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目的研究以重组蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒(FMDV)感染后的动物血清中特异性抗体的可能性,为建立一种非病毒颗粒的ELISA检测试剂盒提供实验依据。方法利用自行构建表达的O型口蹄疫病毒VP1表位肽重组蛋白(VP1epi)作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳工作浓度和包被方法,优化各项实验条件,并以FMDV感染后的豚鼠血清作为标准阳性血清确定ELISA方法的特异性和灵敏度。结果FMDV感染后的阳性豚鼠血清可以很好地识别VP1epi重组蛋白,用此蛋白包被检测抗FMDV抗体的灵敏度可达1∶3200,并证明所检测的抗体是FMDV特异性的。结论VP1epi重组蛋白可以替代FMDV颗粒用于建立检测抗FMDV抗体的ELISA试剂盒。 相似文献
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党内民主和人民民主是社会主义民主政治两方面的基本内容。党内民主是人民民主的基础和保障,实现高度的人民民主是社会主义民主政治的根本目标,二者是有机统一,相互促进的关系。以扩大党内民主带动人民民主关键是要以党内民主制度化引导人民民主制度化。 相似文献
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抽动秽语综合征(tourette syndrome,TS),是指以突然不自主的运动抽动和发声抽动为主要表现的复杂神经疾病,常伴有注意缺陷、多动、冲动、强迫行为和情绪障碍等问题,影响患儿学习和生活,可造成严重的社会心理障碍。多巴胺受体阻滞剂目前仍是该病的主要治疗药物,但该类药物因副作用较多限制了其临床应用。一些非多巴胺受体阻滞剂由于控制抽动症状效果欠佳,亦无法广泛应用。因此,探索新的 相似文献
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目的构建一种能够激发特异性细胞免疫功能的基因工程乙肝疫苗。方法选取HBV核心抗原18-27氨基酸CTL表位,用PCR的方法融合在结核杆菌热休克蛋白HSP65下游,并将此融合基因在大肠杆菌表达系统pET15b中表达。结果 已经构建出热休克蛋白-乙型肝炎核心抗原表位(HSP-HBV-ME)融合基因,并在大肠杆菌BL21中表达出融合蛋白,经SDS-PAGE和Western印迹分析证明所表达的蛋白质是HSP-HBV-ME融合蛋白。结论利用PCR法构建融合基因是一种简单、快速的方法,而且可以在构建过程中对密码子进行优化,从而达到高效表达重组蛋白的目的。 相似文献
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目的:从脐带血中分离单个核细胞以获得血管内皮前期细胞,并观察其生物学行为。方法:用密度为1.077的淋巴细胞分离液分离脐带血中单个核细胞,种植在铺有纤维连接素的培养板中,3 d后去除未附着细胞,观察附着细胞的生长情况,采用免疫组化法进行鉴定。结果:单个核细胞培养3 d后可见大量的附着细胞和少量梭形细胞,梭形细胞数量在第7天时达到高峰。附着细胞对第八因子相关抗原呈阳性反应。结论:在纤维连接素上培养来源于脐带血的单个核细胞可获得血管内皮前期细胞。 相似文献
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O型口蹄疫病毒VP1表位重组蛋白疫苗的构建、表达和纯化 总被引:8,自引:0,他引:8
目的 为了克服灭活口蹄疫病毒疫苗可能存在的传播病毒的潜在危险,构建一种能预防O型口蹄疫病毒感染的VPI表位重组蛋白疫苗。方法采用O型口蹄疫病毒(FMDV)表面VP1蛋白上的B细胞表位肽和T细胞表位肽,以PCR扩增和克隆连接等方法构建VP1表位六聚体重组蛋白(vP1epi)基因,并在大肠杆菌中进行诱导表达,镍亲和层析纯化。用ELISA法检测VPlepi免疫豚鼠血清中抗FMDV抗体的水平。结果构建了一种由FMDV表面vP1中B细胞表位肽重复六次的蛋白质多肽,采用pET28原核表达系统,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达产量约占菌体蛋白的30%左右,经镍亲和层析后获得纯度高于90%的VP1表位重组蛋白。VP1epi免疫的豚鼠血清中含有一定量的抗FMDV抗体。结论VP1epi重组蛋白能诱导机体产生抗O型FMDV的抗体,说明这种重组蛋白可能成为预防O型FMDV感染的基因工程蛋白质疫苗。 相似文献
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