逆转录病毒载体PLIL-2SN转导人CD3AK细胞方法的建立

目的 :探讨CD3AK细胞在基因治疗中的应用 ,并对逆转录病毒载体转导CD3AK细胞IL 2基因的方法进行研究。方法 :利用逆转录病毒载体PLIL 2SN向人CD3AK细胞中导入IL 2基因。结果 :从转导细胞中RT PCR扩增出 347bpNeoR 基因特异性片段 ,并测出培养上清液中IL 2浓度为 3 .2 76 μg·L-1。结论 :转导的IL 2基因得到表达 ,转导成功。这有助于进一步研究转导后淋巴细胞的功能 ,以开展基因免疫治疗的研究     

可溶性肿瘤抗原对小鼠CD_3AK细胞生物免疫功能的影响

目的:观察可溶性肿瘤抗原(STA———由S180 细胞提取)对小鼠CD3AK细胞的体外增殖、体外杀瘤活性以及体内抑瘤作用的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法),分别检测小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活性和杀瘤效应细胞体外杀瘤活性,并通过测定实体瘤质量来分析杀瘤效应细胞的体内抑瘤作用。结果:STA协同增强小鼠CD3 单抗诱导的小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活性。由STA联合小鼠CD3 单抗共同诱导的T- AK细胞,不仅在体外对S180 细胞杀瘤活性强于CD3AK细胞,且在小鼠体内抑制S180 肿瘤细胞的生长和扩散作用也强于CD3AK细胞。结论:STA能增强小鼠CD3AK细胞的体外增殖活性和杀瘤活性     

IL-2基因转导CD3AK细胞免疫学功能的研究

目的 :观察白细胞介素 2 (IL 2 )基因转导后CD3AK细胞免疫学功能的变化。方法 :应用逆转录病毒载体将IL 2基因转导入CD3AK细胞。检测转导细胞中特异性NeoR 基因、培养上清IL 2的表达水平及转导CD3AK细胞的体外增殖活性、细胞毒活性和细胞表型。结果 :从转导细胞mRNA中扩增出长度为 347bp的特异性NeoR 基因片段 ,转导细胞培养上清的IL 2表达水平显著增高 ,体外增殖活性和细胞毒活性均强于未转导组细胞 ,CD4 /CD8 值升高。结论 :PLIL 2SN逆转录病毒转导CD3AK细胞后 ,IL 2基因得到表达并增强CD3AK细胞的免疫学功能     

两种状态抗CD3单抗诱导人T淋巴细胞活化增殖的初步观察

目的：观察并比较粘附状态抗ＣＤ３单抗和游离状态抗ＣＤ３单抗诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖的能力。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入淋巴细胞增殖试验、苔盼蓝拒染法、间接免疫荧光染色法以及ＣＴＬＬ细胞ＩＬ－２检测法，分别检测人外周血单个核细胞，经两种状态抗ＣＤ３单抗刺激后，其增殖活性、外源性ＩＬ－２的协同作用、内源性ＩＬ－２释放以及ＩＬ－２Ｒ表达等生物免疫学指标。结果：粘膜状态抗ＣＤ３单抗刺激     

小鼠CD_3AK细胞抗肿瘤作用初步观察

目的：通过小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外对靶细胞的杀伤活性及其体内抗肿瘤作用的观察，了解ＣＤ３ＡＫ细胞的体内外抗肿瘤效应。方法：采用ＭＴＴ法检测小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外抗肿瘤细胞毒活性，并通过实体瘤的大小、瘤组织病理切片形态观察等分析小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞的体内抗肿瘤作用。结果：小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞不仅体外具有较强的细胞毒作用，且能在小鼠体内抑制Ｓ１８０肿瘤细胞的生长和扩散，并诱导Ｓ１８０细胞坏死，与生理盐水对照组比较有显著差异。结论：ＣＤ３ＡＫ细胞具有较强的体内外抗肿瘤作用     

抗CD3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法，ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性，ＩＬ－２，ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：     

