Ⅰ型单纯疱疹病毒UL12基因在大肠杆菌BL21和Rosetta菌中的差异表达

目的构建Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)的UL12基因原核重组表达质粒pET32a-UL12,比较重组表达质粒pET32a-UL12在E.coli BL21和E.coli Rosetta表达产量与生物学活性。方法使用PCR的方法扩增出HSV-1的UL12基因,克隆至原核表达质粒pET32a(+),构建出重组质粒pET32a-UL12,分别转化E.coli BL21和E.coli Rosetta菌。经SDS-PAGE鉴定分析目的蛋白的表达差异,并比较在两种菌中目的蛋白的活性。结果重组质粒pET32a-UL12在E.coli BL21和E.coliRosetta的包涵体中均表达出了碱性核酸酶融合蛋白,E.coli Rosetta中表达的碱性核酸酶融合蛋白表达量较大,而E.coliBL21中表达的碱性核酸酶活性更高。结论成功构建了表达出了具有较高活性的HSV-1碱性核酸酶融合蛋白,为进一步研究抗HSV-1药物奠定了基础。     

高效液相色谱法测定成都市售蔬菜黄酮含量

目的建立黄酮含量测定的高效液相色谱法,并测定成都市售8种蔬菜中黄酮含量。方法采用高效液相色谱法,色谱条件：色谱柱Allsphere ODS-2Su C18柱,流动相乙腈和水（60：40）,流速1ml/min,柱温为25℃,进样量10μl,检测波长320nm。结果黄酮含量在0.02～0.2mg/ml范围内呈良好的线性关系（r2=0.999）,平均回收率99.3%（RSD=1.22%）。成都市售8种蔬菜中均含有黄酮类物质,芹菜和韭菜中黄酮类物质含量较高。结论建立的高效液相色谱法操作简便,分离度和灵敏度高,可适用于蔬菜中黄酮的测定。测定结果为合理的膳食指导提供了基础数据。