毛鸡骨草体外对HBs Ag和HBe Ag的抑制作用

目的观察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将毛鸡骨草醇提取液与等容量、滴度为1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合,使混合后毛鸡骨草的浓度分别为96,48,24,12和6 g/L,用磷酸缓冲液与1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合作空白对照。每组6管,37℃水浴8 h和16 h后,采用ELISA法测定HBsAg和HBeAg的OD值,观察其对HBsAg或HBeAg的抑制作用。结果毛鸡骨草醇提取液对血清中HBsAg和HBeAg均具有抑制作用,可使HBsAg和HBeAg的浓度降低,呈现一个明显的量效和时效反应关系。其中毛鸡骨草在作用16 h,浓度为96,48 g/L时对HBsAg,HBeAg抑制作用最为明显（P〈0.05）。结论毛鸡骨草在体外有较明显的抗HBsAg和HBeAg作用。     

中药地枫皮及其伪品假地枫皮的DNA条形码鉴定

目的:评价和比较几个常用DNA条形码候选序列对地枫皮及伪品假地枫皮的鉴定作用。方法:采集不同产地的地枫皮及假地枫皮样品,进行总DNA提取,选取核基因内转录间隔区2(ITS2)序列、叶绿体rbcL,mat K基因序列进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,纯化产物测序,利用Condon Code Aligner V3. 7. 1校对拼接。结果:地枫皮及假地枫皮rbcL序列进行多次PCR扩增及测序结果均不理想,初步推测地枫皮及假地枫皮rbcL序列太长,进化较慢,不适合作为地枫皮及假地枫皮种间鉴别;地枫皮及假地枫皮的matK基因序列测序成功率分别为0和76. 8%,可能是不同类群的植物matK序列的引物标准不一;对地枫皮及假地枫皮的ITS2序列PCR扩增及测序结果最为理想,测序的成功率分别为89. 3%及91. 2%,对测序结果序列进行分析,地枫皮的ITS2序列总长度均为268个碱基,存在2个变异位点;假地枫皮的ITS2序列总长度均为430个碱基,存在4个或3个变异位点。实验结果说明地枫皮及假地枫皮ITS2序列较短,有明显的变异性,便于扩增,表明ITS2序列用于地枫皮及假地枫皮的分子鉴定优于rbcL和matK序列。结论:ITS2序列作为标准的DNA条形码能够有效地鉴定地枫皮及其伪品假地枫皮。     

彗星实验评价牛大力对60Co γ射线致小鼠DNA损伤的防护

目的 探讨牛大力对小鼠辐射损伤的防护作用.方法 40只小鼠随机分为阴性对照组、辐射模型组、牛大力低(5g·kg-1·d-1)、中(10g· kg-1·d-1)、高(20g· kg-1·d-1)剂量组.用5Gy60Co γ射线对除阴性对照组外的各组小鼠进行一次性全身均匀照射,制成放射损伤动物模型.牛大力剂量组小鼠在照射前4d及照射后10 d,以相应剂量的牛大力煎煮液连续灌胃14 d,最后一次灌胃24 h后处死小鼠,取肝、肾、肺、睾丸、脾组织进行彗星实验.结果 小鼠在接受60Coγ射线照射后,牛大力剂量组各组织细胞尾部DNA百分率(Tail DNA％)和尾矩(Tail Moment)与辐射模型组相比,明显降低(P＜0.01),并随着牛大力的浓度增加,Tail DNA％和Tail Moment逐步减少,呈明显的量效关系.结论 在一定剂量下,中药牛大力对60Co γ射线诱导的小鼠DNA损伤有不同程度的保护和修复作用.     

响应面法优化金果榄多糖提取工艺及抗氧化活性研究

目的研究复合酶提取金果榄多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法复合酶种类及配比为纤维素酶∶果胶酶∶木瓜蛋白酶=1∶1∶1,液料比固定为20 mL/g,以金果榄多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、复合酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺;采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力体系评价金果榄多糖体外抗氧化活性。结果金果榄多糖最佳提取条件为:酶解pH值5.1,酶解时间56 min,复合酶添加量2.0%,酶解温度52℃。在此条件下多糖得率为14.03%,与理论值14.12%的相对误差5%。酶解温度对多糖得率影响最显著,酶解时间、酶解pH值次之,酶添加量影响最小。金果榄多糖对DPPH、·OH、O2_~-·清除的半数抑制浓度分别为1.358、0.927、1.096 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论本研究优选的金果榄多糖复合酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性。     

毛鸡骨草含药血清体外抗乙型肝炎病毒作用的研究

目的:观察毛鸡骨草(Abrus mollis)含药血清体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采取中药血清药理实验方法,以HepG2.2.15细胞为研究模型,将毛鸡骨草含药血清加入HepG2.2.15细胞培养液中培养,分别在72 h和144 h收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附实验法(ELISA法)和荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测毛鸡骨草含药血清对HepG2.2.15细胞株表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBV DNA复制的影响。结果:毛鸡骨草含药血清对HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg的表达和HBV DNA复制都有不同程度的抑制,以给药剂量为30 g·kg-1·d-1的毛鸡骨草含药血清组作用144 h对HBsAg的抑制率和对HBV DNA复制的抑制率最明显,抑制率分别为34.4%和41.7%。结论:毛鸡骨草在体外有一定的抗HBV作用。     

