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应用细胞培养技术、电子显微镜技术、流式细胞仪技术及DNA末端原位标记染色法(TUNEL技术),观察亚硒酸钠溶液对胃上皮肿瘤SGC-7901细胞的抑制作用。结果随着亚硒酸钠溶液浓度增高、作用时间延长对SGC-7901细胞的抑制率升高;可见较典型的细胞凋亡形态学变化;流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”;TUNEL染色法细胞凋亡指数为8.4%~33.4%。证明亚硒酸钠溶液能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡;抑制作用与亚硒酸钠溶液的浓度及作用时间呈正相关。 相似文献
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目的 基于PCR-核酸试纸条技术,建立快速检测制药用水中皮氏罗尔斯顿菌的方法。方法 利用煮沸法提取皮氏罗尔斯顿菌基因组DNA,以皮氏罗尔斯顿菌16S rDNA为靶基因使用NCBI primer-BLAST 5.0设计一对特异性引物,经克隆转入大肠杆菌感受态细胞DH5α,鉴定PCR产物;分别在引物的5’端标记FITC与Biotin;组装核酸试纸条,建立PCR-核酸试纸条的方法;优化反应体系中胶体金标记的链霉亲和素与抗体浓度的最佳工作量;并对试纸条进行反应原理验证及灵敏度、特异性、稳定性评价;对某生物科技有限公司制药用水检测出的7株皮氏罗尔斯顿菌进行实验并利用MEGA构建进化树,对污染溯源进行分析。结果 煮沸法提取基因组浓度较好,纯度1.8~2.0;PCR产物经克隆转化、测序比对,与GenBank已登记的皮氏罗尔斯顿菌16S rDNA相似度为100%;利用胶体金放大原理,每100 μL胶体金溶液中,加入3.5 μL链霉亲和素进行标记,硝酸纤维素膜上检测线为2.0 mg/mL抗FITC抗体,质控线为1.2 mg/mL生物素化BSA,与阳性扩增产物结合产生红色条带;按照优化条件进行试纸条组装,每100 μL样品展开液中加入8 μL PCR产物,反应5 min后观察结果;核酸试纸条特异性结果与琼脂糖凝胶电泳结果一致,仅有皮氏罗尔斯顿菌为阳性结果,不动杆菌、气单胞菌、假单胞菌、非脱羧勒克氏菌均为阴性结果;核酸试纸条灵敏度评价,将DNA浓度降至10-5 ng/μL时,试纸条检测线仍有条带,较琼脂糖凝胶电泳结果灵敏度高1000倍;核酸试纸条稳定性评价,将试纸条在3、6、9、12月进行检测,稳定性较好。结论 建立PCR-核酸试纸条技术检测制药用水中皮氏罗尔斯顿菌,具有简单快速、特异性强、灵敏度高、成本较低等优点,适用于制药企业对制药用水的日常检测。 相似文献
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目的 检测唾液标本幽门螺杆菌(Hp)的16S rRNA基因及cagA基因,了解消化道疾病患者口腔中Hp存在情况及致病情况。方法 利用生物学信息技术,设计Hp 16S rRNA、cagA基因特异性引物,建立检测Hp 16S rRNA、cagA基因的多重PCR方法;重组克隆质粒构建标准阳性对照品;收集156例消化道疾病患者的唾液标本,提取唾液标本中细菌DNA,应用建立的多重PCR方法,检测Hp 16S rRNA基因及cagA基因,并对结果进行分析。结果 建立的检测Hp 16S rRNA基因及cagA基因的多重PCR方法特异性强,灵敏性较高,最低检测线为103 copies· μL-1;重组质粒pGMT-16s和pGMT-cagA,可作为鉴定Hp的标准阳性对照品;检测Hp感染的消化道疾病患者的唾液标本,口腔携带Hp 16S rRNA基因的阳性率为87.2%,cagA基因阳性率为23.1%。结论 Hp感染的消化道疾病患者口腔唾液标本中存在Hp,口腔中存在Hp可能是诱发消化道Hp感染及治疗后复发的一个重要原因。 相似文献
