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谭映霞;;俞康;;胡永仙;;章圣辉;;高申孟;;吴建波; 《中国病理生理杂志》2008,24(7):1302-1307
目的:研究CD20scFv嵌合T淋巴细胞靶向杀伤Daudi细胞时杀伤的效果和T细胞活化情况。方法:将两种质粒转染至PA317细胞中,用转染成功的PA317上清液感染外周血T淋巴细胞后经800 mg/L的G418筛选1周后去杀伤Daudi、K562细胞,分别在不同时点用流式细胞仪检测Daudi细胞AnnexinⅤ的阳性率 ,用ELISA检测细胞因子IL-2、IFNγ。结果:Daudi细胞AnnexinⅤ的阳性率在24 h内两实验组与K562组相比明显增高,而实验组之间没有显著差异。72 h时CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组比CD20scFv-IgGFc组IL-2(1 509.00 ng/L比220.54 ng/L)和IFNγ(912.16 ng/L比251.42 ng/L)的分泌量有显著增高。结论:①两种CD20scFv特异的T细胞在引起Daudi细胞早期凋亡无显著差异,说明在CD20scFv的靶向杀伤过程中CD28-ζ基因可能不主导Daudi细胞的早期凋亡。②CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组IL-2、IFNγ增幅更加明显,说明CD3ζ和CD28嵌合的T细胞可以自身活化而不受MHC的限制,从而增强了T细胞的活化和杀伤等功能。 相似文献
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孕妇风疹病毒IgG、IgM检测及意义 总被引:8,自引:0,他引:8
目的:了解温州地区孕妇对风疹的免疫状态,探讨风疹病毒IgG、IgM检测对评估孕妇免疫状态及判断风疹宫内感染的作用。方法:用ELISA法对1471名产前检查孕妇检测风疹病毒特异性抗体IgG、IgM,电镜检查和分子生物学法检查组织中病毒颗粒和病毒核酸。结果:76.07%(1119/1471)的孕妇具有免疫力,7.41%(109/1471)有孕妇为原发感染,14.14%的孕妇为易感,2.38%(35/1471)的孕妇IgG、IgM均呈阳性,其中1例引产胎儿心肌细胞和1例死胎的心肌、肝及脑细胞中均发现病毒颗粒。结论:同时检测孕妇风疹IgG和IgM可以正确判断孕妇的免疫状态,对IgM阳性孕妇应进行连续多次检测,IgM持续呈阳性三个月以上的孕妇可大致确定为宫内感染。 相似文献
3.
目的:探讨多肿瘤抑制基因(MTS)P15和(或)P16的改变是否可影响急性淋巴细胞白血病(ALL)的病程及其预后。方法:跟踪30例复发的ALL患者在初诊和第1次骨髓复发时的骨髓标本,用PCR法监测P16 exon 1,P16 exon 2,P15 exon 1的缺失;用REP法检测P16 exon 1,P15 exon 1高度甲基化情况。结果:在初诊患者中共有50%(12/30)的患者有(或)P16基因失活,P16缺失的患者有8例,其中7例伴有P15缺失,7例P15甲基化的患者有2例伴P16甲基化。在初诊时,15例无该基因异常的患者,复发期间有11例出现P15和(或)P16异常,占86.7%(26/30),与初诊时48%(12/25)比较,差异有极显著性意义(P<0.01)。结论:我们认为P15和(或)P16的失活可加快疾病的复发,监测ALL患者的P15和(或)P16失活,可用于预测疾病的病程和预后,初诊和复诊均有异常者为难治性疾病。 相似文献
4.
