一例德朗热综合征患儿的致病基因变异分析

目的对1例疑诊德朗热综合征(Cornelia de Lange syndrome,CdLS)的患儿进行致病基因变异检测,明确其发病原因。方法应用高通量捕获测序对CdLS相关致病基因(NIPBL、SMC1A、SMC3、RAD21和HDAC8)进行测序,用Sanger测序验证测序结果以及致病基因的家系分析。结果患儿NIPBL基因存在c.6109-1G>A杂合剪接变异,Sanger测序验证结果表明患儿父母均未携带此变异,提示为新发变异,该变异未在HGMD及ExAC数据库收录。根据Human Splicing Finder预测剪接软件,预测该剪接变异将改变NIPBL基因剪接位点,为致病性变异。未发现SMC1A、SMC3、RAD21和HDAC8基因致病性变异。结论NIPBL基因c.6109-1G>A剪接变异可能是该例患儿的发病原因,新变异的检出丰富了NIPBL基因变异谱。     

HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及其代谢物的方法学研究

目的:建立HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及辛伐他汀酸浓度的方法。方法:取含辛伐他汀或辛伐他汀酸的大鼠肠道菌群孵育液加入含有内标物(异替格瑞洛,浓度为：1×10³ ng·mL^-1)的蛋白沉淀剂沉淀,离心后取上清液进行HPLC分析。色谱条件：Amethyst C18-H色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B)(80∶20)。检测波长237 nm,流速0.8 mL·min^-1,柱温30℃,进样量50μL。结果:采用甲醇溶液作为蛋白沉淀剂,含药菌液与甲醇溶液比例为1∶2时,在4℃下离心力为15 250 g离心,对辛伐他汀及辛伐他汀酸提取率最高。结论:该方法专属性强、提取率高、精密度好、操作简便,可应用于辛伐他汀相关的药动学研究。