同种异体骨支撑架微创治疗股骨头坏死的临床研究

目的应用改良髓芯减压术结合同种异体骨支撑架加自体骨和脱钙骨基质（decalcified bone matrix，DBM）治疗早期股骨头坏死，探索早期股骨头坏死的微创治疗方法。方法2004年1月～2005年4月，23例24个髋关节采用经大转子下通过股骨颈钻隧道至股骨头骨坏死区，将装有自体松质骨和DBM的同种异体骨支撑架经隧道拧入骨坏死区直至软骨下骨约5mm处，隧道远端用自体髂骨填塞。观察手术前后Harris评分变化、x线影像学表现及是否需进一步治疗。结果本组所有患者均获得随访，平均随访19（12—27）个月，以最后一次随访资料作为最终评价依据。Harris评分，术前优良率为43．5％（10／23）。术后优良率为91．3％（21／23）。22侧髋关节影像学表现保持稳定，无明显并发症发生。结论同种异体骨支撑架植入结合自体松质骨和DBM治疗成人股骨头坏死，增加了股骨头负重区软骨下骨的机械支撑，成骨作用强，有利于股骨头坏死的修复与重建，同时，不破坏患者股骨头本身的血液供应，创伤小，操作简单，值得临床推广使用。     

中西医结合治疗乳房结核临床分析

目的 探讨乳房结核治疗的临床意义.方法 采用中西医结合方法治疗乳房结核26例.结果 本组病例均有效随访1年以上,25例无复发,1例于术后12个月后复发,经二次手术痊愈.结论 中西医结合治疗乳房结核缩短了化疗时间,提高了近期治愈率,降低了远期复发率.     

单启动子双表达载体pIRES-p14ARF-p53的构建及对骨肉瘤细胞增殖的抑制

背景：以往的研究表明，ADp14ARF转染p53阳性的肿瘤细胞系，可以发现明显的细胞增殖受阻现象。而转染p53阴性的肿瘤细胞系，尽管也可见肿瘤细胞增殖受阻，但在程度上明显轻于前者。同时转染p14ARF和p53两种基因，既增强p53表达又加强p53积累，能否更易促进肿瘤细胞凋亡？目的：利用基因工程技术构建双质粒表达载体pIRES-p14ARF-p53，并观察其对骨肉瘤细胞增殖生长的抑制作用。设计：随机对照观察。单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科。材料：实验于2005—01／2006—10于华中科技大学同济医学院基础医学院免疫教研室公共实验平台完成。人骨肉瘤MG-63细胞有华中科技大学同济医学院免疫教研室细胞室提供。含p53全长基因序列的质粒pIRES-p53和pIRES载体均购自武汉晶赛生物公司。方法：利用基因工程技术，将从培养的正常人肝细胞系L02细胞中扩增出的p14cDNA（0．5kb）亚克隆至pIRES载体中，通过PCR、限制性内切酶酶切鉴定重组质粒pIRES-p14ARF-p53。通过脂质体介导转染入骨肉瘤MG-63细胞中，并筛选出阳性克隆，将细胞分为3组：空白对照组（MG-63细胞），空载体对照组（稳定转染pIRES-neo细胞），p14ARF-p53组（稳定转染pIRES-p14ARF-p53细胞）。①采用流式细胞仪测定转染前后瘤细胞DNA含量和细胞周期。②逆转录PCR（RT-PCR）和Westem bolt对稳定转染后的瘤细胞p53、p14ARF蛋白的表达进行定性和半定量检测。③采用噻唑蓝比色法与细胞生长曲线观察细胞增殖情况。主要观察指标：①骨肉瘤细胞DNA含量和细胞周期。②瘤细胞p53、p14ARF蛋白的表达。③细胞增殖情况。结果：成功构建出双质粒表达载体pIRES-p14ARF-p53。①骨肉瘤细胞DNA含量和细胞周期：流式细胞仪检测发现转染后的瘤细胞多停滞于G1期。②蛋白表达检测结果：RT-PCR与Western blot检测证实p14ARF、p53基因在靶细胞mRNA和蛋白水平分别有独立表达。③细胞生长情况：转染MG-63后24，48，72，96h瘤细胞生长抑制率分别为33．43％、69．37％、66．19％、75．26％，与空载体对照组差异显著（P〈0．01）。结论：野生型p53和p14ARF可协同抑制骨肉瘤细胞的增殖促进瘤细胞的凋亡。     

中西医结合治疗肠结核病合并肠梗阻36例临床分析

肠结核(intestinal tuberculosis)是结核分枝杆菌引起的肠道慢性特异性感染疾病,是量常见的肺外结核病之一.有资料量示临床上有90％的肠结核继发于肺结核,以往对于肠结核的治疗一般靠内科治疗(1),包括休息,纠正营养不良和抗结核药物治疗,常用的抗结核药物有异烟肼,利福平,乙胺丁醇,链霉素,吡嗪酰胺等.手术治疗仅限于发生穿孔,出血,梗阻等并发症者.肠梗阻(intestinal obstruction),指肠内容物通过障碍,通俗来讲就是肠道阻塞,肠道不通畅,上下不通,表现为剧烈腹痛,呕吐不止,不排便,腹胀明显.主要原因是肠腔狭窄、肿胀,肠蠕动减弱,肠道的血液循环障碍等等.我院自2003年至2010年共收治36例肠结核病合病肠梗阻的患者,我们采取禁食、营养支持及中药、抗痨等中西医结合外科手术治疗,效果较为明显.现报道如下.     

