不同浓度葡萄糖对小鼠海马神经元细胞系HT-22细胞凋亡的影响

目的 探讨不同浓度葡萄糖对小鼠海马神经元细胞系 HT-22细胞凋亡的作用及机制。方法 体外培养小鼠海马神经元 HT-22细胞,使用不同浓度的高糖培养液（25、35、45、55、65、75 mmol/L）分别作用细胞 24、48、72 h,以 25 mmol/L 糖浓度为对照组,其余组为实验组。采用 CCK-8 法检测各组细胞活力变化,筛选出最佳作用时间。HT-22细胞经不同浓度葡萄糖作用 48 h后,微板法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）释放率;光学显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测 Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化。结果 CCK-8结果显示,高糖可抑制 HT-22细胞的活力,其抑制作用具有剂量和时间依赖性。高糖作用时间48 h时,细胞活力≥80%,可满足后续实验要求。随着葡萄糖浓度的增高,出现细胞数目减少,胞体变大,部分胞核溶解,突触断裂等改变,并且 LDH释放率及凋亡率也明显增高（P＜0.05）,Western blot结果显示凋亡蛋白 Bcl-2表达下降（P＜0.05）,Bax表达增高（P＜0.05）。结论 高糖能显著抑制 HT-22细胞生长和活力,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与 Bcl-2、Bax表达有关。     

高糖诱导HT-22小鼠海马神经元代谢记忆细胞模型的构建及影响

目的 体外构建高糖诱导HT-22小鼠海马神经元“代谢记忆”细胞模型,探究“代谢记忆”对HT-22细胞凋亡和组蛋白乙酰化的影响。方法 以高糖培养基(葡萄糖浓度为55 mmol/L)和常规糖培养基(葡萄糖浓度为25 mmol/L)培养HT-22细胞,分为常糖组(NG 4、6、8组,25 mmol/L葡萄糖分别培养4、6、8 d),高糖组(HG 4、6、8组,高糖培养4、6、8 d),代谢记忆组(HG2NG2、HG2NG4、HG2NG6、HG4NG2、HG4NG4组,即高糖2 d转25 mmol/L葡萄糖培养2、4或6 d,高糖4 d转25 mmol/L葡萄糖培养2 d或4 d)。CCK-8法检测细胞活力变化,检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量,筛选出建立“代谢记忆”模型的最佳作用时间。后续将细胞分为NG4组、NG8组、HG4组、HG4NG4组和HG8组,光学显微镜观察各组细胞形态;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测去乙酰化酶(HDAC)和组蛋白乙酰转移酶(HAT)活性;Western blot检测组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)、B淋巴细胞瘤-2(...     

SIX3基因变异导致前脑无裂畸形患儿的遗传学分析

目的:对1例前脑无裂畸形患儿的 SIX3基因进行变异分析,明确其可能的致病原因,为临床诊断提供依据。 方法:提取DNA样本,应用高通量测序技术对患儿进行基因变异分析,并用Sanger测序进行家系验证。结果:MRI提示叶状前脑无裂畸形伴胼胝体部分缺如。基因检测结果显示患儿 SIX3存在c...     

TSA对不同糖浓度下小鼠海马神经元HT-22细胞凋亡的影响#br#

目的　探究曲古抑菌素A（TSA）对不同糖浓度下小鼠海马神经元细胞系HT-22细胞凋亡的影响。方法　分别用高糖培养基（葡萄糖浓度55 mmol/L）及普通培养基（葡萄糖浓度25 mmol/L）培养小鼠海马神经元HT-22细胞,高糖培养基及普通培养基各分为对照组（NC组）和抑制剂组（TSA组）。用1 mmol/L的TSA作用细胞1、4、8 h,同时用0.4 mmol/L的TSA作用细胞1、4、8、12、14、16、20、24 h,CCK8法检测细胞存活率,确定抑制剂最佳作用浓度和作用时间;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测组蛋白去乙酰化酶（HDAC）和组蛋白乙酰转移酶（HAT）活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）的表达情况。结果　以0.4 mmol/L、20 h为TSA处理HT-22细胞的最适条件;ELISA结果显示,TSA作用后,HDAC显著减少,HAT显著增加（P＜0.05）;流式细胞术结果显示,在TSA抑制20 h后,细胞凋亡率显著增加,高糖环境下加入TSA,细胞凋亡情况更加严重;TSA作用20 h后,Bcl-2表达显著下调,Caspase-3显著上调（P＜0.05）。结论　TSA可能通过抑制HDAC增加组蛋白乙酰化水平,导致小鼠神经元HT-22细胞的凋亡。     

