肉豆蔻化学成分和药理作用研究进展及其质量标志物（Q-Marker）预测分析

肉豆蔻Myristicae Semen是常用药食同源中药,具有温中行气、涩肠止泻的功效,主要包括木脂素类、挥发油类和多酚类等化学成分,具有调节消化系统、抗癌、抗炎镇痛、抗菌、抗氧化等药理作用。通过对肉豆蔻化学成分、药理作用、毒性和临床应用进行综述,根据中药质量标志物（quality marker,Q-Marker）理念,从植物亲缘、采收时期和炮制方法、药效、药性、配伍、化学成分可测性等方面对肉豆蔻的Q-Marker进行预测分析,初步预测去氢二异丁香酚、肉豆蔻醚、安五脂素、甲氧基丁香酚、榄香素、丁香酚和α-蒎烯等为其可能的Q-Marker,为肉豆蔻质量评价和药品研发提供参考。     

电子束辐照对广枣药材及水提液灭菌效果的影响

目的:探究电子加速器辐照灭菌对广枣药材和广枣水提液中有效成分没食子酸和总黄酮及微生物水平的影响。方法:采用2、4、6、8、10 kGy五个辐照剂量对广枣去核粉末和广枣水提液进行电子加速器辐照,分别比较辐照前后的性状特征、有效成分没食子酸和总黄酮含量以及细菌菌落总数、霉菌、酵母菌菌落总数的变化。结果:不同剂量电子束辐照后,广枣去核药材粉末图谱相似度高达0.999及以上,没食子酸和总黄酮含量无显著性差异,细菌菌落数、霉菌酵母菌菌落总数显著性降低(P<0.05),当辐照剂量为6 kGy时,微生物水平符合《中华人民共和国药典》2020版规定。广枣水提液性状、总黄酮未见明显差异,没食子酸含量显著降低(P<0.05),细菌菌落数、霉菌酵母菌菌落总数显著性降低(P<0.05),当辐照剂量为6 kGy时,微生物水平符合《中华人民共和国药典》2020版规定。结论:不同剂量的电子束辐照灭菌对广枣去核药材质量无显著影响,且辐照剂量达6 kGy时达到良好的灭菌效果。电子加速器辐照适用于广枣去核药材粉末灭菌,而对广枣水提液的质量影响显著,主要体现于降低没食子酸的含量。     

消风颗粒(Ⅱ)中氨茶碱含量测定

目的：建立消风颗粒（Ⅱ）中氨茶碱含量分析方法。方法：采用HPLC法，Supelco ODS C18柱，柱温30℃，流动相为甲醇-水（17：83），检测波长272nm。结果：氨茶碱在0．042～0．42μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率100．2％（n=6，RSD=2．1％）。结论：该法对样品不需特殊处理和分离，分析快速简便，专属性强，重复性好，结果可靠，可用于消风颗粒（Ⅱ）中氨茶碱含量测定。     

基于壳聚糖/海藻酸钠-聚乙烯醇的双层复合水凝胶膜伤口敷料研究

目的 制备聚乙烯醇（PVA）/海藻酸钠（SA）-聚乙烯醇（PVA）/壳聚糖（CS）双层（PAPCS）水凝胶膜伤口敷料,并进行质量评价。方法 将PVA与SA以质量比2∶1混合,配制PVA/SA混合溶液;将PVA与CS分别以质量比1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1混合,配制不同质量比的PVA/CS混合溶液;采用涂布法制备PAPCS双层水凝胶膜伤口敷料。通过水蒸气透过率、溶胀性能、保水性、力学性能、体外凝血性能和血液相容性考察对水凝胶膜的性能进行评价、筛选PVA与CS质量比;通过傅里叶变换红外光谱检测（FTIR）和扫描电子显微镜（SEM）对PAPCS水凝胶膜的结构和形貌进行表征;通过抑菌实验比较PAPCS以及PAPCS复合载碘交联环糊精金属有机骨架（I₂@COF@PAPCS）的体外抗菌性能。结果 PVA与CS质量比为2∶1时,PAPCS水凝胶膜综合性能较好。PAPCS水凝胶膜为多孔结构,具有良好的溶胀性能、保水性以及力学性能;PAPCS水凝胶膜的水蒸气透过率为（2 643.76±91.62）g·m^-2·d^-1,接近理想范围;与PVA/SA相比,PAPCS的凝血指数显著降低（P＜0.01）,为（72.93±3.58）%,溶血率小于5%,具有促进血液凝固的能力且血液相容性良好;与PVA/SA相比,PAPCS对于金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌均有明显抑制作用,抑菌圈直径分别为（11.89±0.22）、（12.28±0.25） mm;I₂@COF@PAPCS对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌圈直径分别为（21.95±1.47）、（18.89±0.81）mm,抑菌效果显著优于PAPCS（P＜0.001）。结论 采用涂布法可成功制备双层PAPCS水凝胶膜敷料,其各项性能指标良好,具有明显的凝血、抑菌效果,与I₂@COF复合使用,抑菌作用进一步增强。     