中西医结合治疗颈淋巴结结核伴窦道形成82例分析

全身淋巴结均可发生结核,但以颈淋巴结结核最为常见,约占淋巴系统疾病的80％～90％。病原体从口腔或鼻咽部（扁桃体）侵入,经淋巴管引流到颈部、颌下或颏下淋巴结。我院1998年9月至2008年12月采用中西医结合治疗颈淋巴结结核伴窦道形成82例,取得较好的效果。现报告如下。     

单启动子双表达载体pIRES-p14ARF-p53的构建及其对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用

目的 构建双质粒表达载体pIRES-p14ARF-p53，并研究其对骨肉瘤细胞增殖生长的抑制作用。方法 利用基因工程技术，将从培养的正常人肝细胞系L02细胞中扩增出的p14cDNA（0．5kb）亚克隆至pIRES载体中，通过聚合酶链反应（PCR）、限制性内切酶酶切鉴定重组质粒pIRES-p14ARF-p53。通过脂质体介导转染入骨肉瘤MG-63细胞中，并筛选出阳性克隆，流式细胞仪测定瘤细胞DNA含量和细胞周期；逆转录（RT）-PCR和Western bolt对稳定转染后的瘤细胞p53、p14ARF蛋白的表达进行定性和半定量检测。噻唑蓝（MTT）比色法与细胞生长曲线观察细胞增殖情况。结果 成功构建出双质粒表达载体pIRES-p14ARF-p53。转染后瘤细胞形态由转染前密集排列的多角形、星形转变为排列稀疏的长梭形细胞，瘤细胞生长速度较前缓慢，群体倍增时间比转染前增加了2．3倍，且易出现脱壁并见散在瘤细胞凋亡；流式细胞仪检测发现转染后的瘤细胞多停滞于G1期；RT-PCR与Western blot检测证实p14ARF、p53基因在靶细胞mRNA和蛋白水平分别有独立表达，转染MG-63后24、48、72、96h瘤细胞生长抑制率分别为：33．43％、69．37％、66，19％、75．26％，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 野生型p53和p14ARF协同抑制骨肉瘤细胞的增殖促进瘤细胞的凋亡，为进一步研究p14ARF与p53在骨肉瘤基因治疗的体内实验奠定了基础。     

同种异体骨支撑架结合自体骨和DBM治疗股骨头坏死的生物力学研究

[目的]研究同种异体骨支撑架结合自体骨和脱钙骨基质（decalcified bone matrix，DBM）植入治疗股骨头坏死生物力学变化。[方法]建立羊双侧股骨头坏死模型，4周后分为4组：单纯行髓芯减压组（A组）、髓芯减压后植入自体松质骨和OSTEOSET^2 DBM组（B组）、髓芯减压后植入同种异体骨支撑架／自体松质骨OSTEOSE^2 DBM组（C组）和正常对照组。术后分别于5、10、20周对股骨头行影像学、组织学观察和生物力学测定。[结果]影像学和组织学检查结果显示C组在髓芯减压区骨缺损修复及成骨方面较B组略高，B、C两组都较同时期的A组明显增强。生物力学测试结果表明，术后5、10、20周时C组力学强度较A、B两组明显增高．差异有统计学意义（P〈0．05），在10、20周时C组股骨头生物力学强度和正常股骨头己无明显差异。[结论]应用同种异体骨支撑架结合自体骨和脱钙骨基质治疗股骨头坏死，能有效加强股骨头的力学结构，促进坏死骨的修复，防止股骨头关节面的塌陷。     

同种异体骨支撑架结合自体骨和DBM治疗股骨头坏死

目的探讨同种异体骨支撑架植入结合自体松质骨和脱钙骨基质（DBM）治疗成人股骨头坏死初步疗效。方法采用经大转子下通过股骨颈钻隧道至股骨头骨坏死区,将装有自体松质骨和DBM的同种异体骨支撑架经隧道置入骨坏死区直至软骨下骨约5mm处,隧道远端用自体髂骨填塞。结果经临床应用23例24个髋关节,随访12～27个月,并按成人股骨头缺血性坏死疗效百分评价法进行评价,优良率为95.8％。结论同种异体骨支撑架植入结合自体松质骨和DBM治疗成人股骨头坏死具有以下优点：①手术操作简单,不破坏患者股骨头本身的血液供应,创伤小,且不增加日后行人工关节置换的困难;②将具有骨诱导活性的DBM直接放入骨坏死区,成骨作用强;③增加股骨头负重区软骨下骨的机械支撑,降低局部应力,有利于股骨头坏死的修复及重建。     

新世纪老年病人的临床特点和护理对策

我院干部门诊自2002年6月至2004年4月共诊治高干老年病人约7 000人次,在诊疗过程中,我们采取以下方法.看:仔细观察老年病人的神志;听:耐心听取老年病人的主诉;问:有关疾病发生、转归的情况;答:有问必答,使老年病人满意.经多年实践证明,这是适合老年人生理、心理特点,能满足老年病人需求的护理对策,赢得了病人及家属的一致好评,现将做法介绍如下.