日本血吸虫凝溶胶蛋白的克隆、表达及转录时相分析

目的 构建日本血吸虫凝溶胶蛋白(Sjgelsolin)的原核表达载体,获得其表达产物并分析其在不同发育阶段的转录水平.方法 根据序列AY814387设计引物,体外扩增Sjgelsolin的蛋白质编码序列,将其插入pET28a(+)质粒,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达.提取日本血吸虫虫卵,尾蚴,7-d童虫,42-d雌、雄成虫的总RNA,用半定量RT-PCR分析Sj gelsolin在每个样本中的转录水平.结果 成功构建了pET28a(+)-Sjgelsolin重组质粒,并获得高水平的表达.Sjgelsolin转录子在尾蚴和雌虫成虫中未被检测到,而在7-d童虫和42-d雄虫成虫中被检测到.结论 Sjgelsolin在体外获得表达,且其转录是受发育调控的.     

牛脉络膜微血管内皮细胞的分离培养和鉴定

为了在体外研究脉络膜微血管内皮细胞，采用胰蛋白酶和胶原酶二次消化法成功地从牛眼球中分离培养了脉络膜微血管内皮细胞。接种后４８ｈ已出现岛状细胞团；９６ｈ细胞团增大，可区分出细胞密度较大的中央区及细胞密度较小的边缘区；１４４ｈ细胞开始汇合成单细胞层；１６８ｈ细胞已汇合成单细胞层。通过形态学特征、第Ⅷ因子相关抗原和乙酰化低密度脂蛋白受体检测证实是内皮细胞。该细胞体外培养方法的建立为体外研究脉络膜微血管内     

维生素E对Aβ_(1-42)诱导N2a细胞凋亡的保护作用

阿尔采末病(Alzheimerp's disease, AD)亦称老年性痴呆症,是一种常见的中枢神经系统退行性疾病,主要临床表现为进行性记忆力减退、认知功能障碍以及人格改变,判断力下降等症状.我国55岁以上老年人群中,AD发病率为4.8%[1],并不是一个AD低发病国家.因此,对于AD发病机制和防治的研究近些年来已经成为国内关注的热点.AD的主要病理特征有:在大脑皮层和海马出现淀粉样蛋白(amyloid-β protein,Aβ)聚集形成的老年斑(SP),Tau蛋白异常聚集形成的神经纤维缠结(NFT)以及脑皮层和海马区神经细胞减少[2].     

顺铂处理卵巢癌细胞系OVCAR3引起Survivin表达差异的研究

的 探讨顺铂(DDP)处理卵巢癌细胞系时Sur-vivin表达是否有变化,进而探讨Survivin表达与肿瘤细胞耐药之间的关系及其在肿瘤细胞获得性耐药及细胞凋亡耐受所起的重要作用。方法 以卵巢癌细胞系OVCAR3为材料,用MTT比色法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。RT-PCR检测Survivin mRNA表达差异,Western blot检测Survivin蛋白表达变化。结果 顺铂抑制卵巢癌细胞生长,具有时间和浓度依赖效应,即随时间延长和浓度增加,细胞生长抑制越强,细胞凋亡率也有同样的趋势,最高达31.6％。1mg·L~(-1)DDP处理卵巢癌细胞,Survivin mRNA及蛋白表达随作用时间的增长,分别在8 h和12 h达最高,随后又降低。结论 抗凋亡蛋白Survivin在卵巢癌细胞系中呈高表达,顺铂处理卵巢癌细胞,Survivin mRNA表达随作用时间延长而增加,这可能是卵巢癌细胞对化疗药物产生耐药性的重要因素之一。     

线粒体变化机制与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病(AD)亦称老年性痴呆症,是一种常见的中枢神经系统退行性疾病,临床主要表现为进行性记忆力减退、认知功能障碍以及人格改变等症状.AD的主要病理特征有:大脑皮层和海马出现β-淀粉样蛋白(Aβ)聚集形成的老年斑(SP)、Tau蛋白常聚集形成的神经纤维缠结(NFTs)以及脑皮层和海马区神经细胞大量减少丢失[1].最近研究表明,AD病变过程与线粒体能量代谢障碍有着密切的联系,本文综述了AD病变与线粒体结构功能异常间的联系.