基于Nrf2/HO-1通路探讨二十五味鬼臼丸对宫颈炎大鼠的治疗作用及机制

目的 研究藏药二十五味鬼臼丸对苯酚胶浆致宫颈炎模型大鼠的治疗作用及机制。方法 将雌性SD大鼠48只随机分为对照组、模型组及二十五味鬼臼丸低、中、高剂量（0.2、0.4、0.8 g·^kg-1）组和抗宫炎片（0.47 g·^kg-1）组,每组8只。除对照组外,其余5组建立25%苯酚胶浆致宫颈炎大鼠模型,各药物组分别以相应药物ig给药,每日1次,连续给药12 d后取材。观察大鼠外阴炎症程度评分、子宫指数、子宫解剖形态学改变;采用苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠子宫组织病理学改变;采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测子宫组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量变化;采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法和蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测子宫组织中核因子E2相关因子（Nrf2）、血红素氧合酶-1（HO-1）、NADPH氧化酶4（Nox4）的mRNA和蛋白表达情况。结果 与对照组比较,模型组大鼠外阴炎症评分、子宫指数、子宫组织中MDA水平、Nox4的mRNA和蛋白表达均显著升高（P＜0.01）,体质量、SOD活性、Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达均显著降低（P＜0.01）,子宫组织出现不同程度的病理变化;与模型组比较,二十五味鬼臼丸能明显降低外阴炎症评分、子宫指数、子宫组织中MDA水平、Nox4的mRNA和蛋白表达（P＜0.05、0.01）,升高体质量及子宫组织中SOD活性和Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达（P＜0.05、0.01）,减轻子宫颈炎症损伤程度。结论 二十五味鬼臼丸可能通过抑制Nox4的表达,激活Nrf2/HO-1通路,发挥抗氧化作用,减轻炎症反应,从而抑制宫颈炎发展。     

藏药二十五味鬼臼丸对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及机制研究

目的 研究藏药二十五味鬼臼丸对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,初步探讨相关抑菌机制。方法 采用琼脂平板打孔法,测定二十五味鬼臼丸（50、100、200mg·mL^-1）对金黄色葡萄球菌的抑菌圈大小。通过微量肉汤稀释法,测定最小抑菌浓度（MIC）。调整肉汤培养基中的二十五味鬼臼丸浓度为0.5MIC、1.0MIC和2.0MIC,分别加入1.0×10⁸CFU·mL^-1菌悬液,以不含药液而含菌量相同的培养基作为对照组,在37℃、120r·min^-1恒温培养箱中振荡培养,每小时取样,用紫外可见分光光度计在600nm处测定吸光度（A₆₀₀）值,绘制细菌的生长曲线;每2小时取样,离心取上清液,试剂盒法测定碱性磷酸酶（AKP）活性;每小时取样,离心取上清液,用紫外可见分光光度计在260nm处测定A₂₆₀值,以A₂₆₀值表示DNA/RNA大分子相对量;每小时取样,离心取上清液,加入考马斯亮蓝G250溶液,于595nm处测定A₅₉₅值,检测胞外可溶性蛋白含量;培养8h后,离心留沉淀,进行SDS-PAGE电泳,检测菌体蛋白含量。结果 二十五味鬼臼丸50、100、200mg·mL^-1对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为（12.33±0.75）、（16.33±0.41）、（19.17±0.68）mm;对金黄色葡萄球菌的MIC为100mg·mL^-1;与对照组相比,二十五味鬼臼丸组的金黄色葡萄球菌生长显著减缓（P＜0.05）,胞外的AKP活性显著升高（P＜0.05）,胞外DNA/RNA大分子相对量显著升高（P＜0.01）,胞外可溶性蛋白含量显著升高（P＜0.01）,菌体总蛋白表达量明显减少。结论 二十五味鬼臼丸对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用,其抗菌作用可能与致细菌细胞壁、细胞膜结构破损,且对菌体蛋白具有一定抑制作用有关。     

黛芩化痰丸的定性定量控制研究

<正>黛芩化痰丸为江苏省中医院制剂,由黄芩、青黛、天冬、天花粉、射干、桔梗、化橘红、连翘等中药组成,具有清热化痰,利肺止咳之功效,主治肺热咳嗽,疗效显著。但目前制剂的定性定量标准尚不完善,因此,对其进行了定性定量研究。     