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目的:本实验通过分析SCNN1G基因rs5729的基因型及等位基因分布特点,探究此基因单核苷酸多态性与原发性高血压(EH)的关系。方法:采用高分辨率熔解曲线法(high resolution melting,HRM)对rs5729位点进行基因多态性分型检测。样本来自2018-06-2019-07吉林市中心医院高血压患者115例(病例组)和非高血压人群88例(对照组)。同时,在上述样本中随机选取81例采用测序法进行验证。结果:病例组的基因型频率是TT 67.82%、AT 25.22%、AA 6.96%,T、A等位基因频率分别为80.43%和19.57%;对照组中rs5729位点TT、AT、AA基因型频率分别为89.77%、9.10%、1.13%;T、A等位基因频率分别为94.32%和5.68%;病例组和对照组的基因型与等位基因频率在2组间分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论:利用HRM法对SCNN1G rs5729位点进行基因分型,发现其在高血压人群中分布存在差异。 相似文献
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木糖氧化无色杆菌致肺部感染合并败血症1例报告邱丽影张晓平(中国人民解放军第206医院检验科134001)赵云冬(吉林卫生学校132001)木糖氧化无色杆菌(AchromobacterXylocu-dans)为革兰氏阴性非发酵菌,属于产碱杆菌属的一个亚... 相似文献
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目的为了经济、快捷、全面地实现心功能的无创检测,基于胸阻抗法成功研发了一种心功能无创检测分析仪,可方便地实现胸阻抗信号、心电信号、心音信号的同步检测分析,从而实现对患者心功能的无创综合评价。该方法无毒无创,操作简单,完全可以实现家用化普及。方法本文首先描述了系统的硬件模块构成,说明了胸阻抗信号的采集过程。其次,使用FPGA芯片与DDS芯片构成系统的控制与信号发生核心,指出了恒流源的精度等性能指标。再次,指出了胸阻抗信号处理的要点,运用互感原理实现干扰信号的隔离。最后,介绍了仪器软件功能,并展示了仪器软件实测结果。结果通过临床试验,对胸阻抗法与超声多普勒法检测的数据结果进行t检验,结果表明二者具有一致性。结论由于采用了先进的特征点判别方法,该设备具有较高的临床检测精度和较好的临床适用性,可满足临床心功能无创检测和评估的要求。 相似文献
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目的:探讨在RNAi技术条件下,干扰VHS合成对HSV-1复制的影响及对宿主细胞Vero的保护作用。方法:根据siRNA设计原则,用T7RNA聚合酶体外合成3种针对VHS(UL41)mRNA的siRNA,用lipofectamine 2000将siRNA转染到Vero细胞中后感染HSV-1,MTT法检测了细胞12h到72h的细胞活力,并测定了各时间点的病毒滴度值,绘制了子病毒一步生长曲线。结果:子代病毒一步生长曲线和MTT活力测底结果表明,转染的3对实验组siRNA都出现了病毒滴度明显降低,细胞病变相对空白组延迟的现象。结论:体外合成VHS基因特异性siRNA,能够有效的抑制病毒的复制,同时保护宿主细胞,这为siRNA治疗HSV-1的感染提供的初步的理论依据。 相似文献
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下呼吸道感染病原菌分布及耐药性监测 总被引:2,自引:2,他引:2
目的:了解吉林省油田总医院下呼吸道感染病原菌分布及耐药性.方法:收集该院痰标本865例,进行常规细菌培养及药敏试验.结果:痰培养共分离出582株细菌,阳性率为67.3%,主要分离菌为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和葡萄球菌.大肠埃希菌产ESBLs菌阳性率为42.3%,肺炎克雷伯菌为48.6%,产与非产ESBLs菌株的耐药率比较,除庆大霉素对大肠埃希菌无统计学意义外,其他测试抗菌药物对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药率差异有统计学意义(P<0.01).耐甲氧西林葡萄球菌检出率较高,凝固酶阴性葡萄球菌为50.1%.金黄色葡萄球菌为65.3%.所有分离菌株对常用抗菌药物的耐药性检测结果显示抗菌药物的多重耐药现象严重.结论:痰培养的病原菌以革兰阴性杆菌为主,革兰阴性杆菌对亚胺培南和阿米卡星的耐药率最低:未发现万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌;病原菌多重耐药现象严重. 相似文献