NGAL基因3′端序列转录调控元件的克隆与鉴定

目的:将不同长度的NGAL基因 3′端序列(包括外显子、内含子和部分3′侧 翼非翻译序列)克隆到pGL3 Promote (pGLP)载体中,通过检测报告基因荧光素 酶活力,确认NGAL3′端序列中是否含有增 强子或抑制子元件。方法:应用PCR技术 从SHEEC细胞基因组DNA中扩增出不同 长度的NGAL基因片段F5(1880bp)和F (826bp),将其克隆到pGEM Teasy载体 并测序验证;再亚克隆到pGL3 Promoter载 体中,获得pGLP F5和pGLP F7表达载体 将pGLP F5和pGLP F7载体分别与pRL TK载体共转染HeLa、EC109和Vero细胞 通过检测相对荧光素酶活力,确认这些 NGAL基因片段中是否含有增强子元件 结果:我们成功构建了pGLP F5和pGLP F 重组载体。Hela、EC109和Vero转染细胞 与pGL3 Promoter相比,酶活力未表现出明 显的增强或减弱。结论:在本研究的实验 条件下,NGAL基因F5和F7片段内潜在的 顺式作用元件并没有发挥作用,或作用不 明显。     

NGAL基因3′端序列转录调控元件的克隆与鉴定

目的：将不同长度的NGAL基因3′端序列(包括外显子、内含子和部分3′侧翼非翻译序列)克隆到pGL3-Promoter(pGLP)载体中，通过检测报告基因荧光素酶活力，确认NGAL3′端序列中是否含有增强子或抑制子元件。方法：应用PCR技术从SHEEC细胞基因组DNA中扩增出不同长度的NGAL基因片段F5(1880bD)和F7(826bp)，将其克隆到pGEM-T easy载体，并测序验证；再亚克隆到pGL3-Pro-moter载体中，获得pGLP-F5和pGLP-F7表迭栽体；将pGLP-F5和pGLP-F7载体分别与pRL-TK载体共转染HeLa、EC109和Vero细胞，通过检测相对荧光素酶活力，确认这些NGAL基因片段中是否含有增强子元件。结果：我们成功构建了pGLP-F5和pGLPF7重组载体。Hela、EC109和Vero转染细胞与pGL3-Promoter相比，酶活力未表现出明显的增强或减弱。结论：在本研究的实验条件下，NGAL基因F5和F7片段内潜在的顺式作用元件并没有发挥作用，或作用不明显。     

司步间歇指令通气与压力支持通气模式进行自主呼吸试验对机体影响的比较

目的探讨同步间歇指令通气（SIMV）与压力支持通气（PSV）两种模式进行自主呼吸试验（SBT）对机体的影响是否不同。方法对ICU内需要呼吸机支持治疗超过48h的危重患者,使用SIMV或PSV模式进行SBT。对入选患者进行APACHEII评分,同时记录SBT前、SBT后2h和SBT后24h患者的呼吸、血压、心率以及测末梢血糖等指标。结果使用SIMV模式进行SBT的有14例（男9例,女5例）,使用PSV模式进行SBT的有18例（男15例,女3例）,两组患者的APACHEII评分无差异．且SBT前、SBT后2h及SBT后24h的呼吸频率、心率、平均动脉压以及末梢血糖等指标也均无差异（均P〉0．05）。结论使用SIMV模式或PsV模式进行SBT对呼吸循环及血糖的影响无差异。     

乌司他丁对大鼠缺血性脑水肿脑组织AQP4表达的影响

目的探讨乌司他丁对大鼠缺血性脑水肿脑组织AQP4表达的影响及意义。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,随机分为3组:对照组、治疗1组、治疗2组,取24h时相点用免疫组化方法观察大鼠模型缺血区AQP4的表达。结果治疗1组与对照组比较,24h后AQP4表达水平减轻(P<0.05),治疗2组与对照组相比,24h后AQP4表达水平明显减轻(P<0.01)。结论乌司他丁能通过下调脑缺血组织AQP4的表达,起到脑保护作用。     

危重症甲型H1N1流感患者1例成功救治体会

本院重症监护病房(ICU)抢救1例危重症甲型H1N1流感患者,经多科协作,严密观察,及时发现病情变化并给予有效治疗,积极的器官功能支持及对症处理等综合措施.抢救成功,报告如下.     