夹竹桃科DNA条形码的初步筛选

DNA条形码(DNA barcoding)是一种新的物种鉴定技术,COI序列已成功应用于动物的鉴定,但目前国际上还没有找到一个通用序列能鉴定所有植物物种。为探索适合于夹竹桃科植物DNA条形码序列,拟用matK、ITS2、ITS 3个常规引物序列对夹竹桃科5个属的部分植物进行基因序列对比分析,并运用MEGA 7.0构建系统进化树进行系统发育分析、鉴定其亲缘关系。结果显示在ITS2、ITS、matK 3个引物序列中,只有matK引物序列能正常扩增目的基因,扩增成功率达到100%,并且该引物序列对比分析和系统发育树的聚类结果与传统分类学的鉴定结果一致。建议将matK序列作为夹竹桃科DNA条形码鉴定候选序列之一。     

SIRT3介导褪黑激素保护帕金森病多巴胺能神经元的作用机制

目的研究SIRT3在褪黑激素保护帕金森病(Parkinson’s disease,PD)多巴胺能神经元中的作用。方法48只小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,治疗组小鼠给予褪黑激素(10 mg·kg-1)和MPTP(30 mg·kg-1)腹腔注射,模型组小鼠给予MPTP腹腔注射,对照组小鼠同时给予等量生理盐水,褪黑激素连续给药14 d。采用免疫组化分析黑质TH、Iba-1表达情况,ELISA法检测中脑组织氧化应激指标(ROS、MDA、SOD)及炎症因子(TNF-α、IL-1β)水平,实时定量PCR分析SIRT3 mRNA水平,免疫荧光和Western blot检测蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠黑质TH表达减少、Iba-1表达增多,中脑组织氧化应激与炎症损伤明显增强,黑质SIRT3 mRNA和蛋白表达水平明显降低,SOD2蛋白表达减少,iNOS蛋白表达增多,组间比较差异均具有统计学意义( P <0.05)。治疗组小鼠经褪黑激素干预后,TH表达增多、Iba-1表达减少,氧化应激与炎症损伤明显减弱,SIRT3 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD2蛋白表达上调,iNOS蛋白表达下调,与模型组比较,差异均具有统计学意义( P <0.05)。 结论 褪黑激素通过上调SIRT3表达抵抗PD多巴胺能神经元损伤,作用机制与其抑制小胶质细胞激活减轻氧化应激和炎症损伤有关。     

五指毛桃矿质元素的测定分析

目的 通过对广西玉林产中药五指毛桃所含6种矿质元素的分析,探讨其药理营养作用及开发利用前景.方法 用火焰原子吸收分光光度法测定五指毛桃药用根部中Ca、Fe、Mg、Mn、Cu、Pb的含量. 结果五指毛桃含有丰富的人体所需矿质元素,其中Ca含量最高;Cu 、Mn、Fe、Mg元素的含量均达到人体所需正常值,重金属元素Pb含量较少;6种元素含量高低排序依次为Ca＞Mg＞Mn＞Fe ＞Cu＞Pb.结论 广西玉林产五指毛桃具有较好的药用和营养价值.     

黄花倒水莲对辐射损伤小鼠防护作用的研究

目的: 初步探讨黄花倒水莲提取物对小鼠辐射损伤的防护作用。方法: 以辐射损伤小鼠作为研究对象,分别以黄花倒水莲提取物2,4,8 g·kg^-1·d^-1灌胃,阴性对照组、辐射模型组给予等量生理盐水。灌胃5 d后,除阴性对照组外各组小鼠接受6 Gy的⁶⁰Co γ射线一次性全身均匀照射,然后再继续灌胃10 d,最后1次灌胃24 h后,检测各组小鼠外周血中红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、淋巴细胞数(Lymph),计算脾指数和胸腺指数,用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠脾细胞、骨髓细胞的DNA损伤。结果: 与阴性对照组比,辐射模型组、黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显减少(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的尾部DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)明显增大(P<0.01或P<0.05);但与辐射模型组比, 黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显增加(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的Tail DNA%和Tail Moment明显减少(P<0.01),存在剂量-反应关系。结论: 黄花倒水莲提取物对辐射所致小鼠造血系统和免疫器官损伤有一定的防护作用。     

鸡骨草对SD大鼠血脂及肝脂的影响

目的通过建立高脂血症大鼠模型来研究鸡骨草降血脂和抗脂肪肝的作用。方法将SD大鼠32只随机分为为空白对照组、高脂模型组、鸡骨草高剂量组(20g/kg)、鸡骨草低剂量组(10g/kg),每天对模型组、鸡骨草高、低剂量组灌胃高脂肪乳剂以建立高血脂模型,同时每天用鸡骨草煎煮液对鸡骨草高、低剂量组实施灌胃。21d后抽血并处死大鼠取出肝脏,测定大鼠血脂、肝脂和肝匀浆中MDA含量和SOD活性。结果鸡骨草能明显降低高脂血症大鼠血清和肝中TC、TG、MDA的含量,明显增高血HDL、Apo-A的含量,但低剂量组不明显。结论鸡骨草能降低高脂模型大鼠血脂和肝脂水平,具有一定降血脂、抗脂肪肝作用。