目的:构建含小鼠CD40Ig基因的真核表达载体,为诱导供体特异性移植物的免疫耐受的基因治疗作准备。方法:以小鼠脾脏总RNA为模板,以RT-PCR法克隆小鼠CD40胞外段cDNA及IgG2a Fc段cDNA;另以pEGFP-N1质粒为模板获得绿色荧光蛋白(GFP)基因。将所得基因片段插入真核表达载体pDC516中得到重组质粒pDC516-CD40-IgG-GFP,测序鉴定正确后,用脂质体2000将其转染人胚肾上皮细胞(HEK293细胞),荧光显微镜下观察融合蛋白的表达。结果:成功构建了小鼠CD40Ig基因真核表达质粒pDC516-CD40-IgG-GFP,并在HEK293细胞中实现表达。结论:小鼠CD40Ig基因真核表达质粒pDC516-CD40-IgG-GFP构建成功,为诱导供体特异性移植物免疫耐受的研究奠定了基础。 相似文献
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苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡及其对Bcl-2、增殖细胞核抗原蛋白表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究苦参碱是否具有诱导RPMI8226细胞凋亡的生物学活性,探讨苦参碱对RPMI8226细胞Bcl-2及增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响及其作用的分子机制。方法:CCK-8法检测一定浓度的苦参碱对RPMI8226细胞的体外增殖抑制作用;AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;PI单染色法检测细胞周期改变;同时应用流式细胞术检测Bcl-2及PCNA蛋白表达的变化。结果:苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,呈量效关系;细胞周期分析,G0/G1期细胞相对增多、S期相对减少、G2/M期无明显变化。苦参碱处理组RPMI8226细胞中Bcl-2及PCNA蛋白的表达跟未加药组相比阳性表达率均降低。结论:苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显抑制作用,其作用主要通过诱导RPMI8226细胞产生细胞周期阻滞和凋亡,降低PCNA的表达。苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达下调对调控细胞凋亡有重要作用。 相似文献
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HPV11对小儿喉乳头状瘤预后的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
目的 :研究人乳头状瘤病毒 (HPV)型别对小儿喉乳头状瘤 (JLP)预后的影响。方法 :应用聚合酶链反应结合斑点杂交技术对 2 5例JLP的石蜡标本进行HPV定型分析 ,并统计HPV11、HPV6 感染组的气管切开率和术后复发率。结果 :HPV总检出率为 96.0 % ,其中HPV11为 5 6.0 % ,HPV6 为 4 0 .0 % ,HPV16、18、33无一例阳性。HPV11感染组的气管切开率为 71.4 % ,术后复发率为 85 .7% ;HPV6 感染组的气管切开率为 3 0 .0 % ,术后复发率为4 0 .0 %。两组分别比较 ,其差异均有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :HPV6、11与JLP发生密切相关 ,HPV11感染与JLP的喉梗阻和术后复发率相关 ,HPV11感染可作为JLP预后评判的重要依据。 相似文献
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大鼠心肺复苏后脑组织基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的研究 总被引:7,自引:3,他引:7
目的探讨心肺复苏早期脑组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的mRNA表达变化。方法用窒息法建立大鼠心肺复苏模型。80只SD大鼠随机分为假手术对照组和复苏组,然后依据时间分为假手术或复苏自主循环恢复(ROSC)后即刻及0.5、3、6和9h组。检测各组大鼠脑组织MMP-2、MMP-9及TIMP-1的mRNA表达情况。结果心肺复苏后3h大鼠脑组织MMP-9及TIMP-1的mRNA表达水平均开始上升,6h时显著增高,MMP-9/TIMP-1比值也相应增大。MMP-2 mRNA水平在心肺复苏后9h内未见明显升高。结论心肺复苏后早期就出现MMP-9、TIMP-1的mRNA表达增加及比例失衡,而MMP-2 mRNA水平在早期无明显变化。 相似文献
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目的:探讨卡氏肺孢子虫肺炎(pneumocystis carinii pneumonia,PCP)发病中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达情况。方法:通过建立大鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)体外培养技术,应用ELISA和RT-PCR法分别测定脂多糖(LPS)刺激致培养上清液中TNF-α蛋白和AM中TNF-α mRNA表达的动态变化。结果:与对照组相比,LPS能使PCP模型大鼠AM中TNF-α mRNA表达峰值提前,4h达峰值,使培养上清液中TNF-α蛋白表达峰值提前,8h达峰值。结论:脂多糖诱导卡氏肺模型大鼠AM提前分泌高水平的TNF-α,可能更易发生肺损伤。 相似文献
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目的 探讨三氧化二砷 (As2O3) 诱导 K562 细胞凋亡的发生机制。方法 分别以 1、2、4、8、16 μmol/L As2O3 诱导 K562 细胞凋亡,MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率,DNA Ladder 法检测细胞凋亡,Annexin V/PI 染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率,Rhodamine 123 染色流式细胞术检测线粒体膜电位 (ΔΨm) 变化,ELISA 法检测胞浆细胞色素C (CYTC) 水平,分光光度法检测 Caspase-3 活性,流式细胞术检测 Bcl-2 和 Bax 表达。结果MTT结果显示 As2O3 能抑制 K562 细胞生长,且呈现时间剂量依赖性;4~16 μmol/L 的 As2O3 作用 24 h 均可诱导 K562 细胞凋亡,同时伴有ΔΨm下降,胞浆内 CYTC 蛋白浓度及 Caspase-3 活性增高,胞浆 Bcl-2/Bax 值下降,且均呈剂量依赖性。结论 As2O3 诱导 K562 细胞凋亡可能是通过降低ΔΨm,激活线粒体凋亡途径实现的,Bcl-2/Bax 值下降可能与其有关。 相似文献