国产中心静脉导管包的临床验证

目的:评价深圳市安特高科实业有限公司生产的中心静脉导管包临床应用的安全性能及操作性能.方法:在重症加强治疗病房(ICU)住院且需要进行中心静脉置管的各种危重患者60例,签署知情同意书后入选.穿刺时采用的中心静脉导管包为深圳市安特高科实业有限公司生产的中心静脉导管(验证组)和我院正在使用的由韩国SUNGWON MEDICAL CO.,Ltd.生产的中心静脉导管包(对照组),对产品的外观设计、组成元件以及各元件的性能进行验证.同时观察其不良反应的发生情况.数据采用SPSS 13.0统计软件进行处理.结果:入选病例共60例,两组年龄、性别以及导管留置时间比较,均无显著性差异(P>0.05).两组产品的穿刺顺应性、感染率、堵管及渗漏等方面的不良反应比较,也均无显著性差异(P>0.05).验证产品的组成元件较对照组多、操作方便性更为满意.结论:本验证产品组成元件多,操作更为方便,性能可靠、安全,该产品能满足临床使用需要.     

硫化氢在心血管系统的作用及研究进展

硫化氢是人们发现的第3个内源性气体信号转导分子,它广泛地参与了神经、心血管、消化等系统的生理功能调节。在心血管系统,硫化氢主要由胱硫醚γ裂解酶合成,具有舒张血管、抑制血管重构、保护心肌等功能,并且与多种心血管疾病如肺动脉高压、高血压等的发病有着密切的联系。     

睾酮诱导人脐带静脉内皮细胞ERK1/2磷酸化的研究

目的:观察生理浓度睾酮(3×10-8mol/L)对人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化水平的影响。方法:将体外培养的HUVEC分为5个时间段睾酮组(睾酮作用后0、5、15、30、60min)和雄激素受体拮抗剂氟他胺预处理组,Western印迹测定睾酮作用于HUVEC后ERK1/2的活化程度。结果:睾酮可激活HUVEC ERK1/2,30min后达到高峰,而雄激素受体拮抗剂氟他胺可抑制睾酮对ERK1/2的激活。结论:生理浓度睾酮可通过雄激素受体促进细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化,且在作用30min后达到最大效应。     

NGAL基因3''''端序列转录调控元件的克隆与鉴定

目的将不同长度的NGAL基因3'端序列(包括外显子、内含子和部分3'侧翼非翻译序列)克隆到pGL3-Promoter(pGLP)载体中,通过检测报告基因荧光素酶活力,确认NGAL 3'端序列中是否含有增强子或抑制子元件.方法应用PCR技术从SHEEC细胞基因组DNA中扩增出不同长度的NGAL基因片段F5(1 880 bp)和F7(826 bp),将其克隆到pGEM-T easy载体,并测序验证;再亚克隆到pGL3-Promoter载体中,获得pGLP-F5和pGLP-F7表达载体;将pGLP-F5和pGLP-F7载体分别与pRL-TK载体共转染HeLa、EC109和Vero细胞,通过检测相对荧光素酶活力,确认这些NGAL基因片段中是否含有增强子元件.结果我们成功构建了pGLP-F5和pGLP-F7重组载体.Hela、EC109和Vero转染细胞与pGL3-Promoter相比,酶活力未表现出明显的增强或减弱.结论在本研究的实验条件下,NGAL基因F5和F7片段内潜在的顺式作用元件并没有发挥作用,或作用不明显.