小儿清热颗粒指标成分测定和水提工艺研究

目的 建立小儿清热颗粒指标成分测定方法,并优选最佳水提工艺。方法 采用高效液相色谱法测定羟基红花黄色素A含量,以加水量、提取次数、提取时间为考察因素,以提取液干膏得率、乙酸乙酯萃取部位得率和羟基红花黄色素A转移率为评价指标,设计L₉(3⁴)正交试验以优选最佳水提工艺。结果 羟基红花黄色素A对照品溶液质量浓度在23.44～195.34μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 6,n=6),精密度、稳定性和重复性试验结果的RSD均低于2.0%,平均加样回收率为100.69%,RSD为0.81%(n=6)。最佳水提工艺为加10倍水,提取3次,每次0.5 h。结论 所建立的指标成分含量测定方法及优选的水提工艺稳定可靠、重复性好,可为藏药小儿清热颗粒的进一步开发奠定基础。     

HPLC法同时测定藏药三味檀香汤散中主要指标成分的含量

目的:建立HPLC同时测定藏药三味檀香汤散中指标成分没食子酸、去氢二异丁香酚的含量测定方法。方法:采用Ultimate XB-C₁₈液相色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以0.05%磷酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱(0～60 min, 10%B→100%B),总流速1.0 mL·min^-1,检测波长270 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果:没食子酸和去氢二异丁香酚分别在1.20～72.00μg·mL^-1、3.20～192.00μg·mL^-1的范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),6份样品中没食子酸和去氢二异丁香酚的平均加样回收率分别为100.2%(RSD=1.8%)、102.0%(RSD=1.2%),精密度(RSD=0.93%、RSD=0.46%)、重复性(RSD=1.2%、RSD=0.76%)、稳定性(RSD=1.0%、RSD=1.1%)均符合规定。2批样品中没食子酸含量分别为0.194 mg·g^-1和0.218 mg·g^-...     

肺热普清散对MHV-A59感染小鼠治疗作用及炎症因子的影响

目的 探讨藏药经典方肺热普清散对小鼠肝炎病毒A59（MHV-A59）感染小鼠模型的影响及其对炎症因子的作用。方法 以雄性昆明种小鼠为实验对象,利用 MHV-A59 滴鼻操作建立小鼠冠状病毒感染模型,设置对照组、模型组、阳性（利巴韦林）组和肺热普清散低、中、高剂量（25、50、100 mg·kg^-1）3组,每天ig给药1次,连续给药10 d,考察记录造模期内小鼠体质量变化,处死后称体质量并计算小鼠肺脏指数和肝脏指数;使用Elisa试剂盒测定小鼠血清中炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18）含量;利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法检测小鼠肝脏中IL-1β、IL-18 的mRNA表达水平和血清中MHV-A59病毒载量;通过苏木素-伊红（HE）染色,检测肺热普清散对肝脏和肺脏细胞坏死及炎症细胞浸润的影响。结果 与对照组比较,模型组的体质量增长缓慢（P＜0.01）;肺热普清散 3 个剂量组的体质量每日递增,中、高剂量组在第5～8天均与模型组有显著差异（P＜0.01）;各组小鼠肺脏指数组间无显著性差异,肺热普清散中剂量组肝脏指数与模型组有显著性差异（P＜0.05）;模型组病毒感染后血清中炎症因子 IL-1β 和 IL-18 显著性升高（P＜0.001）,与模型组比较,肺热普清散 3个剂量组均可降低血清中 IL-18水平（P＜0.001、0.01）;模型组肝脏组织中 IL-1β和IL-18 的 mRNA 表达水平均显著升高 （P＜0.001）;与模型组比较,肺热普清散高剂量组肝脏中 IL-1β转录水平显著降低（P＜0.01）;与模型组比较,肺热普清散 3组实验动物肝脏组织中 IL-18水平未出现显著性变化;MHV载量测定结果显示,与模型组比较,利巴韦林组和肺热普清散高剂量组血清中MHV载量显著性降低（P＜0.01）;病理切片结果显示,模型组肝脏细胞出现广泛坏死和变性,并出现炎症细胞浸润,气球样变等现象,肺热普清散高剂量和利巴韦林组出现点状病灶、炎症细胞浸润等明显减少现象;模型组肺组织肺泡明显间隔增厚,间质水肿,肺泡被压缩,有炎症细胞浸润,毛细血管扩张充血等现象,而肺热普清散中、高剂量组和阳性组肺组织肺泡间隔较窄,肺泡舒展,局部有炎性浸润和出血,肺泡腔内的分泌物明显减少。结论 肺热普清散对MHV-A59感染小鼠模型具有保护作用,其作用机制与抑制病毒复制和抑制感染后炎症因子有关。