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1.
目的 建立同时测定N6-甲基腺嘌呤核苷(m6A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m6A甲基化水平。方法 HepG2和L02细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C18柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m6A和A的浓度,计算细胞m6A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m6A和A的浓度分别在0.15~50.00 ng/ml和1.50~500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %~101.10 %,回收率为91.46 %~97.60 %,基质效应为90.26 %~99.27 %,样品稳定性良好。HepG2和L02细胞m6A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m6A甲基化水平。 相似文献
2.
目的 采用银染法和鬼笔环肽染色方法探究骨细胞突触在不同发育阶段的组织形态并探讨两种染色方法在观察小鼠骨细胞不同发育阶段形态中应用价值。方法 取出生后0 d(P0)、5 d(P5)、15 d(P15)、21 d(P21)、28 d(P28)、35 d(P35)野生型小鼠的肱骨、股骨,制备冰冻切片及石蜡切片。对P35小鼠的股骨切片进行H&E染色,作为观察骨小梁和皮质骨中骨细胞的参照。对其他时期的肱骨组织切片采用银染法染色观察骨细胞和骨小管的形态,并记录各时期小鼠肱骨骨皮质和骨小梁中骨小管的长度。选取P10、P15两个时期小鼠肱骨的冰冻切片进行鬼笔环肽 iFlour-488染色,观察骨细胞的形态,并记录骨皮质中骨细胞突触的长度。结果 通过银染法染色,在P0~P15时期的小鼠肱骨骨小梁中,我们仅能观察到骨细胞轮廓,无法观察到骨小管的形态。在P21后,通过银染法可以观察到骨小梁骨细胞及骨小管的形态,且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长,P21 vs P28(P<0.05),P21 vs P35(P<0.05),排列整齐。在P15时期的小鼠肱骨骨皮质中,通过银染法即可以观察到骨细胞及骨小管的形态,且骨细胞周围骨小管的长度随年龄逐渐变长,P15 vs P21(P<0.005),P15 vs P28(P<0.0001),P15 vs P35(P<0.0001),排列整齐。采用鬼笔环肽iFlour-488染色,可以观察到P10和P15时期骨细胞的完整形态,骨细胞突触随着年龄增加逐渐变长,P10 vs P15(P<0.01),与周围骨细胞连接。结论 小鼠骨细胞突触随骨骼发育长度逐渐加长、排列逐渐整齐。银染法可以观察成年后骨细胞及骨小管的形态,对生长发育早期的骨小管形态显像不足。鬼笔环肽染色标记细胞骨架的方法适用于生长发育各时期的骨细胞染色,可以实现在发育早期对骨细胞的形态的检测。 相似文献
4.
张涛 《中国食品药品监管》2006,(11)
编辑部:召回制度是指产品的生产商、进口商或者经销商在得知其生产、进口或经销的产品存在可能危害消费者健康安全时,依法向政府部门报告,及时通知消费者,并从市场和消费者手中收回有问题产品,予以更换、赔偿的积极有效的补救措施,最早出现在1960年的美国汽车行业。药品召回是指药品生产经营者对已上市药品的撤回或改正行为。但在实际操作中,这又并非仅仅是一个企业行为,作为一种国际通行的制度,召回制度在世界很多国家都被写入了法律。当产品有严重缺陷或即使正确使用也存在重大安全隐患时,制造商和经销商有责任回收该产品。目前我国在这方… 相似文献
5.
局部神经阻滞麻醉下普理灵疝装置无张力修补腹股沟疝 总被引:3,自引:1,他引:2
目的 总结局部神经阻滞麻醉下应用普理炅疝装置治疗腹股沟疝的经验。方法 应用美国强生公司聚丙烯成型疝装置(PHS)在局部神经阻滞麻醉下对184例腹股沟疝行开放式无张力疝修补术。结果184例全部治愈,麻醉效果好.手术过程中。患者无明显疼痛感,术后疼痛轻微。均未使用止痛药。未出现特殊并发症。随访5~12个月(平均8个月)无复发,无明显异物感。结论 对于腹股沟疝局部神经阻滞麻醉是安全可靠的;按Gilbert分级Ⅲ~Ⅶ型病例,更加适合应用PHS。 相似文献
6.
7.
8.
EG:您被业界称为“中国娱乐营销第一人”,对此有什么感想?
叶:受之有愧。其实我走上这条路从某种意义上可以说是误打误撞。最早我在团委工作,很厌倦整天在机关里学习、读报纸、写心得体会什么的,正好当时团委决定搞三产,是团委所属的咖啡厅,我就不加犹豫地报了名,而且还签了一份协议,如果赢利,每月上交团委2000元钱,亏损自负。 相似文献
9.
头痛常见于神经性头痛、血管性头痛、颈源性头痛及高血压、付鼻窦炎、发热性疾病,颅内占位性病变等所致。在临床上由于颈部疾患而导致的头痛占有很大比例,我院针灸科自1989-1992年采用颈部点穴及针刺疗法关着重收治了240例颈源性头痛的患者,由于疗效较好,现将240例疗效观察整理报道如下。 1 临床资料 240例中,男性84例,女性156例。年龄最小者为12岁,最大者为68岁,其中20岁以下的10例,40岁以下的68例,40~60岁146例,61岁以上16例,病程最短者2天,最长者30年。 相似文献
10.