自体异体表皮细胞与自体淋巴细胞混合培养的免疫反应

目的　探讨嵌入式混合植皮后排异反应受抑的免疫学机制。　方法　按不同比例 ,将烧伤患者表皮细胞、淋巴细胞与异体表皮细胞混合培养 ,模拟混合植皮时自体皮岛的局部免疫微环境 ,另将正常人相应细胞混合培养 (对照 )。采用3 H TdR法检测淋巴细胞cpm值 ,采用免疫组化技术检测HLA分子和T细胞亚群。　结果　 (1)烧伤患者表皮细胞能有效抑制淋巴细胞增殖反应 ,而正常人无此现象 ;(2 )烧伤患者表皮细胞中HLA DQ分子不介导自体淋巴细胞增殖受抑 ;(3)烧伤患者表皮细胞中HLA DR表达阳性率明显高于正常人 (P <0 .0 5 ) ,两者淋巴细胞中HLA DR分子表达相比较 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;(4)烧伤患者淋巴细胞中CD8表达明显高于正常人 (P <0 0 1) ,CD4表达明显低于正常人 (P <0 .0 1) ,CD3表达与正常人相比差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。　结论　大面积烧伤患者混合植皮时 ,自体表皮细胞可明显抑制淋巴细胞的增殖反应 ,其机制与烧伤患者自身淋巴细胞及表皮细胞的特殊免疫状况有关     

川芎嗪治疗新生儿缺氧缺血性脑病临床研究

目的探讨川芎嗪治疗新生儿缺氧缺血性脑病的疗效和安全性。方法将42例缺氧缺血性脑病新生儿随机分为研究组(基本治疗 川芎嗪治疗)23例,对照组(基本治疗)19例,同时选取10例健康儿为健康组。对三组患儿治疗前后一氧化氮、丙二醛、神经元特异性烯醇化酶、血钙、新生儿神经行为量表评分变化进行比较分析。结果入院1～2d研究组与对照组血钙无明显差异(t=0.893,P>0.05),且均低于健康组(t=4.866,4.803,P<0.05);10～11d后,治疗组上升明显高于对照组(t=2.341,P<0.05);血浆一氧化氮、丙二醛治疗前研究组与对照组无明显差异,研究组治疗后较治疗前明显下降,与对照组比较差异显著(t=3.76,2.13,P<0.05);研究组与对照组治疗前神经元特异性烯醇化酶无显著差异(t=0.243,P>0.05),两组较健康组高(t=6.09,5077,P<0.01),研究组治疗后较治疗前显著降低(t=9.15,P<0.01),对照组治疗前与治疗后无显著差异(t=1.839,P>0.05);研究组与对照组治疗前新生儿神经行为量表评分无显著差异,治疗后研究组较对照组评分差异明显(P<0.05)。结论川芎嗪可通过阻止钙内流,减少自由基,对缺氧缺血性脑病新生儿脑组织具有保护作用。     

两种状态抗CD_3单抗诱导人T淋巴细胞活化增殖的初步观察

目的：观察并比较粘附状态抗ＣＤ３单抗和游离状态抗ＣＤ３单抗诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖的能力。方法：采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入淋巴细胞增殖试验、苔盼蓝拒染法、间接免疫荧光染色法以及ＣＴＬＬ细胞ＩＬ－２检测法，分别检测人外周血单个核细胞，经两种状态抗ＣＤ３单抗刺激后，其增殖活性、外源性ＩＬ－２的协同作用、内源性ＩＬ－２释放以及ＩＬ－２Ｒ表达等生物免疫学指标。结果：粘附状态抗ＣＤ３单抗刺激ＨＰＢＭＣ，其增殖活性、活细胞总数以及增殖活性维持的时间均高于游离状态抗ＣＤ３单抗，且前者不依赖外源性ＩＬ－２；粘附状态抗ＣＤ３单抗诱导ＨＰＢＭＣ释放内源性ＩＬ－２以及细胞表面ＩＬ－２Ｒ表达的能力也强于游离状态抗ＣＤ３单抗。结论：粘附状态抗ＣＤ３单抗比游离状态抗ＣＤ３单抗具有更强的诱导人Ｔ淋巴细胞活化增殖能力。     

CD28单抗对CD3AK细胞增殖及表型的影响

CD3AK细胞是用小剂量CD3单抗交联CD3分子而活化的T细胞 ,它具有较强的细胞增殖和细胞毒效能。CD2 8分子则是T细胞激活过程中所需的协同刺激分子 ,可提供T细胞活化所需的第二信号。本文利用CD2 8单抗作为CD2 8分子的配体 ,观察了CD2 8信号途径的激活对CD3AK细胞的影响。结果显示CD2 8单抗可增强CD3AK细胞的增殖活性和趋化团聚形成集落的能力 ,并优先引起CD4+T细胞的增殖。