围、平行性、精密度、准确度、专属性。用建立的方法对13例患者的不同用药剂量的临床血样进行检测并分析药代动力学。结果 从0.44 μg/ml起始浓度稀释2¹〜2⁷倍的参考品浓度与吸光度值之间呈现S曲线,决定系数(R²)大于0.99,回收率为89.91%〜112.96%;平行性样品斜率与参考品斜率变异系数（coefficient of variation,CV）绝对值<10%,R²>0.99,R²的CV<5%;板间、板内曲线CV<10%;重复性CV<10%,回收率为94.23%〜101.80%;加标回收率均在99.87%〜104.94%之间;输注p-ATG后患者血清与健康人血清以及输注前患者血清p-ATG浓度间差异有统计学意义（F=1.48,P <0.05）。20、25、30 mg剂量用药患者的血样中,p-ATG半衰期分别为20.6、16.6、16.2 d。结论 建立的p-ATG药代动力学检测方法具有良好的重复性、准确度及专属性,可以用于p-ATG临床用药后血清浓度的检测。     

人外周血白细胞处理后CD分子的变化及免疫原性

目的  优化层析-比色法,并对该方法进行分析方法验证;比较优化层析-比色法和层析-积分法,评价两方法测定伤寒Vi精制多糖分子大小的适用性。方法  优化比色法O-乙酰基标准曲线浓度范围,对该方法进行准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性的验证;应用优化层析-比色法和层析-积分法检测多批次伤寒Vi精制多糖分子大小,对结果进行统计学分析。结果 优化层析-比色法准确度回收率均为100%;样品的重复性相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）分别为2.4%和0.0%,中间精密度RSD均为3.4%,连续5次测定标准曲线,决定系数均大于0.999 0,耐用性RSD为4.6%。优化层析-比色法和层析-积分法在检测伤寒Vi精制多糖分子大小时,差异无统计学意义（t=-1.372,P＞0.05）。结论  优化的比色法具有良好的准确度、重复性、中间精密度、线性和耐用性,两种方法均可用于检测伤寒Vi精制多糖分子大小。