内源性污染的形态学鉴定

1979年以来,应用电子显微镜对实验室培养的原代细胞株及引进的传代细胞株以及新近分离或引进的病毒株进行了检查,累计检查了227份标本,结果发现多数传代细胞污染有支原体,小鼠骨髓瘤细胞尚携带有逆转录病毒,某些毒株含有异形异科病毒,新分毒株中有混合感染现象.据此,我们认为在细胞培养、细胞库、毒种保存等工作中,应将电镜列为常规检查项目,与其它敏感性高、特异性强的方法密切配合,以保证工作的顺利进行.     

产生抗登革4型病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

登革热是东南亚地区由虫媒病毒引起的重要传染病之一。在登革病毒1—4型中,以4型病毒引起的病情最严重,出血型病例多,病死率高。我国在1978—1980年间,曾连续发生了登革热的暴发流行。在病原诊断中,用白纹伊蚊C6/36细胞大大提高了病毒分离率,但在鉴定分型中,因交叉反应明显造成困难。由于登革病毒具有型间和组间的共同抗原,故用一般的动物免疫血清或免疫腹水进行鉴定分型时,交叉反应难以克服。采用淋巴细胞杂交瘤技术,能够制备出对病毒单一抗原决定簇的单克隆抗体,可以很好地解决上述交叉问题。国外已有登革3型和2型病毒单克隆抗体的报导。为了平时和战时提供登革病毒型特异的诊断制剂,解决     

用单克隆抗体分析鉴定登革3型病毒的不同抗原决定簇

登革病毒(DEN)抗原成分复杂,与许多虫媒披膜病毒都有严重的血清学交叉反应。杂交瘤单克隆抗体(Mcab)技术建立之后,Dittmar等人首先制备出了抗DEN-3病毒的McAb,可进行DEN-3病毒的鉴定分型。随后,Henchal等人制备出了抗DEN1-4型病毒的McAb,用这些McAb进行DEN病毒抗原决定簇研究,依据间接免疫荧光染色(IFA)证实了DEN病毒的四种不同抗原决定簇,即:黄病毒属特异的、DEN-1-4型病毒特异的、DEN-1、3型病毒特异的和DEN病毒各型型特异的。阎国珍等人在研究抗DEN-4病毒McAb时,获得了抗DEN-2、4型病毒特异的McAb,证明DEN-2和DEN-4病毒间有共同特异抗原决定簇。本文介绍通过用抗DEN-3病毒McAb对不同披膜病毒抗原交叉反应测定来分析鉴定     

支原体抗原片制备技术的改进

细胞培养过程中支原体污染是个世界性问题,在国内也比较严重.为了快速特异地检出培养物中的支原体,我们开展了支原体单克隆抗体的研究工作.在抗体筛选过程中除选定敏感、特异、快速、简便的方法外,抗原片的质量也是一个不容忽视的重要问题.以前我们系按常规方法将液体培养基培养的支原体经高速离心(15000r/min,30min)后取其沉淀物直接涂片作为抗原片,用于抗体检测.此法抗原用量较大,再因支原体大小介于细菌和病毒之间,而且无细胞壁,形态多样化,染色结果不易观察,非特异性也较强,特别是进行1FA染色时,抗原显示与非特异的游离荧光素较难区别,给结果判定造成一定的困难.为了克服以上不足,我们把原来的抗原直接涂片法改为指示     

免疫荧光法检测生殖支原体抗原的研究及临床意义

目的研究间接免疫荧光技术(IFA)检测生殖支原体(Mg)抗原的敏感性及特异性,并探讨其临床价值。方法 以PCR为对照,采用Mg单克隆抗体作一抗行间接免疫荧光法检测生殖支原体抗原,对标准株及82份临床标本进行检测,比较其检出率和符合率。结果82例标本中IFA检测Mg抗原的敏感度为66.67％,特异度为100％,两种方法Mg检出率IFA为7.33％,PCR为10.95％,两者差异无显著性(P>0.05)。结论IFA检测法具有简便快速、特异性好和直观性强等优点。     

脊椎动物乙酰胆碱酯酶的多糖抗原决定簇及其抑制性单…

抗丁低双鳍电鳐电器官乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的抑制性单克隆抗体１Ｈ１１（ＩｇＭ），丁氏双鳍电鳐，石纹电鳐电官，比目鱼肌肉，大鼠脑，牛脑，人脑，牛红细胞及人红细胞ＡＣｈＥ均以不同的亲和层析法提纯，用酶抗原免疫测定法及不同的亲和层析法提纯，用酶抗原免疫测定法及酶联免疫吸附测定法检测了１Ｈ１１与上述脊椎动物的ＡＣｈＥ的交叉免疫反应性，结果表明，１Ｈ１１可与石纹电鳐，比目鱼肌肉，大鼠脑，牛红细胞ＡＣｈＥ及     

登革病毒单克隆抗体鉴定及其血清学性质观察

利用补体结合试验(CF)和血凝抑制试验(HI)对83份免疫荧光阳性的登革病毒单克隆抗体进行了鉴定,11份CF阳性,8份HI阳性。登革1型和4型病毒的单克隆抗体仅有CF活性,其中4F_7和4F_9滴度达到1:20480～1:40960,并且为CF型特异。而登革2型和3型病毒的单克隆抗体,则仅有HI活性,除3D_4为HI型特异外,其余均为HI属特异,与其他黄病毒属抗原有明显交叉。     

抗精氨酸支原体单克隆抗体的制备

本室制备了4株(A11、E5、F5、D1)抗精氨酸支原体的单克隆抗体(McAb )。用APAAP桥联酶标技术测定该抗体腹水效价为1:640～1:40 960,A11抗体的Ig类型是IgM,而E5、F5及D1均为IgG1。建立的4株能稳定分泌抗精氨酸支原体的McAb,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。该McAb用于检测细胞培养中的支原体污染,可特异性地检出精氨酸支原体,达到快速、准确的要求。     

猪鼻支原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

作者用提纯的猪鼻支原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,在PEG1000作用下,与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0-Ag14融合,共获得5株稳定分泌抗猪鼻支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株行进了鉴定。上述细胞株经3～6个月稳定传代,冻存于液氮中,复苏后其分泌抗体的水平未见下降。     

抗口腔支原体单克隆抗体的制备研究

本研究通过BALB/c小鼠免疫脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞(Sp 2/0)融合,融合率为100％(72/72),抗体阳性率为77.79％,并经筛选、克隆、建立37株分泌抗口腔支原体单克隆抗体的 杂交瘤细胞株(2A_(10)、2A_(11)、3C_8、2C_(10)、3G_3、2H_7和2H_(12)),抗体滴度介于4000～64000之间。同时,建立了检测抗体的BA法。该抗体与相应的口腔支原体以及人肺炎支原体、牛