BBS1基因新突变导致Bardet-Biedl综合征的遗传学分析及产前诊断

<正>1 病例资料先证者,孕23+4周胎儿。孕妇,30岁,第3次妊娠,孕17+3周在外院行唐氏筛查,21三体、18三体和开放性神经管畸形(ONTD)筛查低风险,孕22+5周在外院行超声产前筛查,宫内妊娠,单活胎,胎儿左手异常(考虑多指畸形)、胎儿双肾增大并实质回声弥漫性增强(考虑多囊肾),转诊贵州医科大学附属医院(我院)产前诊断中心。本次妊娠自然受孕,无妊娠合并症、无放射性物质接触史、无服用药物史。其丈夫31岁,体健。否认近亲结婚、疾     

二苯乙烯苷、大黄素改善高糖诱导下小鼠海马神经元凋亡

目的 探讨何首乌主要成分二苯乙烯苷（TSG）、大黄素（Emodin）对高糖诱导下海马神经元HT-22细胞凋亡的影响。方法 将小鼠海马神经元HT-22细胞分为4组：对照培养基组（NC组,葡萄糖浓度25 mmol/L）、高糖培养基组（HG组,葡萄糖浓度55 mmol/L）、HG+TSG组和HG+Emodin组。HG+TSG组和HG+Emodin组分别用TSG和Emodin以50、100、200μmol/L的浓度作用细胞12、16、20、24、48 h,CCK-8法检测细胞存活率,确定细胞的最佳作用浓度和时间。流式细胞术检测细胞凋亡率;通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测4组细胞组蛋白乙酰化转移酶（HAT）和组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性;蛋白免疫印迹（Western blot）检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达。结果 TSG以200μmol/L、48 h,Emodin以100μmol/L、48 h作用细胞为最适条件。流式细胞术结果显示,TSG和Emodin干预细胞48 h后,细胞凋亡率显著...     

乳腺癌患者血清的傅里叶变换中红外光谱研究

目的　基于傅里叶变换中红外光谱技术建立一种有效区分和鉴别健康人群和乳腺癌患者的方法。方法　采集86例健康女性和85例乳腺癌患者的血清样品光谱，绘制两类人群血清样品光谱图；对两类血清样品分别提取主成分信息，绘制主成分得分2D和3D散点图，进一步计算主成分1~10的得分（PC1~PC10）；利用判别分析法原理建立判别分析模型，基于马氏距离对所有样本进行判别；在波数范围3 931~619 cm-1内计算不同光谱预处理方式下所建模型的性能指标评分，选择最佳预处理方式建立模型。结果　女性健康人群和女性乳腺癌患者的光谱在波数 3 363 cm-1、2 360 cm-1、1 641 cm-1、1 552 cm-1、663 cm-1处的峰强差异均有统计学意义（P＜0.05）；主成分分析结果显示，2组人群PC1~PC4差异有统计学意义（P＜0.05），PC5~PC10差异无统计学意义（P＞0.05）；与正常组相比，乳腺癌组患者到N的马氏距离值高，到C的马氏距离值低（P＜0.05）；所建模型的验证集正判率为100%；对光谱不进行任何处理下所建模型最优，性能指标评分为94.1分。结论　傅里叶变换中红外光谱法可用于区分和鉴别健康人群和乳腺癌患者，有望成为乳腺癌辅助诊断的一种方法。     

探讨低菌鼠认知功能的改变及粪菌移植的改善作用

目的 研究抗生素干预SD大鼠肠道菌群后,认知功能的改变及粪菌移植的改善作用。方法 随机选取30只SD雄鼠,分为对照组(NC)和低菌组(LB),低菌组给予广谱抗生素喂养5周,收集粪便16S rDNA测序,Morris水迷宫及旷场实验评估大鼠认知功能。低菌鼠构建后,低菌组给与正常粪菌移植12周,16S测序及行为学检测,HE观察海马形态,Western Blot法检测海马中凋亡相关蛋白表达,TUNEL染色观察神经元凋亡情况。结果 低菌鼠水迷宫逃避潜伏期增加、穿越次数减少,旷场实验显示低菌鼠自主运动减少(P<0.05)。粪菌移植处理后,低菌鼠学习记忆能力得到改善。16S rDNA测序结果表明,低菌鼠的物种数明显减少,在门水平变形菌门明显增多、厚壁菌门及拟杆菌门明显减少(P<0.05);在纲水平变形菌纲明显增多。粪菌移植后,低菌鼠粪菌移植组物种数恢复,厚壁菌门及拟杆菌门占比提高。HE染色显示粪菌移植组海马神经元排列较整齐,但海马组织神经元凋亡细胞增多,Bax、Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2表达水平减少。结论 低菌鼠学习记忆下降,粪菌移植后可以改善大鼠行为学改变,恢复菌群结...